常用生物试剂配制方法

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1、常用生物试剂配制方法(buffer)实验室各种缓冲液的配方电泳缓冲液50xTris-乙酸(TAE)缓冲液成分2mol/LTris碱1mol/L冰乙酸EDTA(pH=8.0)水终浓度配制1L溶液各成分的用量242g57.1ml18.622g(200ml的0.5mol/LEDTA(pH8.0))补足1L5xTris-硼酸(TBE)缓冲液成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量445mmol/LTris碱445mmol/L硼酸盐10mmol/LEDTA水54g27.5g硼酸20ml的0.5mol/LEDTA(pH8

2、.0)补足1L染料1%浪酚蓝(bromophenolblue)加1g水溶性钠型浪酚蓝于100ml水中，搅拌或涡旋混合直到完全溶解。1%二甲苯青FF(xylenecyanoleFF)溶解1g二甲苯青FF于足量水中，定容到100ml。10mg/ml的漠化乙锭(ethidiumbromide)小心称取1g漠化乙锭，转移到广口瓶中，加100ml水，用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管，于4°C贮存。凝胶上样液(gelloadingsolutions)6x碱性凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml

3、溶液各成分用量0.3N氢氧化钠6mmol/LEDTA(pH8.0)18%聚蔗糖(400型)0.15%漠甲酚绿0.25%二甲苯青FF水6x聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%澳酚蓝0.15%二甲苯青FF300ul10N氢氧化钠120ul0.5mol/LEDTA1.8g15mg25mg补足到10ml1.5ml1%澳酚蓝1.5ml1%二甲苯青FF5mmol/LEDTA15%聚蔗糖(400型)水100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)1.5g补足到10ml6灯臭酚蓝

4、/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度0.25%漠酚蓝0.25%二甲苯青FF15%聚蔗糖（400型）水6x甘油凝胶上样液（4°C贮存）成分及0.15%澳酚蓝0.15%二甲苯青FF5mmol/LEDTA（pH8.0）50%甘油水配制10ml溶液各成分用暈2.5ml1%漠酚蓝2.5ml1%二甲苯青FF1.5g补足到10ml终浓度配制10ml溶液各成分用1.5ml1%漠酚蓝1.5ml1%二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA3ml3.9ml6x蔗糖凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10

5、ml溶液各成分用量0.15%漠酚蓝0.15%二甲苯青FF5mmol/LEDTA40%聚蔗糖水1.5ml1%漠酚蓝1.5ml1%二甲苯青FF100ul0.5mol/LEDTA(pH8.0)4g补足到10ml10x十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液（室温贮存）成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.2%漠酚蓝0.2%二甲苯青FF200mmol/LEDTA0.1%SDS50%甘油水20mg20mg4ml0.5mol/LEDTA(pH8.0)100ul10%SDS5ml补足到10ml0.5mol/LEDTA:配制等

6、摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L）,混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA”2H20和20g的NaOH（调节pH=8.0）,并溶于水中,定容至1L。0.5mol/LEDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液（0.5mol/L）,混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA"2H2O和20g的NaOH,并溶于水中，定容至1L。1mol/LMgCI2:溶解20.3gMgCI2"6H2O于足量的水中，定容到100ml。10mg/mlRnase

7、（无DNase）（DNase—freeRNase）：溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液小（pH5.0）。溶解后于水浴屮煮沸15min,使DNA酶失活。用1mol/L的Tris—HCI调pH至7.5,于-20°C贮存。（配制过程中要戴手套）1ON氢氧化钠（NaOH）：溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯中（磁力搅拌器搅拌）,氢氧化钠完全溶解后用水定容至1L。10%SDS（十二烷基硫酸钠）：称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中，用磁力搅拌器搅拌直至完全

8、溶解。用水定容至1L。10x标准DNA连接酶缓冲液（standardDNAligasebuffer）（粘端、平端连接）成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用量0.5mol/LTris-HCI:5ml1mol/L贮液,100mmol/LMgCI2:1ml1mol/L贮液,100mmol/LDTT:1ml1mol/L贮液,2mmol/LATP:200ul100mmol/L贮液,5mmol/L盐酸亚精胺（可选）:50ul1mmol/