丹翘灌注液抗炎镇痛作用及抗炎机理研究

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1、分类号密级UDC单位代码10733甘肃农业大学硕士学位论文丹翘灌注液抗炎镇痛作用及抗炎机理研究Anti-inflammatoryandAntinociceptiveActivitiesandMechanismsofDanqiaoPerfusate魏立琴指导教师姓名严作廷研究员（兰州畜牧与兽药研究所兰州730050）学科专业名称临床兽医学研究方向中药药理学论文答辩日期2015年5月15日学位授予日期2015年6月19日答辩委员会主席余四九教授评阅人郑继方研究员贾宁教授2015年6月Classific

2、ationNo.:Secrecylevel:UDC:Schoolcode:10733GansuAgriculturalUniversityADissertationfortheMaster’sDegreeAnti-inflammatoryandAntinociceptiveActivitiesandMechanismsofDanqiaoPerfusatePostgraduate:WeiLiqinAdvisor:Prof.YanZuotingSpeciality:ClinicalVeterinary

3、ScienceResearchField:TraditionalChineseMedicinePharmacologySubmittedTime:May,2015甘肃农业大学2015届硕士学位论文摘要子宫内膜炎是奶牛的常发病之一，多发于产后，是子宫内膜感染引起的炎症，常导致奶牛不孕。奶牛患该病致使产犊间期延长，受孕率、妊娠率降低，产奶量下降，治疗费用和淘汰率增加，这给奶牛养殖业造成了巨大的经济损失。目前多采用抗生素、激素等治疗奶牛子宫内膜炎，但随着抗菌药物、激素等的长期大剂量应用常造成奶中药物残留

4、，食用后危及人类健康。中药有提高动物机体免疫机能、抵抗疾病的能力，因其毒副作用小、残留少、特异性强成为人们积极探索的方向。丹翘灌注液是根据中兽医学理论和子宫内膜炎的病理特点研制而成的用于防治奶牛子宫内膜炎的中药制剂，但丹翘灌注液对奶牛子宫内膜炎是否具有抗炎作用，其抗炎作用机制如何？本研究从以下3个方面对丹翘灌注液的体内、体外抗炎、镇痛作用及其机制进行了研究，以期为临床试验用药及进一步研发抗炎中药制剂提供理论基础和依据。1、丹翘灌注液的体内抗炎作用研究。采用二甲苯致耳廓肿胀实验、醋酸致毛细血管通透性

5、增加实验、棉球致肉芽肿增生实验评价其体内抗炎作用。结果显示，40g/kg丹翘灌注液对二甲苯致耳廓肿胀有极显著抑制作用、40g/kg、20g/kg丹翘灌注液对醋酸致毛细血管通透性增加、棉球致肉芽肿增生有显著抑制作用，表明40g/kg以上的丹翘灌注液对急、慢性炎症都有一定的抑制作用。2、丹翘灌注液的体内镇痛作用研究。采用醋酸诱导扭体反应和福尔马林致痛实验评价其镇痛作用。结果显示，40g/kg、20g/kg丹翘灌注液对醋酸诱导的扭体反应、福尔马林致痛第Ⅱ相疼痛有显著的抑制作用。表明丹翘灌注液的镇痛活性主

6、要参与外周炎症镇痛。3、丹翘灌注液的体外抗炎作用及抗炎机制研究。利用LPS刺激小鼠单核/巨噬细胞RAW264.7建立体外炎症模型，研究丹翘灌注液对炎症模型细胞的炎性介质和炎性细胞因子（NO、PGE2、TNF-α和IL-6）的影响，以及对NF-κB信号通路的影响。结果显示丹翘灌注液（600μg/mL、300μg/mL、100μg/mL）作用于炎性细胞后能显著抑制LPS诱导的NO的分泌，TNF-α、IL-6、iNOS和COX-2基因的表达及胞核内NF-κBP65蛋白的表达，且具有一定的剂量效应，只有6

7、00μg/mL的丹翘灌注液对PGE2、TNF-α和IL-6的分泌显著抑制。结果表明丹翘灌I甘肃农业大学2015届硕士学位论文注液对LPS诱导的炎症反应具有保护作用，其抗炎作用可能与调节NF-κB信号通路有关，主要是抑制炎性过程中关键酶和炎症因子的基因表达及炎症介质的产生。然而，丹翘灌注液作用炎性细胞后，炎性细胞因子IL-6及炎症限速酶iNOS和COX-2基因的表达与正常对照组仍存在显著差异，说明丹翘灌注液有抗炎作用，但不能完全阻断细胞炎症反应。关键词：丹翘灌注液；炎症模型；抗炎作用；镇痛作用；NF

8、-κBII甘肃农业大学2015届硕士学位论文AbstractEndometritisisoneofthecommondiseasesoccurredinpostpartumdairycows,whichistheinflammationcausedbytheinfectionofendometrium,resultingininfertility.Endometritiscausedhigheconomiclossduetoprolongedintercalvinginterval