检测prrsv抗体的两种间接elisa方法的建立和应用

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1、分类号：S855.3学校代码：10712UDC：578研究生学号：2013050700密级：公开gS灶衣林t枚大学2015届全日制硕士专业学位研究生学位论文检测PRRSV抗体的两种间接ELISA方法的建立和应用类型兽医硕士领域、方向预防兽医学研究生牛巧娜指导教师周恩民教授合作指导教师赵钦讲师完成时间2015年4月中国陕西杨凌研究生学位论文的独创性声明本人声明：所呈交的全日制硕士专业学位论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行

2、规定〉〉，如果违反此规定，一切后果与法律责任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同事对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：t时间：>>丨<年(月I曰导师指导研究生学位论文的承诺本人承诺：我的全日制硕士专业学位研究生.听呈交的硕士学位论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，鴒丁祆现冈职务工作的结果，并严格按照学

3、校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我愿接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。时间：年/月i曰关于研究生学位论文使用授权的说明本学位论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调

4、离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人)未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、？文编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）Classificationcode:

5、S855.3Universitycode:10712UDC:578Postgraduatenumber:2013050700Confidentialitylevel:PublicDissertationforMaster'sDegreeNorthwestA&FUniversityin2015DEVELOPMENTANDAPPLICATIONOFTWOINDIRECTELISAsFORDETECTIONOFANTIBODIESAGAINSTPORCINEREPRODUCTIVEANDRESPIRATORYSYNDROMEVIRUS

6、Major:MasterofveterinarianResearchfield:PreventiveVeterinaryMedicineNameofPostgraduate:QiaonaNiuAdviser:Prof.EMZhouDateofsubmitted:May2015YanglingShaanxiChina检测PRRSV抗体的两种间接ELISA方法的建立和应用摘要猪繁殖与呼吸综合征(Porcinereproductiveandrespiratorysyndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染引

7、起的一种以怀孕母猪发生流产、早产和死胎等严重的繁殖障碍和仔猪与育肥猪的呼吸道症状为特征的传染病，给全球养猪业带来了巨大的经济损失。因此，建立有效的诊断PRRSV方法是非常重要的。PRRSV核衣壳蛋白N，是病毒主要的结构蛋白，并且具有很强的免疫原性，是该病毒血清学诊断方法中应用最多的靶抗原。PRRSV的非结构蛋白Nsp9蛋白，即RNA依赖RNA聚合酶(RdRp)，其仅在病毒的复制过程中产生，高度保守。基于此，本研究就利用原核表达系统诱导表达PRRSVN和Nsp9蛋白为包被抗原，建立了检测PRRSV抗体的两种间接ELISA方法（N-

8、iELISA和Nsp9-iELISA），用以诊断PRRSV的感染及区分PRRSV灭活疫苗和弱毒疫苗（或者野毒）的感染，在临床上具有一定免疫监控和疫病净化的应用。首先，建立检测PRRSVN和Nsp9抗体的间接ELISA方法，即N-iELISA和Nsp9-iELIS