长根菇优良菌株的选育

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1、分类号密级UDC单位代码硕士学位论文长根菇优良菌株的选育BreedingofexcellentstrainsofOudemansiellaradicata研究生姓名葛志豪指导教师郭立忠教授学科专业微生物学研究方向食用菌遗传育种中国.青岛二0一八年六月BreedingofexcellentstrainsofOudemansiellaradicataThesissubmittedtoInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomyGeZhihao（DepartmentofLifeScience）Supervisor:

2、GuoLizhongQingdao.ChinaJune,2018独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、

3、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日青岛农业大学硕士学位论文摘要长根菇优良菌株的选育摘要长根菇（Oudemansiellaradicata）是一种食药均佳的食用菌，也是当前国内食用菌市场中兴起的“新秀”。长根菇属于中高温出菇型食用菌，可在夏季出菇，能够调节夏季鲜菇市场的短缺，并且其凭借简单的栽培技术和可观的市场价格，受到越来越多的食用菌生产者的青睐。当前长根菇市场中主要为人工驯化获得的产量稳定、种性较好的优良品种，但种类相对单一，总体生物转化率

4、较低，而且易被杂菌污染，这也是当前长根菇生产上存在的主要问题。本试验从长根菇育种工作入手，以国内长根菇主栽品种为材料，采用双单杂交的手段进行工作，以菌丝体生长速度、菌丝体发酵液中小奥德蘑酮含量、菌株抗病性和出菇产量及子实体性状为筛选条件，以期获得产小奥德蘑酮高和种性表现优良的新品种。这对改善当前长根菇市场菌种的使用和更深入地开展长根菇相关研究工作具有较为重要的应用价值和学术意义。本试验主要结论如下：1.本试验以当前长根菇市场中主栽品种为材料，分离纯化获得菌种，并对各菌种间的生物学特性、菌丝体发酵液中小奥德蘑酮含量和遗传特性进行分析，最终确定进行双单杂交的两亲本为OuC和OuE。2.

5、采用钟罩法收集担孢子，稀释涂布平板法分离单孢，并将担孢子于WA培养基中进行长根菇菌丝体的萌发以获得最佳的试验效果。利用显微观察和分子鉴定两种方法对获得的单核体进行分析，最终得到14株长势优良、鉴定完毕的长根菇孢子单核体菌株，并将其依次编号为OuE01-14。3.长根菇单核体菌丝生长速度为6mm/d左右，在单核体生长第3-4d接种亲本双核体进行双单杂交，并于杂交后第5d开始取样镜检。我们发现在两菌种生长交界处远端，有较大几率获得杂合子菌株。因杂合子菌株与两亲本间存在明显的拮抗现象，故杂合子菌株必然是区别于两亲本的杂交后代。采用SNP分子标记的方法，对杂合子菌株单核苷酸多态性进行分析，

6、在DNA图谱上，杂合子菌株在基因JE54内有多处显示套峰的杂合位点，并出现了碱基纯合位点改变为碱基杂合位点及碱基杂合位点改变为碱基纯合位点两种基因变异现象。综合显微观察、平板拮抗和菌株单核苷酸多态性分析结果，确定获得14株杂交菌株，并依次编号为OuCE01-14。4.杂交菌株OuCE02、OuCE08和OuCE12菌丝体平均生长速度明显高于两亲本，菌株OuCE05和OuCE08菌丝体发酵液中小奥德蘑酮含量较亲本OuC分别1青岛农业大学硕士学位论文摘要提高了58.8%和12.4%。菌株OuCE01和OuCE08对木霉菌株具有较好的抗性。综上试验结果，本试验最终筛选到OuCE05和Ou

7、CE08两株优良菌株。关键词：长根菇；双单杂交；小奥德蘑酮；抗病筛选；遗传育种2青岛农业大学硕士学位论文AbstractbreedingofexcellentstrainsofOudemansiellaradicataAbstractOudemansiellaradicataisakindofediblemushroomwithconsiderablemedicinalandcommercialvalue.Inresentyears,themarketshareofO