枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻抑制效果的研究

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1、学校代码：10264研究生学号：M120150371上海海洋大学硕士学位论文枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻抑制题目：效果的研究InhibitingEffectsofBacillussubtilis英文题目：onMicrocystisaeruginosa专业：水产养殖研究方向：水产动物健康养殖姓名：张睿指导教师：王广军副研究员二O一五年六月四日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学学位论文原创性声明本人郑重声明：我恪守学术道德，崇尚严谨学风。所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经明确注明和引用的内容外，本论文不包含任何

2、其他个人或集体已经发表或撰写过的作品及成果的内容。论文为本人亲自撰写，我对所写的内容负责，并完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：日期：年月日上海海洋大学学位论文版权使用授权书学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅或借阅。本人授权上海海洋大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密□，在年解密后适用本版权书。本学位论文属于不保密□学位论文作者签名：指导教师签名：日期：年

3、月日日期：年月日上海海洋大学硕士学位论文上海海洋大学硕士学位论文答辩委员会成员名单答辩地点：珠江所科技楼1楼会议室：答辩日期：2015年6月4日上午9：00姓名工作单位职称备注邹记兴华南农业大学教授主席舒琥广州大学教授委员广东省水产技术推于培松研究员委员广总站郭志勋南海水产研究所研究员委员余德光珠江水产研究所研究员委员上海海洋大学硕士学位论文项目来源“十二五”农村领域国家科技计划课题“池塘优势生物群落调控管理技术研究”（2012BAD25B01）广东省海洋渔业科技推广专项“鳢高产养殖池塘微生物调控与修复技术研究与示范”（A201201E050公益性行

4、业（农业）科研专项“池塘复合净化技术研究与示范”（201203083）广东省科技计划项目“水产养殖优化仿真平台的研制与应用”（2012A020602018）上海海洋大学硕士学位论文枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻抑制效果的研究摘要富营养化引起的蓝藻水华等环境问题严重影响着水域生态系统，甚至威胁人类的健康生活，寻求有效手段控制蓝藻暴发尤为关键。蓝藻暴发的根本原因在于水体内环境失衡，因此使用生物手段解决蓝藻问题是从生态平衡角度出发的根本、有效的方法。近年来，溶藻细菌的报道不断增多，芽孢杆菌作为研究热点在解决蓝藻爆发引起的环境问题中受到越来越多的关注。枯草芽孢杆菌

5、（Bacillussubtilis）是广泛存在于自然界的一种非致命性细菌，是水产养殖常用的益生菌，有关其在控藻领域的研究尚未见报道。因此，本论文以枯草芽孢杆菌为研究对象，研究其对蓝藻水华主要优势种铜绿微囊藻（Microcystisaeruginosa）的抑制效果，为使用枯草芽孢杆菌防控蓝藻水华提供理论基础和应用指导。主要研究结果如下：1.铜绿微囊藻的无菌化研究由于实验室铜绿微囊藻常伴有附生细菌生存，影响了探讨溶藻细菌与铜绿微囊藻的相互作用关系。因此，对铜绿微囊藻的无菌化处理显得尤为关键。本论文首先研究了使用抗生素法处理铜绿微囊藻的可行性，结果显示使用

6、5mg/L的新霉7素和硫酸庆大霉素共同处理浓度10cells/mL的藻细胞24h，能将藻附生细菌完全去除，并获得成活的铜绿微囊藻无菌株。2.枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻生长的影响为探讨枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻的抑制效果，该实验研究了枯草芽孢杆菌抑制铜绿微囊藻生长的作用方式以及枯草芽孢杆菌不同生长时期(延迟期、对数期、稳定期和衰亡期)无菌滤液和滤液不同添加量对铜绿微囊藻生长的影响。结果表明：枯草芽孢杆菌对数期、稳定期和衰亡期滤液抑藻效果明显好于延迟期，作用第8d，去除率分别达到81.19%、91.41%、91.82%；4个处理组铜绿微囊藻的叶绿素a含量均显

7、著低于对照组(P<0.01)。在一定范围内，铜绿微囊藻受到的抑制效果与滤液的添加量成正比。枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻的抑制效果是通过分泌胞外物质实现的，且分泌物具有很强的热稳定性。3.枯草芽孢杆菌对铜绿微囊藻生理特性的影响I上海海洋大学硕士学位论文为探讨枯草芽孢杆菌抑制铜绿微囊藻的作用机理，该实验研究了无菌滤液影响下铜绿微囊藻丙二醛(MDA)含量、可溶性蛋白含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性和光合色素含量的变化。结果表明：添加枯草芽孢杆菌稳定期滤液后，铜绿微囊藻MDA含量显著升高(P<0.01)，说明藻细胞发生严重的膜脂过氧化；可溶性蛋白含量先升高，说

8、明藻细胞能合成酶类抵御外界伤害，而后降低是因为藻细胞受伤害加深，蛋白质合成受阻；SOD活性先升高后降低，是由