大鼠血管内皮细胞对大鼠骨髓间充质干细胞成脂诱导的影响研究

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1、中图分类号：Ｒ６８１度＾乂聲ＳＩＣＨＵＡＮＭＥＤＩＣＡＬＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕±学位论文大鼠血管内皮细胞对大鼠骨髓间充质干细胞成脂巧导的影响研究－’；＇院（系）、所曰腔医学協研究生姓名下湛．？＇ｉ学科、专业口醉临巧睽学导师姓名张建设教授二〇—五年四月论文指导小组成员张建设教授李焰博击基金项目；四川省卫生厅课题（编号０９０００６１００８６）目录１大鼠血管内皮细胞在大鼠骨髓巧充质干细胞成脂诱导过程中影响的实验研巧１１．１中文摘要１１．２英文摘要３１．３前言５

2、２．１材料与方法７２．２结果１９２．３讨论２３２．４结论２４３．１材料与方法２５３．２结果％３．３讨论４１３．４结论４２４参考文献４３５英汉缩略词对照表４９６致谢５１７骨髓间充质干细胞的特征与临床应用（综述）５２四川医科大学硕主学化论文大鼠血管内皮细胞在大鼠骨Ｍ间充质干细胞成脂诱导过程中巧桐的实验研究摘要目的：体外分离和培养ＳＤ大鼠骨髓间充质干细胞（ＭｅｓｅｎｃｈｙｍａｌＳｔｅｍＣｅｌｌｓ，ＭＳＣｓ）和ＳＤ大鼠血管内皮细胞（Ｖ

3、犯ｃｕｌａｒＥｎｄｏ化ｅｌｉａｌＣｄｌｓ，ＶＥＣｓ），并对两种细胞进行鉴定；探寻两种细胞在成脂诱导条件下共培养比例，研一究大鼠血管内皮细胞对骨髓间充质干细胞成脂诱导的影响，为下步两种一细胞的Ｈ维共培养体系的建立提供定的数据及理论支持。方法一：本实验分为两个部分，第部分为大鼠骨髓间充质干细胞和大鼠血管内皮细胞原代细胞的培养和鉴定，从６ｗ的ＳＤ大鼠提取骨髓间充质干细胞和血管内皮细胞，并对两种细胞进巧鉴定，进行细胞扩增和冻存，为共培养提供细胞支持；第二部分实验分为Ｈ组，未诱导组为骨髓间充质干细胞不做任何诱导单独培养；单独诱导组为骨髓间充质干细胞单独

4、成脂诱导培养；混合诱导组为血管内皮细胞和骨髓间充质干细胞在共培养环境下成脂诱导培养，实验利用已培养出来的骨髓间充质干细胞和血管内皮细胞确定共培养比例，分别比较单独诱导组和混合诱导组的骨髓间充质干细胞和对照组在成脂诱导时间及油红染色的差异；使用异丙醇提取着色的油红利用酶标仪的５２０ｎｍ波长的光检测其光学浓度（０Ｄ值）。使用ＳＰＳＳ２０．０进行统计学分折，研究血管内皮细胞对骨髓间充质干细胞成脂诱导的影响。结果：１四川医巧大学硕±学化论文１、成功由ＳＤ大鼠体内分离出骨髓间充质干细胞和血管内皮细胞，并对细胞进巧鉴定后，扩增及冻存备用；

5、２、单独诱导组的骨髓间充质干细胞可见细胞内充满脂滴，油红染色呈阳性；混合诱导组的骨髓间充质干细胞和血管内皮细胞在２：１共培养条件＂＂下进行成脂诱导时。单独诱导组的油红０，观察不到脂肪样细胞的变化＂＂吸光值在第７天时比未诱导组高（ｐ＜０．０１），混合诱导组的油红０吸光值在第１４天时化未诱导组降低（ｐ＜０．０５）。结论：大鼠的骨髓间充质干细胞、血管内皮细胞被成功分离；血管内皮细胞抑制骨髓间充质干细胞的成脂分化。关键词：血管内皮细胞；骨髓间充质干细胞；成脂诱导２四川巧巧大学预±堂化论义ＴｈｅＥｆｆｅｃｔｏｆＲａｔＶａｓｃｕｌａｒＥ

6、ｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓｏｎＡｄｉｏｅｎｉｃｐｇＤ＊ＲａｉｆｆｅｉｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆＭｅｓｅｎｃｈｌｌｌｓｔｙｍａＳｔｅｍＣｅＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｃｕｌｔｕｒｅａｎｄｉｄｅｎｔｉｔｈｅｉｓｏｌａｔｅｄＲａｔＭｅｓｅｎｃｈｍａｌＳｔｅｍｊｆｙｙＣｅｌｌｓＭＳＣｓａｎｄＶａｓｃｕｌａｒＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓＶＥＣｓａｎｄｔｏｅｘｌｏｒｅｔｈｅｅｆｆｅｃｔ（）（）ｐｏｆ－ｃｏｃｕｌｔｕｒｅｄＭＦＣｓｏｎａｄｉｏｅｎｉｃ出ｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎｏｆｗｈｉｃｈｓ

7、ｕｐｇＭＳＣｓ，ｐｐｌｙｔｈｅｅｖｉｄｅｎｃｅｆｏｒＤｉｋｉＴｈｒｅｅｉｍｅｎｓｏｎａｌＣｅｌｌＣｕｌｔｕｒｅｏｆｔｈｅｓｅｔｗｏｎｄｓｏｆｃｅｌｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ；Ａｔｔｈｅｆｉｒｓｔａｒｔｏｆ化ｉｓｅｘｅｒｉｍｅｎｔＭＳＣｓａｎｄＶＥＣｓｏｂｔａｉｎｅｄ＾ｐｐｆｒｏｍｔｈｅ６ｗｅｅｋｓｏｌｄｒａｔｓｗｅｒｅｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｂｙｔｈｅｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙａｎｄＯｓｔｅｏｉｎｄｕｃ