h1n1甲型流感—猪瘟病毒双价活载体疫苗研制

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1、单位代码10445学号2012020973分类号Q291研究生类别全日制硕士硕士学位论文论文题目:H1N1甲型流感-猪瘟病毒双价活载体疫苗研制学科专业名称：细胞生物学申请人姓名：徐东帅指导教师：何成强教授论文提交时间：2015年4月8日1山东师范大学硕士学位论文目录摘要................................................................IAbstract...........................................

2、...............III第一部分综述.......................................................11猪瘟（CSF）及猪瘟病毒的概述（CSFV）...........................11.1猪瘟（CSF）..............................................11.2猪瘟病毒（CSFV）.........................................12猪瘟疫苗的发展.

3、...............................................53流感的现状....................................................64研究目的......................................................7第二部分双价活载体疫苗检测方法的建立...............................81材料...............................

4、............................81.1疫苗及细胞系.............................................81.2主要试剂.................................................81.3主要仪器设备.............................................92方法....................................................

5、......102.1检测引物的设计和合成....................................102.2引物灵敏度的鉴定........................................102.3PK-15细胞的培养和接毒..................................132.4活疫苗的检测............................................142.5活疫苗的稳定性检测....................

6、..................163结果.........................................................173.1第一组引物灵敏度鉴定....................................173.2第二组引物灵敏度鉴定....................................183.31-5代细胞接毒的检测....................................193.4活疫苗在细胞中的稳定传代

7、................................21第三部分H1N1甲型流感-猪瘟病毒双价活载体疫苗的反向遗传学改造......231材料..........................................................251.1载体,菌种和细胞系.......................................251.2主要试剂................................................251.3溶

8、液配制................................................261.4主要仪器设备............................................272方法..........................................................292.1HA1-2A片段的连接.......................................292.2T7-5’UTR基因片段的截