基于绿球藻、大型溞的猪场沼液净化及资源化利用的研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M150103098上海海洋大学硕士学位论文题目：基于绿球藻、大型溞的猪场沼液净化及资源化利用的研究Studyonpurificationandresourceutilizationof英文题目：piggerybiogasslurrybasedonChlorococcumsp.andDaphniamagnaStraus专业：动物营养与饲料科学研究方向：生物饵料与生态环境姓名：赵陆敏指导老师：黄旭雄教授二零一八年五月上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨

2、学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数

3、据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年月日日期：年月上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单姓名工作单位职称备注中国水产科学研究院东施兆鸿研究员主席海水产研究所张根玉上海市水产研究所研究员委员中国水产科学研究院东高露娇研究员委员海水产研究所李松林上海海洋大学讲师秘书答辩地点水产与生命学院A101答辩日期20180526上海海洋大学硕士学位论文基于绿球藻、大型溞的猪场沼液净化及资源化利用的

4、研究摘要猪场沼液高效净化及资源化利用是生猪集约化养殖可持续发展的关键技术。沼液富含氮、磷、有机物等多种营养物质，而氮、磷是微藻的生长需要的重要元素。利用微藻净化猪场沼液，一方面，污水中的污染物可以被微藻吸收或吸附，对污水起到净化的作用；另一方面，生成的微藻可以生物质能源、饲料蛋白源等形式被利用。利用微藻净化猪场沼液，实现了沼液净化和资源循环利用技术的耦合，缓解当前社会面临的环境污染、淡水资源匮乏、能源紧缺等多重压力。本文内容包括三部分：一、对绿球藻(Chlorococcumsp.)进行高氨氮驯化及驯化效果评估，探

5、讨不同氨氮下的绿球藻转录组差异；二、三角帆蚌对绿球藻滤食效率的研究；三、基于绿球藻、大型溞的猪场沼液净化及资源化利用的工艺设计及效果。通过逐级提高氨氮浓度(200、250、300mg/L)驯化绿球藻，生长实验分别设置5个不同氨氮添加量梯度，未驯化(50、100、150、200、250mg/L)、已驯化(100、150、200、250、300mg/L)，分别培养7d，检测微藻藻细胞浓度、氨态氮、叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素的变化情况。结果表明：未经驯化的绿球藻在50mg/L氨氮添加量下有最大的相对生长率，K为0.

6、41，经驯化的绿球藻在150mg/L有最大的相对生长率0.36；并且驯化前绿球藻在氨氮浓度为50mg/L时，绿球藻对氨氮的去除率最大，为95.34%，驯化后绿球藻在氨氮浓度为100mg/L时，绿球藻对氨氮的去除率最大，为96.66%，高于未经驯化组100mg/L的去除率，且随着氨氮浓度的上升均出现去除率的下降；驯化前后随氨氮浓度上升，绿球藻内光合色素含量呈现下降的趋势。将高氨氮水平(HAN-group，300mg/L)与低氨氮水平(LAN-group，100mg/L)送样进行转录组测序，得到的转录本与Nr、GO、

7、KEGG数据库比对进行了基因功能注释，初步分析绿球藻在不同氨氮水平下的转录组情况。实验结果表明，在HAN-group与LAN-group在氮代谢途径中共存在429个Unigene，其中存在差异表达基因均为参与代谢通路的酶相关编码基因，其中上调的基因对应的酶包括铁氧还蛋白亚硝酸盐还原酶和谷氨酸脱氢酶(NADP+)，而下调的基因对应编码的酶有谷I上海海洋大学硕士学位论文氨酸合酶(铁氧还蛋白相关)；植物信号转导途径中共注释了1273个Unigene，存在表达差异的共有13个基因，其中上调基因对应编码的蛋白涉及到丝氨酸/

8、苏氨酸蛋白激酶SRK2；通路中下调基因主要包括发病机制相关蛋白1、油菜素内酯非敏感性1相关受体激酶1、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶CTR；谷胱甘肽代谢通路中，共注释了651个Unigene，存在表达差异的共有5个基因，HAN-group的鸟氨酸脱羧酶mRNA表达水平下调，l-抗坏血酸过氧化物酶的mRNA水平显著上调。在设计的滤食率测定的装置中，分别加入暂养2天后的三角帆蚌，随机