真菌溶磷相关基因的克隆与功能分析

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1、竹喪中化化护ｉ：１００１９＇识Ｕ‘２１２４００６：？ｊ：Ｓ１０１ｆ曲少ｔ乂聲睹１；＾位论义真菌溶踞相关基因的克隆与功能分析ａｎｄｕｎｃｏｎａ－Ｃｌｏｎｉｎｆｔｉｌａｎａｌｓｉｓｏｆｈｏｓｈａ化ｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｇｙｐｐｇｒｄａ：ｉｔｅｄｅｎｅｓｆｒｏｍｆｕｎｇｇ＇研巧：１＾啟中化指甘教帅：Ａ１化ｊ个研究＾）｜：Ｉ介ｆ析计教川Ｊ：ｌ陈教授＇Ｉ：中睹学位ＩＪ类巧另ｊ：辟Ｉ；巧等专业名称：化物化学分ｒ化物学＇研文￡乂向：微物分ｆ１；ｌ；物学堪内码巧ｆ学院：化物学院

2、－－斗／（：年Ｉ巧Ｇｒａｄｉｉ江ｔｅＤｉｓｓｅｒｔａｔｉｏｎＣｌｏｎｉｎａｎｄｆｕｎｃｔｉｏｎａｌａｎａｌｙｓｉｓｏｆｇｈｏ－ｓｈａｔｅｓｏｌｕｂｉｌｉｚｉｎｒｅｌａｔｅｄｅｎｅｓｆｒｏｍｆｕｎｉｐｐｇｇｇＧｒａｄｕａｔｅ：ＹｉｎＺｈｏｎｇｗｅｉＭａｏｒ：ＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒａｎｄＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙｊｙＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒ：ＦａｎＢｉｎｇｑｕａｎａｎｄＣｈｅｎＳａｎ化ｎｇＣｏｌｌｅｇｅｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅＣｈｉｎａＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｇＢ巧ｉ

3、ｎＲＲ．Ｃｈｉｎａ１０００９３ｇ，，Ｏｃｔｏｂｅｒ２０１５，独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加Ｗ标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明。与我确的说明并表示了谢意。＂＂研究生签名：时间：ＭＪ年／／月＾日关于论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定：，即学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论

4、文被查阅和借阅，可Ｗ采用殻印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可Ｗ用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。（保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：时间：不巧＾年ｎ月知日＾焉导师签名：时间：年月日＾八？＾＿＾＾翁摘要我国９０％Ｗ上耕地缺憐，磯肥的使用是解决作物增产问题的重要措施。但长期Ｗ来稱肥的过量使用＾及±壤固定化问题造成了严重的资源浪费、环境污染。因此开发利用溶憐生物祀料，研究溶磯微生物的溶憐机理及溶稱相关基因，对充分发挥溶稱微生物在农业中的作用具有重要实践价值和理论意义。本文从我国北方高

5、化肥施用王壌中筛选了高效溶磯真菌７株。并且重点对其中３株菌株Ｐ４ＣＰｅｎｉｄｌｌｈｍｏｘａｌｉｃｕｍ）、（Ａｓｐｅ巧ｉ＂ｕｓａｃｕｌｅａｔｕｓ）功及？巧（ＡｓｐｅｒｇｉＵｕｓｎｉｇｅｒ）胸蒋礙效栗、溶憐条件，接种溶縣菌显著提、分泌有机酸、王壤定植能力、植物促生能力进行研究。数据盈示裔溶液中的有效縣浓度．降低溶液ｐＨ值。菌株Ｐ９３、Ｐ４和Ｐ８５对磯酸巧的溶解效果最为显著。。；最适氮源类型分别为尿素溶解磯矿粉最适碳源分别是果糖、葡萄糖和麦芽糖、俊态氮及硝态氮’２５－３５Ｃ２ｍＬ。Ｐ９溶磯最适温度都是．縣矿粉最适浓度为／ｍ菌株３主要产生的苹果酸巧玄酸ｇ；Ｐ４主要

6、产生的酒石酸和巧樣酸；Ｐ８５则主要产生的苹果酸和巧樣酸。盆栽条件下，施用菌剂对不同稱源处理：±壤中玉米生物量影响显著。溶稱菌剂Ｐ９３、Ｐ４巧Ｐ８５分别在Ｗ憐酸巧、憐酸巧和昆阳磯矿粉为满源条件下的促生效果最好。溶磯真菌在±壤中定殖能力差异显著，顺序为＞Ｐ４Ｐ９３＞Ｐ８５。施加磯矿粉有利于溶憐菌的定殖。茜剂Ｐ９３增加±壤有效磯、有机酸浓度最为湿著。添加憐源与种植植物都能増加±壤有机酸浓度。小区试验中，菌剂的施加能够显著增加玉米２．２５（Ｐ９３１５（Ｐ４１２产量，最廣増产１２ｔ／ｈｍ。与对照相比，３种菌剂分别增产１．６％）、．３％）和．６％８５Ｐ９３－ＤＧＧＥ方法研

7、Ｐ９３（Ｐ）。根据Ｗ上实验结果，选择菌株为出发菌，利用ＰＣＲ究菌剂的施加对±壤微生物多样性的影响。结果表明，接种溶稱菌剤Ｐ９３能够显著增加玉米根际微生物多样性。本研究构建了溶磯真菌Ｐ９３的、嘘菌体ｃＤＮＡ文库Ｗ及ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔＳＫ（＋）功能文库。＾廬菌９６体文库滴度为４．９ｘｌ〇ｆＷ，功能文库库容量为６ｘｌＭｎＬ，重组率为９９８％。ｐｍＬ．８８〇ｃ．５从文库中一筛选到了溶磯相关基因巧／＾。该