转多基因水稻耐盐株系鉴定与评价

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1、转多基因水稻耐盐株系鉴定与评价IdentificationandAnalysisofSaltToleranceofMultipleTransgenicHybridPaddyRice课题来源：国家973项目“作物应答高盐、低温胁迫的分子调控机理”(项目编号：2012CBll4204)指导教师：迕送数援申请学位门类级别：理堂亟±论文完成日期：2014年5月名方学业究在专研所独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已

2、经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得宁夏大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：鞠继扎时间：劫l‘f年乡月刁日关于论文使用授权的说明本人完全了解宁夏大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意宁夏大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签

3、名：鞠继觊导师签名：刚-f．--]：舢叶年‘月习日帆厶卟旷夕日摘要土壤盐渍化是严重的非生物胁迫因素之一，很大程度的限制作物生长。我国盐渍土约3亿亩，占全国耕地面积的l／4，随着社会工业发展、自然气候变化和水资源短缺，土地的盐渍化日益加剧，严重制约着农业生产的可持续发展。水稻是我国重要的粮食作物，。耳我国粮食总产量的40％。水稻的生长受多种胁迫因素的影响，其中土壤盐渍化更是制约水稻生产产量。长期以来，国内外厂。泛开展了对盐渍土的改良和利用的研究，人们运用基因手段，从植物中分离克隆了可耐盐的相关重要基因，培植转基因耐盐

4、作物。相关耐盐基因的研究不但可以探索植物耐盐机制，还可以开发利用生植物耐盐基因资源，为培育耐盐农作物品种奠定基础。通过利用基因手段，提高水稻的耐盐能力，具有深远的应用前景。本研究前期以优育29号水稻为试验材料，将水稻愈伤组织作为外植体建立了愈伤组织受体系统的高频再生体系，优化了农杆菌介导的水稻遗传转化体系，利用农杆菌介导的转化法将载体KETG(ICEl一LOS5一CBF3一ABAR-NCED3)多基因转入水稻，获得了转多基因优育29号植株。本研究以转基因植株的T3代种子为试验材料，对获得的转基因植株进行分子检测和耐

5、盐性鉴定，主要研究结果如下：1．首次以优育29号T3代种子为试验材料，获得12K10、12K12、12K26、12K38四个转基因株系的基因组DNA，用ICEl、LOS5、CBF3、ABAR、NCED3基因的特异性引物进行PCR扩增，选取的植株基因组中均扩增出大小一致的目的条带，表明目的基因已经整合到水稻基因组中。2．125mmol／LNaCl胁迫处理24h后，以已提取的12K10、12K12、12K26、12K38四个株系的cDNA为模板，以actin为内参，用ICEl、LOS5、CBF3、ABAR、NCED3基

6、因的特异性引物进行RT．PCR扩增，扩增产物刚1．O％的琼脂糖凝胶进行电泳检测，选取的植株基因组中均扩增出大小一致的目的条带，表明目的基因均已在转基因植株中得到表达。3．在125mmol／L的NaCl胁迫下7d之后，四个转基因株系12K10、12K12、12K26、12K38的株高、地上部利根鲜重干重、叶绿素含量、叶绿素荧光参数、电导率和丙二醛含量等生理生化指标都优于对照植株CK，均呈显著差异水平，说明转多基因载体提高了转基因株系的耐盐能力。关键词：盐胁迫水稻株系耐盐鉴定耐盐评价AbstractSoilsalini

7、zationisaseriousnon-biologicalthreattoplant．Itcanrestrainthegrowthofplantssignificantly．InChina，thesalinizedlandisabout300millionmu，accountingforonefourthoftotalarableland．Withthedevelopmentinindustry,climatechangeandshortageofwaterresource，salinizationoflandi

8、sincreasinglydeteriorating，whichhasenormouslyconstrainedsustainabledevelopmentofagriculture．PaddyriceisanimportantcropinChina，whichoccupies40％oftotalgrainproduction．However,thegrow