益骨颗粒对原发性骨质疏松症的治疗作用及其机制探讨

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1、分类号８５．５学校代号１０５７２；二吗ＵＤＣ６－１０密级学号２０１２１１０５３７２．户抑【中度為乂緣ＧｕａｎｇｚｈｏｕＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ‘＇■—？．．硕±学位论文益骨颗粒对原发性骨质疏松症的治疗作用及其机制探讨学位申请人梁志健指导教师姓名＾专业名称中药学申请学位类型科学学位论文提交日期２０１５年５月■？？．广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明；所呈

2、交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中己经将别加Ｗ注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成果。对本文的研巧做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签曰期：年ｒ月乙案关于学位论文使用授权的声明本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部口机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中医药大学可Ｗ将本

3、学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。（保密论文在解密后应递守此规定）论义作者答名论＊导师線扣信年－日瓶＾月＾日中文摘要目的：－对益骨颗粒治巧骨质疏松症的作用进行药效学评价，并从血巧浓度、骨形成骨吸收的稱联状态、成骨细胞的增殖分化等方面对该治疗作用的机制进行探讨。方法：１．益骨颗粒对双侧卵巢摘除大鼠骨质疏松症的治巧作用ＳＤ雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、雌二醇姐、益骨颗粒低、中、高组。除＾假手术组外１，其

4、余动物双侧摘除卵巢１＾制备骨质疏松症模型，假手术组动物不摘除卵一Ｉ。：巢，只剪去卵巢附近约ｇ的脂肪术后周，动物分别灌胃给药，剂量分别为雌－－———ｉｉＩＩｉ二？？Ｔ？？？？、益醇０．０００３ｇｋｃ骨颗粒低剂量０．４ｋｄ、中剂量０．８ｋｄ、ｇｇｇｇｇ＾１＊－高剂量１．６１＜（］人假手术组和模型组动物给予等量蒸溜水３３，连续治疗化周。给药后第１２、化周，分别对动物全身的骨密度进行检测。动物处巧前第１４天皮下注射盐酸四环素，２５ｍｇ／ｋｇ；处死前第４天皮下注射巧黄素，ｌＯ

5、ｍｇ／ｋｇｌ＾制各炎光标记。末■化３０ｍｋ次给药后，动物腹腔注射戊己比妥钢ｇ／ｇ麻醉，腹主动脉取血，分离血清，利用ＥＬＳＩＡ法检测血清中骨钩素、抗酒石酸酸性憐酸酶化的含量，利用全自动生化仪、、、、检测血清中巧磯碱性憐酸酶的含量。取血完毕，动物处死，取其子宫腰椎双侧股骨及左侧腔骨。子宫用于制作病理切片，观察益骨颗粒对子宫的影响；腰椎和右侧股骨用于离体骨密度检测；左侧股骨用于生物力学指标的检测；左侧腔骨用于制作切片，观察该药对骨组织形态计量学指标（骨外膜形成率等）的影响。２．益骨颗粒对大鼠成骨

6、细胞増殖分化及其合成分泌碱性憐酸酶作用的影响取新生２日龄ＳＤ大鼠烦骨，利用酶消化，对其中的成骨细胞进行原代分离，并行形态学观察与碱性磯酸酶染色鉴定。制备雌二醇、益骨颗粒低、中、离剂量的含药如－、化后ＣＣＫ８血清，按体系数浓度的１０％加入第王代成骨细胞培养基，继续培养４７，法检测成骨细施増殖状况，磯酸对硝基苯醋法检测细胞中碱性磯酸酶水平。结果：１．益骨颗粒对双侧卵巢摘除大鼠骨质疏松症的治疗作用（１）与模型组相此，给药３个月后，益骨颗粒高剂量组能显著提高动物的骨密。度，益此外，益骨颗；

7、给药４个月后骨颗粒各剂量组均能显著提高动物的骨密度值粒中、高剂量组能显著提高股曾、腰椎的骨密度。（２）与模型组相比，益骨颗粒中剂量可显著地提商血清巧的水平。此外，益骨颗粒中、高剂量组血清的０ＣＮ、ＴＲＡＣＰ化有显著性地降低。（３）在生物力学实验中、高剂量组动物股骨的最大弯曲应力、最，益骨颗粒中大应变、骨刚性系数较模型組有显著性地提髙。Ｉ（４）通过腔骨骨组织形态计量学观察发现，益骨颗粒高剂量可显著性地提高骨小梁面积百分数；而中、高剂量可降低骨小梁分离度，结果有统计学意义。此外，益骨颗粒中

8、、商剂量可降低骨外膜巧光周长百分数，而各剂量也可显著性地降低骨外膜形成率。２．益骨颗粒对大鼠成骨细胞增殖分化及其合成分泌碱性磯酸酶作用的影响（１）与对照组相比，经益骨颗粒各剂量含药血清培养７２ｈ后，成骨细胞的増殖率有显著性的提高。（２）与对照组相比，经益骨颗粒各剂量含药血清培养４８ｈ后，成骨细胞碱性憐酸酶水平有显著性的提