放线菌bz45代谢物抑菌活性研究

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1、放线菌BZ45代谢物抑菌活性研究StudyontheAntibacterialActivityoftheMetabolitiesinActinomycetesBZ45作者姓名:赵玉海赵玉海专业名称:农药学指导老师:李启云研究员李启云教授学位类别:农学硕士答辩日期:2015年6月1日中文摘要放线菌BZ45(ActinobacteriaBZ45)代谢物抑菌活性研究在世界主要的玉米产区,玉米大斑病仍是玉米上一种重要的叶枯病害,分布广泛,严重威胁玉米产量。目前对于玉米大斑病的防治主要以选育抗病品种为主,化学防治、栽培管理为辅。由于化学防治防果

2、不稳定,且易造成环境污染,因此,开发新型的玉米大斑病生防制剂对玉米大斑病的防治具有重要意义。本研究通过对放线菌BZ45进行液体发酵,经过对其发酵产物进行萃取分离,得到石油醚层、乙酸乙酯层、正丁醇层、水层四个组分,以三种细菌和八种植物病原菌作为靶标菌株,对这四个组分,采用滤纸片扩散法和抑制菌丝生长速率法进行了抑菌活性筛选。实验结果表明,石油醚层提取物对大肠菌杆菌(Escherichiacoli)有明显的抑菌活性;正丁醇层提取物对玉米大斑病菌(Setosphaeriaturcica)有明显的抑菌活性。对这两部分进行活性跟踪分离,最终通过气

3、质联用分析(GC-MS)对石油醚提取物进行分析,从该组份中分析得到29种化合物;对正丁醇组份分离得到对玉米大斑病有明显抑菌活性的活性组分A。采用滤纸片扩散法和抑制菌丝生长速率法对放线菌BZ45石油醚层提取物和正丁醇层活性组分A进行体外抑菌活性研究,结果表明,石油醚层组分50mg/ml对大肠杆菌的抑菌活性最强,抑菌率为47.72%;正丁醇层活性组分A50mg/ml对玉米大斑病菌的抑菌活性最强,抑菌率达到54.94%。在玉米活体条件下,放线菌BZ45正丁醇层活性组分A,对玉米大斑病菌的抑菌活性进行研究。结果表明,未加正丁醇层活性组分A对玉

4、米大斑病菌孢子2的侵染面积为182.78±17.12amm;加入活性组分A浓度为50mg/ml对玉米大斑病2菌的侵染面积为28.12±3.35dmm,表明放线菌BZ45正丁醇活性组分A对玉米大斑病菌孢子明显的抑菌活性。以大肠杆菌和玉米大斑病菌为指示菌株,对放线菌BZ45石油醚层提取物和正丁醇层活性组分A的抑菌活性稳定性进行研究,结果表明,放线菌BZ45石油醚层提取物,经高温和紫外照射处理后对大肠杆菌的抑菌活性几乎无影响;放线菌BZ45正丁醇层活性组分A,经高温和紫外处理后对玉米大斑病菌的抑菌活性无影响。上述结果表明放线菌BZ45石油醚

5、层提取物和正丁醇层活性组分A分别I对大肠杆菌和玉米大斑病菌的抑菌活性较稳定。关键词:放线菌,化学成分,大肠杆菌,玉米大斑病菌,抑菌活性,稳定性IIAbstractStudyontheAntibacterialActivityoftheMetabolitiesinActinomycetesBZ45MaizeistheworldandChina'smajorfood,fodder,andindustrialcrop.However,theyieldlossismorethan50%onaregularbasisduetothehazard

6、softhenortherncornleafblight(NCLB)causedbySetosphaeriaturcica,whichoccursfrequentlyinmaizegrowingareas.Currently,NCLBismainlycontrolledbyresistantcultivarsagainstS.turcica,whilecultivationmanagementandchemicalcontrolarethecomplement.However,chemicalscontroleffectisnotst

7、able,andeasytopollutetheenvironment,sothedevelopmentofnewbiocontrolagentsisoneofthemostimportantmethodtocontrolNCLB.Inthisstudy,thefermentationproductofActinomycetesBZ45wasscreenedandextractedintothepetroleumetherlayer,theethylacetatelayer,theaqueouslayerandtheN-butanol

8、layer.Applyingthefilterpaperdiffusionmethodandinhibitionofmycelialgrowthratemethodtoanalysistheantibacterialac

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