神经营养素及其受体在颗粒细胞的表达与多囊卵巢综合症患者卵泡发育

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1、上海第二医科大学博士后学位论文神经营养素及其受体在颗粒细胞的表达与多囊卵巢综合症患者卵泡发育姓名：陈炳锦申请学位级别：博士后专业：妇产科学指导教师：程利南20040520上海第二医科大学临床医学博士后出站报告神经营养素及其受体在颗粒细胞的表达与多囊卵巢综合症患者卵泡发育中文摘要女性的生殖功能受到内分泌系统和神经系统的综合调节，组成统一的神经内分泌系统，下丘脑～垂体一卵巢轴的激素是调节女性生殖功能的主要环节，卵巢局部的旁分泌及自分泌活动发挥“微调节器”作用，使下丘骑一垂体的调节作用表达得更加精确和完整。卵巢局部的神经因素对卵

2、巢功能的调控是近10余年生殖内分泌研究的新热点。人类卵巢受到外周神经系统的交感神经和感觉神经的支配，交感神经可能通过调节卵巢血流或影响卵泡壁体细胞的功能影响卵巢活动，切断发情前大鼠的卵巢上神经发现其体内雌激素水平明显降低，体现外周神经对卵巢功能的影响。神经营养素是一群属于神经生长因子家族的分泌型蛋白质，目前在卵巢组织已经发现NGF、BDNF、NT一3、NT一4／5等四种神经营养紊和全部神经营养素受体(NTR、TrkA、TrkB、TrkC)3。14-16．目前有关神经营养紊对卵巢功能影响的研究报告主要来自是动物，人类研究较少

3、，研究结果显示神经营养囊及其受体可能通过调控卵巢内体细胞和生殖细胞的生长、分化和细胞间的相互作用影响早期卵泡的生成、生长和参与卵母细胞的成熟和排卵。多囊卵巢综台症(polycyslieovarysyndrome，PCOS)是生育年龄妇女晟常见的内分泌紊乱，戊酸雌二醇诱导的大鼠PCOS动物模型从卵粜的形态、生长内分泌激素的变化、生理状态都和人类PCOS相似，研究发现NGF分泌异常与动物模型PCOS的发生、发展相关。本中心承担上海市科学技术委员会项目“人类卵泡体外培养”，纳入对象为PCOS，因此我们在课题的研究基础上进一步探讨

4、PCOS患者的成熟与朱成熟卵泡的颗粒细胞神经营养索NGF、BDNF及其受体p75NTR、TrkA、"l'rkB的表达并与生殖内分泌正常IVF患者进行比较，以了解神经营养素及其受体在卵泡发育和卵母细胞成熟过程中的作用，为更好进行卵泡体外培养准备理论基础．第一部分中国福利会屠际和平妇幼保健院2上海第二医科大学临床医学博士后出站报告未成熟卵母细胞体外成熟在多囊卵巢综合症的临床应用1．研究对象：2003年3月至2003年12月中国福利会国际和平妇幼保健院生殖医学中心不孕症门诊初诊病人4474例，经过知情选择11例PCOS病人自愿进

5、入IVM项目。患者年龄24～35岁，平均28．1岁．不孕年限2～8年，平均4,2年，PCOS诊断年限1～5年，平均2．6年，体重指数20．1～24．6kg／m2，原发性不孕10例，继发性不孕1例，克罗米芬抵抗5例，卵巢过度刺激史2例，所有患者进入IVM前检查基础生殖内分泌激素水平、盆腔B超扫描，如存在异常经治疗正常后纳入。2．方法：自然或小卉¨量FSH刺激至卵泡直径达到10mm注射hCG，36小时后经阴道穿刺获取未成熟卵母细胞，体外培养24～48小时，成熟卵母细胞进行ICSl。子宫内膜准备根据hCO注射日子宫内膜的厚度给予

6、戊酸雌二醇，内膜厚度≤6mm，穿刺日起每天口服补佳乐10rag，而内膜厚度>6ram，每天口服补佳乐6rag；卵母细胞培养成熟行ICSI开始每日给予黄体酮100mg肌肉注射。移植同IVF，移植后继续用补佳乐、黄体酮，剂量不变。移植后14天检查晨尿、血hCO以确定妊娠．阳性者，继续用补佳乐、黄体酮直到B超探及原始心管搏动：阴性者停用补佳乐、黄体酮．结束本周期治疗。3．结果：11例PCOS患者共获卵141个，平均12．8个，培养24～48小时后共96个达到Mll期，成熟率68％，ICSI后受精共59个，自然受精6个，]CSI受

7、精率68％，自然受精率67％，46个发生卵裂(其中6个为自然受精)，ICSI卵裂率68％，优质胚胎(I～III级)37个，自然受精6个均为优质胚胎。移植后14天，两例晨尿、血hCG阳性，移植后28天探及子宫内单个孕囊并见原始心管搏动。IVM失败后有4例原克罗米芬抵抗者，3例诱导排卵成功，其中一例已妊娠6月(单脆)，另一例经HMG两个周期现已妊娠4月余(三胎)。4．结论：a)IVM是PCOS不孕治疗的新选择；b)体外成熟卵母细胞可以自然受精；c1经阴道卵巢穿刺可以作为PCOS手术治疗的一种方式。第二部分神经生长因子及其受体在

8、颗粒细胞的表达与多囊卵巢综合症患者中国福利会国际和平妇幼保健院上海第二医科大学临床医学博士后出站报告卵泡发育1．研究对象：第一部分IVM1l例，同期IVF病人50例。其中17例为PCOS，33例月经、生殖内分泌激素均在正常范围，所有病例均采用标准长方案治疗，按本中心常规操作，卵泡穿刺时收获颗粒细胞保存于