安阳地区副猪嗜血杆菌的分离鉴定及蜂胶灭活苗的制备

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1、分类号单位代码：密级：公幵号：博士学位论文安阳地区副猪嗜血秆菌的分离鉴定及蜂胶灭活苗的制备研究生：靳国旺指导教师：赵德明合作指导教师：申请学位类另兽医博士专业领域名称：预防兽医研究方向：动物疾病防制所在学院：动物医学院年月独创性声明本人声明所呈交的学位论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中已经注明引用和致谢的内容外，论文中不包含本人和其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名时间年

2、月对日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定。本人同意中国农业大学有权保存及向国家有关部门和机构送交论文的纸质版和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人同意中国农业大学将本学位论文的全部或部分内容授权汇编录入《中国博士学位论文全文数据库》或《中国优秀硕士学位论文全文数据库》进行出版，并享受相关权益。保密的学位论文在解密后￥遵守此协议）学位论文作者签名时间年矢月％摘要副猪嗜血杆菌是巴氏杆菌科的一种短小革兰阴性杆菌，主耍危害仔猪和青年猪，引起病猪发热、关节肿胀、呼吸困难和多发性楽膜炎为特征的传染病。前，副猪嗜血杆菌病在我国乃至全世界广泛流

3、行，给养猪业带来严重的经济损失。由于副猪嗜血杆菌极易产生耐药性，而且血清型众多，每个血清型之间缺乏免疫交叉性，所以至今为止还没有一个很好的控制副猪嗜血杆菌病流行的方法。本研究对安阳地区三个猪场的发病猪只采取不同部位的病料共份进行鉴定，结果为肺脏的鉴定阳性率为、脾脏、血液、胸膜、心包积液、关节液的阳性率均为而胸腔积液的阳性率为。份病料的鉴定的阳性率为。对鉴定阳性的病料进行细菌的分离鉴定、血清学分型以及药敏试验。结果为鉴定之后的细菌分离率为，血清学分型均为型。对分离菌株接种于巧克力培养基、血琼脂平板、、琼脂平板上，菌落特征符合副猪嗜血杆菌的生物学特性，生化试验结果典型。用分

4、离的副猪嗜血杆菌型菌株以头分别对小鼠和断奶仔猪进行攻毒试验，并对分离菌株做遗传稳定性试验，实验结果表明：该菌株对小鼠和断奶仔猪均能引起明显的临床症状和死亡。证明了该菌株毒力强，分别选择第、、、代的菌株，经鉴定第、、、代菌株生物学特性典型、毒力和免疫原性均没有下降，符合作为制备灭活疫苗菌种的要求。本实验对菌种进行培养之后，用的甲醛进行灭活、然后加入蜂胶佐剂，制成蜂胶灭活苗，灭活苗的最终含菌量在以上。疫苗的注射剂量经测定为。对实验室制备的蜂胶灭活苗的物理性状、安全性、有效性、有效期以及与市售疫苗进行比较试验，结果表明，该疫苗符合蜂胶灭活苗的特性，对日龄仔猪在单剂量接种、单剂

5、量重复接种、以及多剂量接种均安免，按照免疫程序对日龄仔猪进行免疫之后的攻毒试验，结果实验组猪只精神良好，没有死亡，显示蜂胶灭活苗有效。副猪嗜血杆菌蜂胶灭活疫苗与市售灭活疫苗分别对头仔猪进行免疫，结果显示日龄头均断奶重蜂胶灭活苗为，高于市售灭活疫苗的和对照组的，仔猪日龄断奶后至日龄的育成率，蜂胶灭活苗为高于市售灭活疫苗的和对照组的头均个体重蜂胶灭活苗为，高子市售灭活疫苗的和对照组的。在个体重上，经数据分析差异显著，实验结果表明：蜂胶灭活苗的效果要优于市售灭活疫苗。通过以上研究，确定了安阳地区副猪嗜血杆菌病流行的优势菌株为血清型型，并且通过分离出来的菌株使用蜂胶作为佐剂制备

6、的灭活疫苗能够很好的对仔猪起到保护作，为安卩丨丨地区预防副猪嗜血杆菌病的流行提供了新的途径。关键词：副猪嗜血杆菌，生物学特性，蜂胶，疫苗AbstractHaemophilusparasuisisasmallGram-negativebacteriumandhasbeenassignedasaspeciesofthefamilyPasteurella.Itoccurssporadicallyamongswineherdsandisusuallyobservedinthreeweektofourmonth-oldpigs.Clinicalsignsmayincludefev

7、er，，，，，，commerciallyavailableinactivatedvaccines:propolisinactivatedvaccineandcommerciallyavailableinactivatedvaccineswereimmunizedfor40pigs.Theresultsshowedthatafterinoculation，，，目录插图及附表清单常用缩略词第一章文献综述副猪嗜血杆菌的研究进展免疫佐剂的研究现状研究的目的及意义第二章副猪嗜血杆菌的分离鉴定实验材料试验方法结果与分析讨论小结第三章副猪嗜血杆菌分离株