慢周期肿瘤细胞的相关研究

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1、博士学位论文慢周期肿瘤细胞的相关研究学校代码：10023学号；B2010003016Research012slow-cycl‘tumorcells012Scyc11ng所院：姓名：指导教师：导师小组：学科专业：研究方向：完成日期：肿瘤医院肿瘤研究所孙青张叔人研究员张友会研究员刘滨磊研究员免疫学肿瘤免疫及肿瘤的生物治疗2013年4月北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯9材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯12实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯45讨{仑⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯75结论及创新点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯87文献综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯89参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯97基金支持⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

3、⋯⋯⋯⋯⋯⋯108已发表与学位论文相关的英文论文⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯109个人简历⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯124致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯126学位论文原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯127学位论文授权使用说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯127北京协和医学院中国医学科学院博上学位论文表索弓f表索引表1DiI“神的慢周期肿瘤细胞与普通肿瘤细胞(Dil’)致瘤性比较⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49表2GO期肿瘤细胞

4、与Non—GO期细胞致瘤性比较⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5l表3FU—CT-26细胞与non—FU．CT-26细胞致瘤性比较⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57表4流式细胞仪检测慢周期肿瘤细胞及普通肿瘤细胞表面MHC分子和细胞活化所需的共刺激分子的表达水平及平均荧光强度⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7l2北京协和医学院中国医学科学院博士学位论文图索引图l荧光显微镜观察DiI染色的CT-26细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯46图2流式细胞术检澳lJDiI染色的CT-26细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯47图3DiI染料染色对肿瘤细胞增殖的影响⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯48图4Hoechst33342和PY双染料染色流式分选图⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯50图5GO期肿瘤细胞及肿瘤细胞群体的侧群细胞(sP)分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52图6MTT法对分选出的DiIh蛐细胞及DiI’细胞进行体外药物敏感实验⋯⋯53图7MTT法及流式细胞法检测体外慢周期肿瘤细胞对化疗药物的敏感性⋯⋯54图8流式细胞法检测体内慢周期肿瘤细胞对化疗药物的敏感性⋯⋯⋯⋯⋯⋯．55图9流式检测5．FU处理后的细胞分化成其他细胞的能力⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58图10丝裂霉素C灭活FU．CT-26及non．FU．

6、CT-26后，MTT法检测两种细胞的增殖情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯58图11灭活的慢周期肿瘤细胞在体外诱导更强烈的脾细胞增殖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯59图12灭活的慢周期肿瘤细胞在体外诱导脾细胞释放更多的丫_干扰素⋯⋯⋯⋯60图13灭活的慢周期肿瘤细胞作为疫苗治疗后，荷瘤小鼠的肿瘤体积显著降低⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61图14灭活的慢周期肿瘤细胞作为疫苗治疗后，荷瘤小鼠的生存时间明显延卡乏⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯62图15肿瘤细胞疫苗治疗实验后

7、的再攻击实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯63图16未经任何治疗的荷瘤小鼠脾淋巴细胞体外杀伤肿瘤细胞的效率⋯⋯⋯⋯65图17肿瘤细胞疫苗治疗后，各组小鼠脾淋巴细胞对四种肿瘤细胞的体外杀伤效率⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯66图18式细胞仪检测慢周期肿瘤细胞及普通肿瘤细胞表面MHC分子及T细胞活化所需的共刺激分子的表达情况⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯683北京协和医学院中国医学科学院博上学位论文中英文缩略词5．FUCSCsFBSPBSMMCSPMTTCTLsNKTCRCFSEELISAGM—CSFIFN-丫

8、MHCMLTCFITCPEPIPYDiI中英文缩略词5．fluorouracilcancerstemcellsfetalbovineserumphosphate-bufferedsalinemitomycinCsidepopulati