菊花组织培养论文

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1、菊花组织培养论文单位：迁安市马兰庄镇初级中学姓名：胡瀚文摘要:通过组培试验，初步得出了菊花组培育苗时最佳的诱导培养墓配方:用花瓣做外植体，在诱导培养基上接种诱导成愈伤组织，然后再在分化培养基上快速分化，之后在生根培养基上生根壮苗，再出瓶培养成生产用苗。关键词:菊花;愈伤组织;培养基；激素.菊花菊科多年生宿根花卉，别名黄花、节华、秋菊、金蕊等。菊花原产中国，栽培历史悠久，品种丰富，花型花色千变万化，观赏价值极高。它是中国十大传统名花之～，也是世界上深受广大民众喜欢的园艺植物之一，与香石竹、月季、唐菖蒲一起被称为四大切花，畅销国际市场。组织培养发展简史1838-1839年，德国科

2、学家Schleide和Schwann发表了细胞学说，奠定了组织培养的理论基础。　　1902年，德国植物学家Haberlandt根据细胞学说，提出单个细胞的植物细胞全能性（totipotency）理论。　　1904年，Hanning最先成功地培养了萝卜和辣根菜的胚。　　1922年，Knudson采用胚培养法获得大量兰花幼苗。　　1934年，White用番茄根尖建立起第一个活跃生长的无性繁殖系，从而使非胚器官的培养首先获得成功。　　1958年，英国科学家Steward等用胡萝卜根的愈伤组织细胞进行悬浮培养，成功诱导出胚状体并分化为完整的小植株，不但使细胞全能性理论得到证实，而且为

3、组织培养的技术程序奠定了基础。　　1962年，Murashinge和Skoog在烟草培养中筛选出至今仍被广泛使用的MS培养基。　　1964-1966年，印度科学家Guha和Maheswari在曼陀罗花药培养中首次由花粉诱导得到了单倍体植株。　　1972年，Carlson通过两个种的烟草原生质体融合培养，获得了第一个体细胞杂交的杂种植株。……、材料与方法1．实验材料（1）实验植株菊花（2）实验器材高压灭菌锅、超净工作台、培养箱、冰箱、天平、平底试管、剪刀、镊子、平皿、酒精灯、滤纸、烧杯、玻璃棒、橡胶塞、ph试纸。(3)实验试剂贮备液Ⅰ（20×）V=500ml(按顺序逐一溶解)N

4、H4NO333gKNO338gCaCl2.2H2O8.8g（含结晶水换算）MgSO4.7H2O7.4g（含结晶水换算）KH2PO43.4g贮备液Ⅱ（200×）V=1000ml(按顺序逐一溶解)KI0.166gH3BO31.24gMnSO4.4H2O4.460gZnSO4.7H2O1.720gNa2MoO4.2H2O0.050gCuSO4.5H2O0.005gCoCl2.6H2O0.005g贮备液Ⅲ（200×）V=200ml(按顺序逐一溶解,调PH到5.5)Na2.EDTA.2H2O1.492gFeSO4.7H2O1..112g(分开配再混在一起，FeSO4.7H2O不能加热要

5、自然溶解，否则Fe2+会被氧化成Fe3+)贮备液Ⅳ（200×）V=1000ml(按顺序逐一溶解)肌醇20g烟酸0..1g盐酸吡哆醇0.1g盐酸硫胺素0.02g甘氨酸0.4g激素：生长素—α-萘乙酸（NAA）细胞分裂素—6-苄基腺嘌呤（6-BA）其他:蔗糖、琼脂粉、2.实验方法(1)配置四种储备液，见实验试剂（2）配置激素1mg/ml6-BA：称取50mg的6-BA于烧杯中，加适量的氢氧化钠使其混匀，再定容到50ml，倒入试剂瓶中。1mg/mlNAA：称取50mg的NAA于烧杯中，加适量的无水乙醇使其混匀，再定容到50ml，倒入试剂瓶中。（3）MS培养基的配置称取3g蔗糖于25

6、0ml的烧杯中，向其中加入适量的水溶解，再向其中加入贮备液Ⅰ5ml，Ⅱ0.5ml，Ⅲ0.5ml，Ⅳ0.5ml,加水混匀定容到100ml。分装平底试管，每管20ml,，再往每管中加入0.14g的琼脂粉，最后往每管中加入不同浓度的生长素和细胞分裂素，见下表：激素序号6-BANAA11.0mg/L20ul0.1mg/L2ul21.0mg/L20ul0.3mg/L6ul32.0mg/L40ul0.5mg/L10ul42.0mg/L40ul0.3mg/L6ul53.0mg/L60ul0.3mg/L6ul(4)调PH7.0，塞上橡胶塞，置灭菌锅中121℃灭菌20min。（5）菊花花瓣的预

7、处理取菊花花瓣，用自来水洗3~5次，置于小烧杯中浸泡半小时，用70%乙醇浸泡15s，无菌水清洗3次后，用2%次氯酸钠（吐温802滴）浸泡10min，再用无菌水洗3~4次。于灭过菌的培养皿上，切割成0.5cm×0.5cm大小。（6）诱导培养:将处理好的菊花花瓣接入到诱导培养基中，每管做好记号，放入25℃温箱光照培养。（7）分化培养：四个星期后，菊花花瓣变绿，将没污染且长势良好的菊花花瓣组织切成小块无菌操作转入诱导培养基中。分化培养基为MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L（8）生根培养：一个星