玻璃体腔移植人脐带间充质干细胞诱导的神经干细胞对糖尿病大鼠视网膜脑源性神经营养因子表达的研究

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1、分类号：R-77学校代码：10062密级：学号：2012602589硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：玻璃体腔移植人脐带间充质干细胞诱导的神经干细胞对糖尿病大鼠视网膜脑源性神经营养因子表达的研究TITLEToobservethechangeoftheexpressionofbrain-derivedneurotrophicfactorindiabeticrat’sretinabyintravitrealinjectionofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcell

2、s-inducedneuralstemcells一级学科：临床医学二级学科：眼科学论文作者：王月欣指导教师：陈松天津医科大学研究生院二〇一五年五月分类号：R-77学校代码：10062密级：学号：2012602589学位类别：科学学位专业学位学科门类：医学硕士学位论文MASTER’SDISSERTATION论文题目：玻璃体腔移植人脐带间充质干细胞诱导的神经干细胞对糖尿病大鼠视网膜脑源性神经营养因子表达的研究TITLEToobservethechangeoftheexpressionofbrain-derivedneurot

3、rophicfactorindiabeticrat’sretinabyintravitrealinjectionofhumanumbilicalcordmesenchymalstemcells-inducedneuralstemcells一级学科：临床医学二级学科：眼科学论文作者：王月欣指导教师：陈松天津医科大学研究生院二〇一五年五月学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是我个人在导师指导下独立进行研究工作取得的研究成果。除了文中特别加以标注引用的内容和致谢的地方外，论文中不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的研究

4、成果，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。学位论文作者签名：日期：年月日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解天津医科大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，并采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编以供查阅和借阅。同意学校向国家有关部门或机构送交论文，并编入有关数据库。保密，在年解密后适用本授权书。本论文属于不保密。（请在相对应的方框内打“√”）学位论文作者签名：日期：年月日导师签名：日期：年月日中文摘要目的观察由人脐

5、带间充质干细胞(humanumbilicalcordmesenchymalstemcells,hUCMSCs)体外诱导的神经干细胞(neuralstemcells，NSCs)经玻璃体腔途径移植到糖尿病大鼠眼内后，视网膜内脑源性神经营养因子(brain-derivedneurotrophicfactor，BDNF)表达的变化和胸腺肽-1(thymosin-1,Thy-1)阳性表达的视网膜神经节细胞(retinalganglioncells，RGCs)的变化情况，探讨璃体腔移植hUCMSCs诱导的NSCs在糖尿病视网膜病变(di

6、abeticretinopathy，DR)的可能神经保护作用，为DR的临床防治提供基础理论依据。方法采用神经分化培养基体外诱导hUCMSCs向NSCs定向转化，倒置显微镜下观察细胞形态变化。免疫荧光染色检测NSCs标志物巢蛋白和神经源性分化因子1(neurogenicdifferentiationfactor1,NeuroD1)表达情况。成年雄性斯普拉格-杜勒(Sprague-Dawley,SD)大鼠52只，采用随机数字表法分为正常对照组(A组)和糖尿病组。链尿佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射制作糖尿病

7、大鼠模型。造模后1个月，将糖尿病组大鼠随机分为DR对照组(B组)，玻璃体腔注射hUCMSCs组(C组)，玻璃体腔注射hUCMSCs诱导的NSCs组(D组)。各组均为13只大鼠。干预后2、4、6、8周，免疫组织化学染色观察视网膜BDNF及Thy-1阳性染色情况，Image-ProPlus6.0图像分析软件分析视网膜阳性染色区的平均累积光密度值(integratedopticdensity,IOD)，并对Thy-1阳性染色的RGCs计数。SPSS20.0统计学软件进行统计学分析，P<0.05为差异具有统计学意义。结果1.hUCM

8、SCs在神经培养基诱导3天时，60-70%细胞开始聚集形成大小不等的细胞簇，随着培养时间的增加，逐渐形成悬浮的细胞团并增大、增多。2.免疫荧光染色示20天时诱导的hUCMSCs高表达NSCs的特异性标志巢蛋白和NeuroD1，阳性细胞表达量分别占87.3%和72.6%。3.糖尿病大鼠成模3