玉米转录因子zmwrky102基因的克隆及生物功能分析

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1、分类号１０３：单位代码：６４密级：学号：１２７２０４７４签歡卷咎大ｆ学位论文玉米转录因子Ｚ／Ｔ７Ｗ？／ｒ）７似基因的克隆及生物功能分析ＣｌｏｎａｎｄａｎａｌｓｉｓｏｆＢｉｏｌｏｉｃａｌＦｕｎｃｔｉｏｎｓｏｆＴｒａｎｓｃｒｉｔｉｏｎＦａｃｔｏｒｓｇｙｇｐＺｍＷＲＫＹｌＯＩｆｒｏｍＺｅａｍａｙｓ研％生：李小明指导教师：马庆申请学位口类级别：农学硕壬作物生物技术专业名称：分予細．研究方向：堂所在学院：生命科学学院答辩委员

2、会主席；２０１５年６月独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进斤的研究Ｉ作及取得的研究成果，，论文中不包含其他。尽我所知除了文中特别加＆标注和致谢的地方外人己经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得安徽农业大学或其它教育机构？的学位或证书而使用过的材料？。与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名．０：＾Ｊ巧时间：八换年＾月／Ｃ日关于论文使用授权的说明本人完全了解安徽农业大学有关保留、使用学位论文的规定，目Ｐ：学校有权保留送交论文

3、的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意安徽农业大学可用不同方式在不同媒体上发表、传播论学位论文的全部或部分内容。（保密研的学位文在解密后应遵守此协议）第究生签名：冰旬３时间：＞Ｃ／扛年／月化日一导师豁名：句时间：么〇化年＾月作日（７ｔ摘要生物胁迫与非生物胁迫包括干旱、高盐、高温、低温及病原菌入侵等不仅影响植物的生长发育，也是降低作物产量的主要原因。WRKY转录因子是转录因子家族中超家族成员，主要存在于高等植物中,WRKY转录因子在功能上除受病原菌、损

4、伤和信号分子SA的诱导外，还参与植物的抗逆反应、衰老过程和其他重要的植物的生长发育有关过程。本研究从玉米自交系B73基因组中克隆得到ZmWRKY102基因序列，并对其生物学功能进行初步分析，获得研究成果如下：(1)组织表达模式分析表明ZmWRKY102基因在玉米叶、茎、根、花丝、雄花序、苞叶、果穗、胚和胚乳九个组织中均有表达，但在玉米三叶期幼叶与根中的表达较高。诱导表达模式分析表明ZmWRKY102受到干旱、高盐和ABA分子诱导表达。(2)基因序列分析表明：ZmWRKY102基因编码区全长1002bp，编码333个氨基酸。预测编码ZmW

5、RKY102蛋白的相对分子质量为35.1KD，等电点为6.4。氨基酸序列对比分析ZmWRKY102氨基酸序列含有1个高度保守的WRKY结构域和典型的C2HC型锌指结构域，结果ZmWRKY102属于典型WRKY家族第三类基因。(3)构建的融合表达载体p1305-ZmWRKY102进行亚细胞定位，显示ZmWRKY102定位于细胞核中。(4)酵母单杂交体系分析结果表明ZmWRKY102在酵母中具有转录活性。(5)构建pGEX-4T-1-ZmWRKY102载体诱导ZmWRKY102蛋白表达。产物经SDS-PAGE电泳检测到约60KDa的GST-

6、WRKY102融合蛋白差异条带。(6)转基因植株逆境处理，结果表明：干旱和高盐胁迫下，ZmWRKY102基因能提高植株抗旱能力但对高盐更加敏感。(7)ABA敏感性实验结果表明ZmWRKY102过量表达转基因植株种子的萌发和出绿率受到外源ABA的抑制，这些结果表明ZmWRKY102参与ABA介导的信号途径。关键词：玉米；ZmWRKY102；转录因子；非生物胁迫IAbstractPlantsareadverselyaffectedbyunfavorableenvironmentalconditionsduringtheirdevelopme

7、nt,suchasdrought、highsalinity、hightemperature、lowtemperatureandpathogenattack.Theseabioticstressesaffecttheplantsgrowth,developmentandproductivityofplants.Inadditiontoinducedbypathogen,damageandsignalmoleculesofSA,WRKYproteinsmayalsoparticipateinstresssignal,senescencean

8、dplantsdevelopment.Inthisstudy,weclongaZmWRKY102gene,frommaizeinbredlineB73andcharacterizedthefunctiona