马铃薯液泡转化酶活性调控分子机制研究

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1、分类号密级：华中农业大学博士学位论文马铃薯液泡转化酶活性调控分子机制研究RegulationofVacuolarAcidInvertaseActivityinPotato博士研究生：林原学号：08305010033指导教师：谢从华教授指导小组：谢从华教授柳俊教授田振东教授宋波涛副教授专业：蔬菜学研究方向：植物分子生物学获得学位名称：农学博士获得学位时间：2013年12月园艺植物生物学教育部重点实验室华中农业大学园艺林学学院二。一三年十二月华中农业大学学位论文独创性声明及使用授权书学位论文磊如需保密，鳃密时间年胄日楚否保密独创性声明

2、本人声鞠所壁交的论文是我个人在罨师指导下进行的研究工中#及取褥的研究成果。尽我所知。除了文中特潮加以标注和致谶的地方终，论文审幂包含其缝入已经发袭或撰笃过的研究成果，也不包禽为获得华中农业大学或其他教育枫构的学位或证书丙使用过的材料，指导教师对此进杼了审定。与我一同工作的鼹惑对本研究所缴的任何贡献均已在论文中做了明确的说明，并表示了谢意。研究篷签名：林压、聪阿：却，多年／2月／0学位论文使用授权书本人完全了解华中农业大学荧予保存、使用学位论文盼规定，攀学生必须按照学校要求提交学位论文的印刷本和电子版本；学校有权保存提交论文的印刷版

3、和电子舨，并提供目袋检索和阅览服务。可以采用影印、缩印或扫接等复翩手段德存、汇缡学袋论文。本人嗣意华中农业大学可以用不弱方式在不同媒体上发袭、传播学位论文的全都或部分波容．并授权中匿科学技术信息研究所J葶n北京万方数据股份有限公司将本入学位论文牧泶戮《中嚣学位论文垒文数据库’。并进行信息服务(包括但不限予汇编、复制、发行、信息网络传播等)，阉时本人保警在其他媒体发袭论文的权力。注：保密学位论文(鼙涉及技术秘密、商业秘密或申请专利等潜在需要提交保密的论文)在解密赢适用予本授权书．⋯黼躲袜盈＼⋯名：删签名日期；湖多年，2嚣膨疆签名西期

4、：印／多冬肛月，矿罚—塑薹壅塑壁些堕亟堡塑笙坌三垫型婴壅一目录摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·1Abstract．．．．⋯．．．⋯．．．⋯．．．⋯．．⋯⋯．．．⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯．⋯⋯⋯．．．⋯⋯．．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．．⋯⋯⋯⋯⋯．．‘1‘1‘1缩略词表⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯。V第一章前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯l1．1课题的提出⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯11．2

5、马铃薯块茎低温糖化机制⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯21．3SNFl／AMPK／SnRKI蛋白激酶超家族研究进展⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3．1SNFl／AMPK／SnRKl的分类和特点⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3．2sNFl／JA^佃刚SIlIⅨl的结构⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯81．3．3SNFl，黼K／SnRKl的调节方式⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．131．3．4SNFl脚列S栅(1的下游底物⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，．171．3．5植物SnRKl的研究进展⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯181．4本研究的目的和内容⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．21第二章材料与方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．222．1植物材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，．222．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一222．2．1mRNA提取和纯化⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．222．2．2酵母双杂交(Y2H)文库的构建⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．222，2．3饵蛋白的生物信息学分析以及

7、修饰⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯，232．2．4酵母双杂交饵菌株的构建和检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．242．2．5酵母双杂交文库筛选⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．252，2．6双分子荧光杂交(BiFC)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．272．2．7融合蛋白的原核表达纯化和体外实验⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．292．2．8转基因植株的获得⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．312．2．9转基因植株生理生化指标测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．322。2．10实时定量qRT-PCR⋯

8、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯～33————————————————兰主!燮兰!!!!旦堕主堡壅生堂垡鲨壅2．2-11数据分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．33第三章结果与分析⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯