西瓜嗜酸菌致病相关基因的筛选及功能分析

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1、４３２１１０３８９分类号：Ｓ．单位代码：１１２０２０４０２密级：学号１：福建农林大学项士学位论文西瓜嗜酸菌致病相关基因的蹄选及功能分析学科门类：农学一级学科名称：植物保护二级学科名称：植物病理学研究方向：植物病原学研究生姓名：陈娇梅指导教师：胡方平教授．蔡学清教授‘一二〇．完成时间：五年四月Ｉ１０３８９：Ｓ４３２１分类号．单位代码：１１２０２０４１密级：学号：０２福建农林大学硕士学位论文西瓜嗜黢菌致病相关基因的筛选及功能分析学

2、科门类：农学一级学科名称：植物保护二级学科名称：植物病理学研究方向：植物病原学研究生姓名：陈桥梅指导教师：胡方平教授蔡学清教授二一五年四月完成时间：〇＇ＴｈｅＴｈｅｓｉｓｏｆＦＡＦＵｓＭａｓｔｅｒＳｔｕｄｅｎｔＳＣＲＥＥＮＩＮＧＡＮＤＦＵＣＴＩＯＮＡＮＡＬＹＳＩＳＯＦＰＡＴＨＯＧＥＮＣＩＴＹ－ＲＥＬＡＴＥＤＧＥＮＥＳＩＮＡＣＩＤＯＶＯＲＡＸＣＩＴＲＩＬＬＩＤｅｒｅｅｃａｔｅｏｒ：ＡｒｏｎｏｍｇｇｙｇｙＴｈｅｎａｍｅｏｆｄｉｓｃ

3、ｉｐｌｉｎｅ：ＰｌａｎｔＰｒｏｔｅｃｔｉｏｎＴｈｅｎａｍｅｏｆｍａｏｒ：ＰｌａｎｔＰａｔｈｏｌｏｊｇｙＲｅｓｅａｒｃｈｆｉｅｌｄ：ＰｌａｎｔＥｔｉｏｌｏｇｙＳｔｕｄｅｎｔｎａｍｅ：ＣｈｅｎＪｉａｏｍｅｉＳｕｅｒｖｉｓｏｒ．ＨＦｐ：ｒｏｆｕａｎｉｎｐｇｐｇｐｒｏｆ．ＣａｉＸｕｅｑｉｎｇＳｕｂｍｉｔｅｄｔｉｍｅ：Ａｐｒ．２０１５ＦｕｉａｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒｅａｎｄＦｏｒｅｓｔｒＵｎｉｖｅｒｓｉｔＦＡＦＵｊｇｙｙ（）独创性声明本人声明

4、，所呈交的学位（毕业）论文，是本人在指导教师的指导下独立完成的研宄成果，，并且是自己撰写的。尽我所知除了文中作了标注和致谢中己作一。了答谢的地方外，论文中不包含其他人发表或撰写过的研究成果与我同对本研究做出贡献的同志，都在论文中作了明确的说明并表示了谢意，如被查有侵犯他人知识产权的行为，由本人承担应有的责任。学位（毕业）论文作者亲笔签名日期：上０多论文使用授权的说明本人完全了解福建农林大学有关保留、使用学位（毕业）论文的规定，即学校有权送交论文的复印件，允许论文被查阅和借阅；学校

5、可以公布论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。保密，在年后解密可适用本授权书。口不保密，本论文属于不保密。学位？（毕业）论文作者亲笔签名ｒ日期：？％＾７丨夕．上”ｊ＾？＾指导教师亲笔签名：：、日期．姨．ｊ３０斗１目录ｍｍＩＡｂｓｔｒａｃｔＩＩＩ１前言究简况１１．１１．１病原菌分类及形态特征１１．．２寄主范围与发病规律２３１１．．３髓１．１．４症状特点４１１４．．５防治策略５１．２西瓜

6、嗜酸菌致病机理的研究进展１．２．１ＩＩ型和ｍ型分泌系统６１６．２．２群体感应系统１２．．３鞭毛７１２７．．４菌毛８１．３本研究的目的意义２西瓜嗜酸菌致病性缺失突变体的筛选及Ｔｎ５插入位点的鉴定９２１９．实验觀２．１．１菌株９、质粒２１．．２９働２．１．３培养基与试剂９２．１．４引物９２．１．５主要仪器１０２１０．２方法２．２．１菌株的培养１０２．２．２西瓜果实致病性测定１０２．２．３突变菌株菌落形态与颜色观

7、察１１２１．２．４甜瓜浸种接种１２１．２．５西瓜苗摩擦接种２２ＰＣＲ１．２．６突变菌株的检测２２２．６．１ＤＮＡ取１２．总的提２．２．６Ｒ扩增１．２菌株的ＰＣ３２．６．１．２３电泳检测３一亚克隆技术２１．２．７突变体转座子插入位点的鉴定３２１ＤＮＡ及ＢｕｅＤＮＡ．２．７．突变体总ｐｌ质粒的提取１３２．７．２１４．２突变体基因组与质粒ＤＮＡ单酶切２．２．７．３基因组ＤＮＡ和ｐＢＬｕｅ载体酶切产物的回收与连接１５２．２．７．４化１６

8、转２．２．４１．７．１大肠杆菌ＤＨ５ａ热激感受态细胞的准备６１７２．２．７．４．２热激转化２．１７．２７．５转化子的筛选２．２．７．６序列分析１７２１７．３结果与分析２．３．１西瓜果实上突变体致病力筛选结果１７２．３．２突变菌株菌落形态和颜色的观察１８２１．３．３甜瓜种子接种９２．３．４西瓜苗摩擦接种２１２．３．５待测突变菌株的Ｐ