奶山羊blg基因调控序列指导的乳腺特异性表达载体的构建和优化

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1、分类号：S826学校代码：10712UDC:591.3研究生学号：2012051357密级:公开^A鈦衣林濟枚大学2015届攻读硕士学位研究生学位（毕业）论文奶山羊BLG基因调控序列指导的乳腺特异性表达载体的构建和优化学科专业临床兽医学研究方向动物胚胎工程研究生张曼指导教师郑月茂完成时间2015年5月中国陕西杨凌研究生学位（毕业）论文的独创性声明本人声明：所呈交的硕士学位（毕业）论文是我个人在导师指导下独立进行的研究工作及取得的研究结果；论文中的研究数据及结果的获得完全符合学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，如果违反此规定，一切后果与法律责

2、任均由本人承担。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究结果，也不包含其他人和自己本人已获得西北农林科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文的致谢中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：it时间：>/t年f月$/曰导师指导研究生学位（毕业）论文的承诺本人承诺：我的硕士研究生所呈交的硕士学位（毕业）论文是在我指导下独立开展研究工作及取得的研究结果，属于我现岗职务工作的结果，并严格按照学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》而获得的研究结果。如

3、果违反学校《关于规范西北农林科技大学研究生学术道德的暂行规定》，我必须接受按学校有关规定的处罚处理并承担相应导师连带责任。关于研究生学位（毕业）论文使用授权的说明本学位（毕业）论文的知识产权归属西北农林科技大学。本人同意西北农林科技大学保存或向国家有关部门或机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；同意西北农林科技大学将本学位（毕业）论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。本人保证，在毕业离开（或者工作调离）西北农林科技大学后，发表或者使用本学位（毕业）论文及其相关的工作成果时，将以西北农林科技大学为

4、第一署名单位，否则，愿意按《中华人民共和国著作权法》等有关规定接受处理并承担法律责任。任何收存和保管本论文各种版本的其他单位和个人（包括研究生本人）未经本论文作者的导师同意，不得有对本论文进行复制、修改、发行、出租、改编等侵犯著作权的行为，否则，按违背《中华人民共和国著作权法》等有关规定处理并追究法律责任。(保密的学位论文在保密期限内，不得以任何方式发表、借阅、复印、缩印或扫描复制手段保存、汇编论文）研究生签名(i时间:4年s■月3i曰时间:T年夕月S/曰导师签名:細戈Classificationcode:S814Universitycode:10712UDC:

5、591.3Postgraduatenumber:2012051357Confidentialitylevel:PublicityThesisforMaster’sDegreeNorthwestA＆FUniversityin2015Constructionandoptimizingofgland-specificexpressionvectorbydairygoatBLGgeneregulatoryelementsMajor:ClinicVeterinaryMedicineResearchfield:AnimalEmbryonicEngineeringNameof

6、Postgraduate:ManZhangAdviser:Yue-maoZhengDateofsubmission:May,2015YanglingShaanxiChina本研究由国家高技术研究发展计划资助项目（863计划）（No.2011AA100303）提供资助ThisworkwassupportedbygrantsfromTheNationalHighTechnologyResearchandDevelopmentProgramofchina(863Program)（NO.2011AA100303）山羊BLG基因调控序列指导的乳腺特异性表达载体的构建和优化

7、摘要乳腺生物反应器是用乳蛋白基因启动子和调控区指导外源基因在动物乳腺中定位表达。乳腺生物反应器的应用价值与外源基因表达水平的高低相关。乳腺生物反应器制备的关键是乳腺特异性表达载体的构建，而启动子的选择是乳腺表达载体构建的核心。为了使外源基因在转基因动物乳腺中能够高效特异地表达，本实验以西农萨能奶山羊β-乳球蛋白基因为研究对象，扩增了山羊的5ˊ侧翼区，内含子1、内含子2和3ˊ端调控区域序列，构建了真核表达载体，初步探讨了该启动子的活性和表达特异性。结果如下：（1）利用高保真PCR方法克隆了奶山羊β-乳球蛋白基因启动子（2.1kb，包括5＇侧翼区和部分第一外显子），

8、3＇端调控成分（最后一个