探析不同pcr扩增试剂盒检验血样dna结果

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1、探析不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA结果【摘要】目的探讨不同PCR扩增试剂盒在血样DNA中的检验及对比结果。方法抽取320例血样DNA作为检测对象，并应用不同PCR扩增试剂盒进行检测，在此基础上，结合所得的血样检验结果进行分析比较。结果经研究，在样本相同的情况下，血样检验差异率为1.25%(4/320)o而且经检测，4例出现不同检验分型的样本均存在等位基因缺失。另外,ProfilerPlusTM扩增不平衡发生率为0.9375%,IdentifilerTM扩增不平衡发生率为0.3125%,Powerplex16HS扩增不平衡发生率为0.3125%o结论在血样DNA的检验过程中

2、，通过应用不同PCR扩增试剂盒进行检测，能够准确获取到不同位置的异常基因，减少基因缺失、扩增不平衡所带来的误差影响，具有较高的推广价值。【关键词】PCR扩增试剂盒；血样DNA；检验；扩增不平衡；基因缺失doi：10.3969/j.issn.1004-7484(s).2013.11.834文章编号：1004-7484(2013)-11-6808-02聚合酶链式反应(PCR)是常用于基因分离、克隆及DNA或RNA检测的一种体外酶促合成特异DNA片段技术［1］。在当前，随着现代医疗技术的不断发展，以及DNA血样检验技术在检验医学中的应用日趋于普遍，使得不同PCR扩增试剂盒在实际检验

3、中显露出越来越明显的结果差异。为此，本研究拟结合不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果进行讨论，现具体报道如下。1资料与方法1.1一般资料1.1.1研究对象本研究抽取我院数据库积累的320例汉族血样作为研究对象，其中，男性为219例；女性为101例。年龄均在22岁到69岁之间，平均年龄(40.1±2.2)岁。而且经了解，全组320例血样均不存在血缘关系。1.1.2仪器选用仪器选用美国ABI公司生产的9800型PCR扩增仪，以及该公司生产的3500型基因分析仪。1.1.3硅珠法资料硫氧酸肌.能够使蛋白质与DNA充分分离，在硅珠吸附前髙速离心可以将变性的蛋白质及一些不溶的物质除

4、去。吸附后的漂洗过程则可将溶液中的PCR抑制物洗去。高浓度的硫氧酸肌条件下，DNA能够被SiO2特异性吸附，若无硫氧酸肌存在，DNA则可重新释放出来。1.2方法采用硅珠法提取血样中的DNAo按照相关要求，将PCR扩增仪反应体系设置为10uL,其余(如成份、热循环参数设置等)按照仪器说明书进行严格设置和操作。试剂盒主要选用Powerplex16HS,以及Prof订erPlusTM和IdentifilerTM等3种，用于分列出等位基因。具体按照0.05ng>0.075ng和1一8昭的剂量，分别用于扩增并检验血样DNA。2结果经研究，本组320例血样中，相同样本的检验差异率为1.2

5、5%(4/320)o而且经检测，4例出现不同检验分型的样本均存在等位基因缺失。另外，ProfilerPlusTM扩增不平衡发生率为0.9375%,IdentifilerTM扩增不平衡发生率为0.3125%,Powerplex16HS扩增不平衡发生率为0.3125%。3讨论Powerplex16HS、ProfilerPlusTM以及IdentifilerTM等试剂盒是医学领域上经常用到的3种遗传标记系统［4］。一般在采用PCR扩增试剂盒对血样DNA进行检验时，往往会由于选用的试剂盒不同，而出现被检测异常基因的位置不同的情况，且基因缺失、扩增不平衡等两种是其主要的表现形式［2］。

6、不过据有关资料显示，Prof订erPlus试剂盒在所有PCR扩增试剂盒当中，出现异常的百分比相对要高得多［5］o在本组320血样研究中，经不同PCR扩增试剂盒检验，4例出现不同检验分型的样本均存在等位基因缺失。另外，ProfilerPlusTM扩增不平衡发生率为0.9375%,IdentifilerTM扩增不平衡发生率为0.3125%,Powerplex16HS扩增不平衡发生率为0.3125%O应用PCR扩增试剂盒检验血样DNA时，应尽可能选用同一类型且具有较低异常百分比的试剂盒进行检验。并可通过相互检验的方式，来进一步降低重要判型过程中的错判率[4]。本组相同样本存在的检验

7、差异率为1.25%O经本研究表明，在血样DNA的检验过程中，通过应用不同PCR扩增试剂盒进行检测，能够准确获取到不同位置的异常基因，减少基因缺失、扩增不平衡所带来的误差影响，具有较高的推广价值。参考文献[1]周翼，吴林军•不同PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果对比分析[J].中国医药科学，2012,04(15)：263-264.[2]柳天天.几种常用PCR扩增试剂盒检验血样DNA的结果比较[J]•中外医疗，2012,05(01)：174-175.[3]王秋平，陈斌，张琼，雷秀霞，周小棉，匡艳华.3种免