高有效组分川贝母的组织培养与质量研究

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1、分类号农mirn单位代码：10636密级《公开，，学号：20131504006、奴“丨鉀乾七孝硕士学位论文(S)中文论文趣目t与英文论文题目《StudyontissuecultureandqualityofhigheffectivecomponentsofFritillariaCirrhosaD.Pon论文作者:江明殊指导教师:王跃华教授专业名称;细胞生物学研宄方向t鋼胞工程所在学院:生命科学学院论文提交日期：2015年5^119B论文答辩日期：2015年5月27曰四川师范大学学位论文独创性声明本人声明：所呈交学位论义高有效组分川贝母的

2、组织培养4质罱研究,是本人在导师干跃隼m指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成泶。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结粜由本人承担。本人承诺：已提交的学位论文电子版与论文纸本的内容一致。如因不符而引起的学术声誉上的损失由本人自负。学位论文作者：y胡珠签字日期：w淬‘月&日学位论文出版授权书本人完全同意《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》(以下简称“章程”),愿意将木人的硕士学位论文提交中国学术期刊（光盘版）

3、电了•杂志社在《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》中全文发表。《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》nj以以电子、网络及其他数字媒体形式公幵出版，并同意编入CNKI《中国知识资源总库》，在《中国博硕士学位论文评价数据库》中使用和在互联网上传播，同意按“章程”规定享受相关权益。作者签名：>0论文题目：高有效组分川贝母的组织培养与质量研究毕业院校：四川师范大学毕业年份：2015年6月所在学院：所学专业：说明：本授权书巾中国学术期刊（光盘版）电子杂志社保存。联系电话:010-627919516279317662790693传真:010-6279

4、1814通信地址：北京淸华大学邮局84-48信箱采编中心邮编：100084摘要高有效组分川贝母的组织培养与质量研究细胞生物学专业研究生江明殊指导教师王跃华教授摘要川贝母(FritillariaCirrhosaD.Don)为名贵川产道地药材，主要分布在海拔2800～4700m的高山灌丛和草地中，大多位于我国西南部横断山区。川贝母用于治疗咳嗽、祛痰、平喘效果显著，其含有的贝母素甲、贝母素乙、西贝母碱等贝母生物碱。然而，在自然条件下川贝母5年才能收获一次，加之近年来人们大肆采挖，导致野生川贝母资源匮乏，且含有的生物碱含量较低。为解决这一问题，

5、本实验采用组培生物技术，建立具有高有效组分含量的川贝母快速繁殖体系。此外，为了全面提取川贝母的有效成分，通过正交设计对组培川贝母有效成分的提取工艺进行了研究。同时为了更好地控制组培川贝母的质量，本研究严格按照2010版《中国药典》对组培川贝母进行了质量研究。结果如下：1以川贝母鳞片叶为外植体，研究了不同激素对川贝母愈伤组织的形成、分化成鳞茎、抽苗以及生根的影响。结果表明，愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6-BA1.0mg/L+2,4-D0.5mg/L，经45d培养后诱导率为83.33%；分化成鳞茎的最佳培养基为MS+KT2.0mg/L+N

6、AA0.3mg/L，经45d培养后诱导率为82.77%；抽苗的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg/L+IBA0.3mg/L，经45d培养后抽苗率为85.39%；经60d培养后生根最佳培养基为MS+NAA0.3mg/L，生根率为83.20%。2研究了秋水仙素浓度、浸泡时间、二甲基亚砜体积分数、处理温度对川贝母多倍体诱导的影响。结果表明川贝母多倍体诱导条件的最优组合是秋水仙素浓度为900mg/L、浸泡时间为48h、二甲基亚砜体积分数为4%、处理温度为20℃，在此条件下培养30d，其诱导率可达94.3%。对野生川贝母、组培二倍体川贝母、经染

7、色体诱导后的多倍体川贝进行了含量测定，结果显示三者之间总生物碱含量分别为0.237%、0.249%和0.657%，研究表明经组培后的川贝母不论是二倍还是多倍体均比野生川贝母含量高，且多倍体是野生川贝母的2.8倍左右。3采用正交实验考察了乙醇浓度、加醇量、提取时间及提取次数对组培川贝母有效成分提取的影响。结果表明四种因素之间影响效果为乙醇浓度>加醇倍I四川师范大学硕士学位论文数>提取时间>提取次数，当提取工艺为用6倍量85%乙醇，提取2次，每次1.5h时得到的有效成分最多。通过总灰分、酸不溶性灰分、浸出物、生物碱含量、薄层色谱等检测对组培

8、川贝母进行了质量标准研究，结果表明：组培川贝母的总灰分不应超过2%，酸不溶性灰分不应超过1%，浸出物不得少于20%，总生物碱含量应在0.2%～0.3%之间。4对经人为处理后的川贝母之间的质量差异进行了研究，