柯萨奇b3病毒诱导细胞产生的自噬及其分子机制研究

《柯萨奇b3病毒诱导细胞产生的自噬及其分子机制研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、－：护．：乂知系州Ａ爭幽ＩＳＯＯＣＨＯＷＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹ硕巧銳文１论文题目柯萨奇Ｂ３病毒诱导细胞产生的自隨及其分子机制研究研究生姓名陈子健董春升Ｉ．—指导教师姓名；免疫学专业名称免疫研究方向感染与２０１５年４月论文提交日期苏州大学学位论文独创性声明本人郑重声明；所提交的学位论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他个人或集体已经发表或撰写过的研究

2、成果，也不含为获得苏州大学或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。本人承担本声明的法律责任。论文作者签名尤特日期：苏州大学学位论文使用授权声明本人完全了解苏州大学关于收集，、保存和使用学位论文的规定良。Ｐ；学位论文著作权归属苏州大学本学位论文电子文档的内容和纸一质论文的内容相致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报中也、中国科学技术信息研究所（含万方数据电子出版社）、中国学术期刊（光蟲版）电子杂志社送交本学位论文的复印件和电

3、子文档，可采用影印、缩印或其他复制手段，允许论文被查阅和借阅保存和＇汇编学位论文，可Ｗ将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。涉密论文口本学位论文属在年＿月解密后适用本规定。＿／非涉密论文虹吃＇。论文作者签名日期．：导师签名；《綱日期；如瓜柯萨奇Ｂ３病奉巧导细胞产生的自逆及其分子机制的研究中文巧要中文摘要柯萨奇Ｂ３病毒（ＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３ＣＶＢ３）是引起人类病毒性必肌炎（ｖｉｒａｌ，ｍｏｃａｒｄｉｔｉｓＶＭＣ）等多种疾病的主要病原微化物在人群中的感染普遍存

4、在。近ｙ，，年来，在我国和欧美各国急性病毒性也肌炎的发病率呈上升态势，已成为青少年一ＣＶＢ不明原因碎死的主要原因么，严重威胁着人类的健康。目前３，诱导的病毒性也肌炎的致病机制尚不完全清楚，所Ｗ针对该病毒的基础研究对于疾病预防和治疗显得尤为重要。ａｕ－细胞自帷（ｔｏｐｈａｇｙ，ｓｅｌｆｅａｔｉｎｇ），是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的分解代谢过程，通常能够保持细胞内环境的稳态。自唆的奈乱会导致多种疾病的发生，并且这种胞内的保守过程能够被多种病原微生物利用来帮助其自身增殖进而导致疾病的发生。本研

5、究旨在探讨ＣＶＢ３与自座之閒的关系Ｗ及ＣＶＢ３诱导自隨的相关分子机制。首先用不同剂量的ＣＶＢ３病毒和不同感染时间梯度处理细胞，经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ－－－检测ＬＣ３Ｉ和ＬＣ３ＩＩ的表达变化，同时借助激光共聚焦显微镜ＬＣ３，利用ＧＦＰ绿色巧光蛋白观察自睡囊泡的形成；接着经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测ｐ６２蛋白变化水平，同时运用ｍＣｈｅＴ－ＧＦＰ－ＬＣ３稳定表达的细胞株借ｉｙ助激光共聚焦显微镜观察绿色萊＋＋－ＬＣ３－ＬＣ光（ＧＦＰ）、红色英光（ｍＣｈｅｒｒｙ３）和黄色巧光（ＧＦＰ和ｍＣｈｅｒｒｙ）的变化情况；

6、并辅ＷＬＡＭＰ１、ＬｙｓｏＴｒａｃｋｅｒ等溶酶体Ｍａｒｋｅｒ通过激光共聚焦显微镜观察自隨溶酶体的定位－ｔｉｍＰＣＲ、；最后通过Ｗｅｓｔｅｒｎ村ｏｔ、Ｒｅａｌｅ流式细胞术、ｓｉＲＮＡ沉默等技术手段证明ＣＶＢ３复制与自帷小体、溶酶体的关系。体外细胞实验发现，ＣＶＢ３诱导的细胞自峰呈现剂量梯度依赖和时间梯度依赖一一，并且激光共聚焦显微镜观察结果进少佐证了ＣＶＢ３可Ｗ诱导自隨这实验结果；同时发现ＣＶＢ３诱导形成的自幢囊泡呈现稳定的红色英光且与溶酶体共定ＶＢ一位形成自隨溶酶体，阐明了Ｃ３可Ｗ诱导细胞产生个完全自随过程

7、；且抑制自随，病毒的复制能力减弱。综上我们得出结论：ＣＶＢ３可Ｗ诱导细胞产生完全自隨，且自處被抑制，病毒的复制能力减弱。提示细胞自礎可Ｗ在病毒增殖、成熟、致病等方面起到重要作Ｉ中文巧要柯萨奇Ｂ３病毒诱导细胞产生的自巡及其分子机制的研究用。同时该研究揭示的可能机制为病毒诱导的病毒性也肌炎等多种疾病的治疗策略提供了线索和思路。关键词：柯萨奇Ｂ３病毒，自睡，病毒复制作者：陈子健指导老师：董春升融教授ＩＩ柯萨奇Ｂ３病毒巧导细胞产生的自随及其分子机制的研究英文巧要Ｔｈｅｉｎｄｕｅ村ｏｎ

8、ｏｆａｕｔｏｐｈａｇｙＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＢ３ｂｙｉｎｆｅｃ杜ｏｎａｎｄｉｔｓｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍ乂ｂｓ化ａｃｔＣｏｘｓａｃｋｉｅｖｉｒｕｓＳ３ＣＶ