临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十八章需氧兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验

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1、第十八章需氧/兼性厌氧革兰阳性杆菌及检验本章内容一、棒状杆菌属（一）白喉棒状杆菌（二）其他棒状杆菌（类白喉棒状杆菌）二、芽胞杆菌属（一）炭疽芽胞杆菌（二）蜡样芽胞杆菌三、产单核李斯特菌四、丹毒丝菌属（红斑丹毒丝菌）五、阴道加特纳菌标题记忆图像记忆对比记忆棒状杆菌属+·G杆菌，菌体一端或两端膨大呈棒状，故名棒状杆菌。·着色不匀，有异染颗粒。·无鞭毛、无荚膜、无芽胞。·需氧，营养要求较高。·能分解一些糖类，产酸不产气。·种类较多，有白喉棒状杆菌、假白喉棒状杆菌、干燥棒状杆菌、溃疡棒状杆菌等。引起人类致病的主要是白喉棒状杆菌，其他大多

2、数为条件致病菌。白喉棒状杆菌——生物学特性·形态与结构形态：细长微弯，一端或两端膨大。排列：散在L、V、Y字形及不规则栅栏状。特殊结构：无荚膜、无芽胞、无鞭毛、无菌毛。第1页共10页革兰染色：阳性。亚甲蓝染色：深浅相间节段或着色较深的颗粒。Neisser染色：菌体染成黄褐色，颗粒染成紫黑色。Albert染色：菌体呈蓝绿色，异染颗粒蓝黑色。·培养特性营养要求：较高。气体环境：需氧或兼性厌氧。温度环境：35～37℃；pH7.2～7.8。菌落特征：普通培养基上生长不良，形态不典型。吕氏血清斜面培养基：生长迅速，10～18h形成灰白色、

3、湿润、S型菌落。异染颗粒明显。亚碲酸钾血琼脂：菌落呈黑色。第2页共10页白喉棒状杆菌——微生物检验及鉴定·标本采集：若需培养，应在使用抗生素或其他抗菌药物前用无菌长棉拭子，从可疑的伪膜边缘采集分泌物，或采集鼻咽部或扁桃体黏膜上的分泌物。如不能立即送检，应将标本浸于无菌生理盐水或15%甘油盐水中保存。·形态学检查：革兰染色和异染颗粒染色（奈瑟法或阿培特法）。镜检如见革兰阳性形态典型的棒状杆菌，在细菌的一端或两端有浓染的颗粒，和菌体着色不均匀，称为异染颗粒。这是白喉棒状杆菌的形态学特征，对鉴别细菌有重要意义。·分离培养·生化试验糖类

4、发酵试验硝酸盐还原试验明胶液化试验吲哚试验尿素分解试验分解葡萄糖、麦芽糖、果糖、半乳糖，不分解乳糖、蔗糖；产酸不产气+---·毒力试验：可作为鉴定致病菌株的重要依据。体外法有双向琼脂扩散法、SPA协同凝集试验、对流免疫电泳；体内法可用豚鼠作毒素中和试验。白喉棒状杆菌——致病性及临床意义·致病物质白喉外毒素：抗原性强，毒性剧烈。本菌不侵入血流，但白喉外毒素可吸收入血，引起毒血症。·所致疾病白喉：急性呼吸道传染病。气管、支气管假膜：是白喉早期死亡的主要原因。心肌炎、软腭麻痹：是白喉晚期死亡的主要原因。芽胞杆菌属+·G大杆菌。·大多数

5、菌种在有氧环境下形成芽胞。有动力。·非抗酸性。需氧或兼性厌氧菌，在普通培养基上生长良好。·广泛分布于自然界，绝大多数为腐生菌，许多菌种成为实验室等环境的污染菌。少数寄生于动物或昆虫并对人类及动物致病，其中炭疽杆菌是人畜共患的重要致病菌，蜡样芽胞杆菌能致食物中毒。炭疽芽胞杆菌——生物学特性·形态与结构形态：两端齐平，呈竹节状。排列：组织内生长呈单个或短链，试管内可形成长链。大小：致病菌中最大的革兰阳性杆菌。+染色：G。第3页共10页特殊结构：无鞭毛，机体内或含血清培养基上可形成荚膜。人工培养或在外界环境中易产生芽胞，形状椭圆，位于

6、菌体中央，其直径小于菌体。·培养特性营养要求：一般。气体环境：需氧或兼性厌氧。温度环境：37℃，pH7.0～7.4。菌落特征：可用2%兔血清肉汤增菌。（血）琼脂平板：形成灰白色、不透明、无光泽、边缘不整齐、大而扁平的粗糙型菌落，低倍镜下观察呈卷发状。轻微溶血。碳酸氢钠琼脂平板：置5%CO2环境中37℃24h后，有毒株形成黏稠有光泽的黏液型（M型）菌落（有荚膜菌体）；无毒株粗糙型菌落（R型）。·抗原①菌体多糖抗原；②荚膜多肽抗原；③芽胞抗原；④炭疽毒素抗原。第4页共10页·抵抗力本菌芽胞体抵抗力很强，在干燥土壤或皮毛中常温下可存活

7、数十年。一般对碘及氧化剂较敏感。炭疽芽胞杆菌——微生物检验及鉴定·标本采集：根据不同感染部位取材；各型炭疽均可采取血液。专门防护的实验室，并对用过的器具、检材等进行严格的消毒处理。·形态学检查：革兰染色和荚膜染色。镜检发现有荚膜的革兰阳性竹节状大杆菌。荚膜荧光抗体染色，链状或竹节状大杆菌周围有发荧光的荚膜者为阳性。·分离培养：污染严重的标本可预先加热至65℃30min杀灭杂菌，或接种炭疽杆菌选择培养基-喷他脒（戊烷脒）血琼脂平板，菌落特征与血平板培养基的生长相似，但菌落较小。·生化试验糖类发酵试验硫化氢试验明胶液化试验吲哚试验动

8、力试验分解葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，不分解乳糖；产酸不产气-+--·其他试验①串珠试验阳性②噬菌体裂解试验③重碳酸盐毒力试验菌落呈M型④青霉素抑制试验⑤植物凝集素试验⑥动物试验炭疽芽胞杆菌——致病性及临床意义·致病物质：荚膜及炭疽毒素。·所致疾病炭疽病：炭疽芽胞杆菌