病原褪色沙雷氏菌主要生物学性状研究

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1、硕dtr学值沦文病原褪色沙雷氏菌主要生物学性状研宄TheBiologicalCharactersResearchofaPathogenicBacteria-5^rra//flmarcescens一级学科：生物学二级学科：微生物学研宄生：吴楠指导教师：房海（教授)河北科技师范学院2015年6月分类号：—^j密级：UDC：J单位代码：10798病原褪色沙雷氏菌主要生物学性状研宄TheBiologicalCharactersResearchofaPathogenicBacteria-Serratiamarcescens研究方向：病原微生物研究生：吴楠指导教师：房海所在院所：动物科技学院2015年6

2、月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研宄工作和取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢之处外，论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得河北科技师范学院或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名:签字日期：年6月W日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解河北科技师范学院有关保留、使用学位论文的规定。特授权河北科技师范学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并釆用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关

3、部门或机构送交论文的复印件和磁盘。(保密的学位论文在解密后适用本授权说明）学位论文作者签名：导师签名：^^签字曰期：年6月j曰签字曰期：年彡月d曰缩略词英文缩写英文全称中文名称16SrRNA16SribosomalRNA16S核糖体RNALBLuria-BertanibrothmediumLB培养基DNADeoxyribonucleicacid脱氧核糖核酸PCRPolymerasechainreaction聚合酶链式反应BLASTBsaiclocalalignmentsearchtool序列相似性分析工具TEMTransmissionelectronmicroscope透射电子显微镜PFGE

4、Pulsed-fieldgelelectrophoresis脉冲场凝胶电泳CLBCelllysissolution细胞裂解液CSBCellSuspensionBuffer细胞悬浮液SDSSodiumDodecylSμLfate十二烷基硫酸钠Unweightedpair-groupmethodwithUPGMA非加权组平均法arithmeticmeansrpmrevolutionsperminute转/分dday天ggram克hhour小时minminute分钟μLMicroliter微升I摘要对从河北某些经济昆虫养殖场发病（死亡）蝗虫（东亚飞蝗）中分离的褪色沙雷氏菌（Serratiamarc

5、escens），进行了比较系统的主要生物学性状的研究，主要包括形态学特征、理化特性、系统发育学、病原学意义、血清学分型、脉冲场凝胶电泳分子分型等方面的内容。研究结果显示，来源于发病（死亡）养殖蝗虫的褪色沙雷氏菌，各菌株具有相同的基本表观生物学指征性状和系统发育特征，但存在产生、不产生红色色素的菌株。通过对健康蝗虫的回归感染实验，按―科赫法则‖进行病原学意义判定，表明分离菌株具有比较强的致病作用，也是构成蝗虫自然发病（死亡）的原发病原菌。选择从不同蝗虫养殖场分离获得的病原褪色沙雷氏菌代表菌株，采用经典的免疫血清学凝集试验方法进行血清学同源性分析，表明在不同菌株间存在同源性差异性，但均存在显著的

6、血清学交叉反应。采用脉冲场凝胶电泳方法对不同菌株进行分子分型研究，结果供试11株褪色沙雷氏菌的基因相似性在64%～100%之间，相互存在不同程度的亲缘关系。本研究表明，来源于养殖蝗虫的褪色沙雷氏菌野生菌株，具有比较典型的褪色沙雷氏菌生物学性状和系统发育特征，但存在不同的抗原特异性，脉冲场凝胶电泳分析存在一定程度的亲缘关系，对养殖蝗虫具有重要的病原学意义。这些，不仅丰富了褪色沙雷氏菌的生物学性状内容，也为对褪色沙雷氏菌的检验与进一步深入研究提供了具有参考价值的科学资料。另一方面是鉴于褪色沙雷氏菌并非人类及养殖动物的重要病原菌，可能会成为对蝗灾进行生物学防治研究的直接或构建基因工程菌的候选菌株。

7、关键词：褪色沙雷氏菌；生物学性状；血清型；脉冲场凝胶电泳型IIABSTRACTSerratiamarcescenswereisolatedfromthecelomofdiedLocustamigratoriamanilensis(L.m.manilensis)byartificialbreedinginHebeiProvince.Themainbiologicalresearchincludingmorpho