运用裸鼠动物模型筛选胃癌转移相关蛋白和基因

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1、万方数据目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3符号说明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”5前言．．⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯．．·⋯·．⋯⋯⋯⋯·······⋯··”··⋯··“⋯···⋯””⋯⋯·-···⋯”⋯⋯·6刖舌”⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯⋯⋯⋯⋯“”⋯””⋯”⋯“⋯””⋯””⋯⋯””⋯”⋯⋯”第一部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、·10材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··10结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯14讨论⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··⋯⋯·16第二部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-18材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯26讨论⋯⋯⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯·”

3、⋯⋯·⋯⋯33第三部分⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··36材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·36结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·“⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯41三部分结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-·43万方数据参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··44综述⋯⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”·⋯⋯⋯⋯··⋯·

4、⋯··⋯⋯⋯⋯······⋯····⋯····⋯⋯⋯⋯⋯·⋯·49致谢··⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯····⋯⋯⋯···⋯·”···⋯⋯⋯⋯···⋯⋯··⋯⋯”⋯⋯··⋯⋯⋯⋯·56攻读学位期间发表的学术论文．．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··57原创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··58万方数据泰山医学院硬士学位论文运用裸鼠动物模型筛选胃癌转移相关蛋白和基因研究生：牛丽婷专业：病理学与病理生理学导师：王学春教授赵英会教授中文摘要目的：通过制备裸鼠胃癌转移模型获得转移前后胃癌肿瘤组织

5、，应用双向电泳相关技术分离并筛选裸鼠胃癌转移前后肿瘤组织的差异表达蛋白，应用基因芯片技术筛选胃癌转移前后肿瘤组织的差异基因。为进一步研究胃癌转移机制及靶向治疗奠定理论基础。方法：1．体外培养低分化人胃腺癌细胞(BGC一823)，收集细胞并将其注射至裸鼠背部皮下，成瘤后经传代形成的实体瘤继续种于裸鼠胃壁，等待其转移。2．获得转移前、后胃癌肿瘤组织(包括出现转移前、后胃壁肿瘤组织，肝转移肿瘤组织，肠系膜淋巴结转移组织)，分别提取蛋白并采用双向电泳技术分离蛋白。用PDQest8．0图像分析软件对图像进行分析和差异点寻找。采用4800plus

6、MALDITOF／TOF质谱仪对综合三组结果后的差异蛋白位点进行质谱鉴定。3．制作裸鼠胃壁上转移前、后肿瘤组织的基因表达谱以研究胃癌转移前后的差异基因。将Cy3用单色标记法标记后与芯片杂交，得到不同基因的荧光信号，再将荧光信号转变为数字信号。经过统计分析得出差异基因。结果：1．成功制各裸鼠胃癌转移模型，胃壁种植9．10周后在部分裸鼠的肝脏及肠系膜淋巴结出现胃癌转移灶。2．应用双向电泳技术成功地将出现转移前、后胃壁肿瘤组织；出现转移前胃壁肿瘤组织和转移到肠系膜淋巴结肿瘤组织；出现转移后胃壁肿瘤组织和转移到肠系膜淋巴结肿瘤组织三组分别进行

7、蛋白分离。发现转移前、后胃壁肿瘤的差异蛋白位点有82个，其中40个表达上调，42个表达下调；转移前胃壁肿瘤和转移到肠系膜淋巴结万方数据泰山医学院硕士学位论文肿瘤组织的差异蛋白位点有120个，其中76个表达上调，44个表达下调；转移后胃壁肿瘤组织和转移到肠系膜淋巴结肿瘤组织的差异蛋白位点有63个，其中41个表达上调，22个表达下调。应用4800plusMALDITOF／TOF质谱仪成功鉴定出热休克蛋白、微管相关蛋白、骨架连接蛋白、膜突蛋白、膜联蛋白、钙调蛋白、抗氧化蛋白、Ran结合蛋白、构建核仁磷脂蛋白、过氧化氧化还原蛋白、细胞内氯离子

8、通道蛋白、胞质肌动蛋白、核内不均一核糖蛋白、骨架相关蛋白、载脂蛋白、转铁蛋白等与转移相关的蛋白和无机焦磷酸酶、烯醇化酶、醛缩酶A、磷酸甘油激酶l、胰蛋白酶等与转移相关的酶类。3．通过基因芯片技术筛出在45000个基因中，