meja诱导白木香不定根产生倍半萜类物质的研究

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1、－－．１０５７２分类号学校代号．＾ＵＤＣ６１０密级学号２０１２１１０６４５２■Ｉ—，乂．，ｋ■．．：／：’？’－？’－；＜抑虔為夫＃旬ｉ）户【中ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ硕±学位论文＇．．—一．ｉ．’’Ｖ；’Ｉ■．■—ＭｅＪＡ诱导白木香不定根Ｖ；产生倍半祕类物质的研究．？－－．’学位申请人蒋研风羊１，指导教师姓名杨锦芬专业名称中

2、药学申请学位类型科学学位论文提交日期２０１５年６月＂＂■■■■■？＝；：．．．－．．．＇．．广州中医药大学学位论女原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经特别加Ｗ注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研巧做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名日期：於唉年６月午曰关于学位论文使用授权的声明

3、本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应遵守此规定）絶义巧證陰氣碱＜４论义导日觀年ｔ月斗园摘要白木香化ｏｕｒ．）Ｇｉｌ）ｇ为瑞香科沉香属植物，其含树脂的木材入药一，，药材名为沉香是我国生产中药沉香的唯植物资源。沉香的药用历史悠一久，是中医临床常用药之，目

4、前妒沉香组方配伍的中成药尚有化０多种。除作为中、、药沉香作药用外，也是我国日本印度及其他东南亚国家的传统名贵天然香料。，只有通过自然因素或人为因素的作用健康的白木香植物并不结香，沉香才会在白木香植物中逐渐形成。沉香的自然结香几率十分低，形成周期也较长，因而更显得其稀有珍贵一，无法满足市场需求。因此，在保护好这珍贵的野生植物资源的同时，一各种人工促香方法和沉香形成机制的探索将值得进步的研巧。１目的沉香的主要化学成分是倍半萌类化合物、苯立基色丽类衍生物和芳香族化合物，一目前我国学者己经对白木香树脂部位、叶、种

5、子、花和果实等方面有些相关研巧，对根部研究则鲜有，本课题利用组织培养技术获得白木香不定根，Ｗ此为材辑进行荣莉酸甲醋（Ｍｅｔｈｙｌ化ｓｍｏｎａｔｅ，ＭｅＪＡ）诱导倍半拖类物质及相关基因表达变化的研究。本研充工作旨在从倍半巧合成代谢途径和ＪＡ信号调控次生代谢产物合成两方面进行，为白木香结香机理的研巧提供参考。２方法２．１无菌苗诱导不定根根白木香组织培养的无茜苗为材料，主要研巧外源激素、培养基组成、诱导时间对不定根诱导的影响，筛选最优的诱导条件。２．２ＭｅｖＪＡ处理无菌苗根的化学成分检测白木香组培不定

6、根为材料，用ＭｅＪＡ进行处理，通过ＧＣ／ＭＳ检测处理前后化学成分的变化，并对差异成分进行定性分析。２．３ＭｅＪＡ处理无菌苗根的转录组分析白木香组培不定根为材料－Ｓ，用ＭｅＪＡ进行处理，利用ＲＮＡ巧技术对处理前后的不定根进行转录组测序分析，分析两组基因表达量的变化，筛选出与倍半巧类物质合成和ＪＡ信号转录因子相关的差异表达基因，并结合化学成分检测结果分析白木香倍半萌类物质代谢合成。３结果３．１白木香无菌苗诱导不定根培养研究通过考察外源激素、培养基无机盐浓度、诱导时间等因素水平对不定根诱导的影响：ＮＭ

7、ｌ．ＯｍＬ的全１２ＭＳ培，获得最优诱导条件为将白木香无茵苗在添加ｇ／／养基上预培养７ｄ后，转移至无激素的全１／２ＭＳ培养基诱导生根，可达到最高生根率平均如％Ｗ上，平均生根数为１２．８条。Ｉ３．２ＭｅＪＡ处理白木香不定根的化学成分研究－ＧＣ／Ｍ－Ｓ和排ＭＥＧＣ／ＭＳ１００ＵＭＭｅＡ处理７化的白木香不定经胎，经过检测Ｊ根与空白对照狙相比－－－，形成了倍半巧类物质目雪松稀（ｅｃｅ化ｅｎｅ）、０金合欢婦（目－ｆａｒｎｅ－－ａ－ａ－５－８ｓｅｎｅ）、目揽香帰（目ｅｌｅｍｅｎｅ）、愈创木婦（ｇｕａｉｅｎｅ

8、）、愈创木帰（－ｕａｅｎｅａ－ａ－ｉ、ｈｕｍｕｌｅｎｅ。ｇ）律草婦（）３．３ＭｅＪＡ处理白木香不定根的转录组学硏究对ＭｅＪＡ处理前后两个阶段的白木香不定根转录组数据进行分析比较，发现处理组