乌司他丁对脓毒症大鼠et-1水平影响及其肾脏保护作用

《乌司他丁对脓毒症大鼠et-1水平影响及其肾脏保护作用》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。研究生签名汗系亟f≯导师签名：孝乏、坦学院领导签名：工∞争年弓月二扩日研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包

2、含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生签名：研丞{工导师签名：体星t翟勋护罗年；月础日中文摘要乌司他丁对脓毒症大鼠ET-I水平的影响及其肾脏保护作用摘要目的：脓毒症(sepsis)是当前ICU所面临的棘手难题，死亡率高达18．29％，特别是由其诱发的脓毒症性休克(septicshock)及多器官功能障碍综合症(Multipleorgandysfunctionsyndrome，MODS)，是危重症的主要死亡原因之一。其中，19．5l％的脓毒症患者合并有急性肾功能衰竭(Acuterenalfai

3、lure，ARE)，死亡率高达70％。内皮素．1(Endothelin．1，ET-1)是至今发现最强的缩血管物质，在病理情况下，ET-1达高浓度时，则通过内皮素受体引起明显而持久的血管收缩效应，将影响组织器官血液灌注，最终导致多器官功能障碍或衰竭。乌司他丁(ulinastatin)是在人尿液中发现的尿胰蛋白酶抑$1J齐VJ(ulinarytrypsininhibitor,UTI)，新近研究表明，乌司他丁能够阻断全身炎症反应综合症(systemicinflammatoryresponsesyndrome，SIRS)／MODS的进展，显示出较强的肾脏功

4、能保护作用。本研究观察相同时间、应用相同剂量乌司他丁(10万U／Kg)对严重感染大鼠血浆中ET-1浓度及肾脏组织中ET-1mRNA水平的影响，并结合肾脏形态学及超微结构的变化，探讨乌司他丁对肾脏的保护作用及其作用机制。方法：本研究应用盲肠结扎穿孔法(cecalligationandpuncture，CLP)复制严重感染动物模型，颈总动脉置管观察血压及心率。取SpragueDawley(SD)大鼠96只，随机分为3组：(1)假手术组(n=32)，只做颈总动脉置管和开关腹手术，中文摘要不做CLP；(2)盐水组(n=32)，CLP术后腹腔注射生理盐水10

5、ml／Kg)；(3)乌司他丁组(n=32)，CLP术后腹腔注射乌司他丁(10万U／Kg)。每组又按时间点分为术前(n_8)、3h(n=8)、6h(n=8)、12h(n=8)四个亚组。每个亚组的动物按各亚组分组时间点由右颈总动脉置管处缓慢采血lml，离心后留取上清液，于．80℃冻存，全部实验结束后采用液相平衡放射免疫分析法(Radioimmunoassay,RIA)澳,O定血浆中ET-1含量。各亚组留取肾组织lOOmg，液氮保存，逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainraction，RT．PCR)

6、半定量检测ET-lmRNA在肾脏的表达水平。3h、6h、12h亚组留取肾组织，采用HE染色法观察肾脏形态学改变。3h亚组留取肾组织，采用透射电镜观察肾脏的超微结构。结果采用SPSSll．5统计分析软件进行统计学分析，数据以均数±标准差(；±s)表示，各组均数的比较行单因素方差分析(ANOVA)，P<0．05为差异有统计学意义。结果：1动物一般情况：假手术组大鼠麻醉清醒后活动基本如常；盐水组大鼠术后均有严重的脓毒症表现：活动明显减少、嗜睡、呼吸急促及竖毛等，动物处死后剖腹可见腹腔积有血性渗出液，盲肠肿胀变黑、粘连，空肠肠管胀气等表现；乌司他丁组大鼠上

7、述脓毒症表现较盐水组轻。2肾组织形态学变化：假手术组肾小球、肾小管结构基本正常；盐水组肾小球皱缩明显，肾小管上皮细胞变性、坏死脱落，肾小管囊腔扩张，管型形成，。肾间质大量炎性细胞浸润：乌司他丁组肾小球、肾小管变化较盐水组减轻。3肾组织超微结构变化：假手术组肾小球滤过膜完整，基底中文摘要膜厚度均匀，上皮细胞足突排列有序，内皮细胞形态正常，可见窗孔；近曲小管上皮细胞刷状缘绒毛排列整齐，染色质分布均匀，线粒体结构正常；盐水组肾小球基底膜部分增厚呈驼峰状，部分足突细胞融合，部分血管内皮细胞增生变厚；近曲小管游离面微绒毛数量明显减少，稀疏，排列不规则，线粒体

8、部分或大部分嵴、少部分膜融合或消失；乌司他丁组肾小球及近曲小管超微结构改变均较盐水组轻。4血浆ET-1浓度变化：假手术组3