抑郁大鼠进食量、胃容受性扩张功能测定与脑内5HT含量的关系

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1、抑郁大鼠进食量、胃容受性扩张功能测定与脑内5-HT含量的关系作者：张俊峰邹义君李昌平崔泽忠曹洋冯志强【关键词】抑郁反应大鼠摘要目的:探讨抑郁反应大鼠胃容受性扩张功能、进食量、脑内5-HT的关系。方法:20只SD大鼠随机分为两组，记录每只大鼠每天进食量，实验组采用足底电刺激使大鼠产生抑郁反应（I=0.8mAT=1h），对照组放入电刺激箱内1h，但不与刺激。常规空腹腹腔麻醉下食管插管分级恒压灌注混合营养液体，免疫组化法测定大鼠脑内5-HT含量。结果:在电刺激后第二天实验组大鼠进食量明显降低分别为对照组（22.7±6.83）g/kg;实验组

2、（16.80±4.59）g/kg，在4cmH2O灌注下实验组大鼠胃内容量明显下降，对照组平均（36.78±6.21）mL/kg，实验组平均为（25.20±6.34）mL/kg（P<0.01）;脑内5-HT阳性指数实验组0.024±0.010明显小于对照组0.052±0.012，P<0.01。脑内5-HT阳性指数对抑郁反应积分和4cmH2O恒压灌注下胃内容量相关系数分别0.741（P<0.01）、0.566（P<0.05）。抑郁反应积分对4cmH2O恒压灌注下胃内容量相关系数0.681（P<0.05）。结论

3、:大鼠脑内5-HT阳性积分降低明显导致抑郁反应及胃容受性扩张功能明显降低;而与大鼠进食量的关系不明显，脑内5-HT降低可能是FD发病的根本原因之一。8关键词抑郁反应大鼠;胃容受性舒张功能;5-HT功能性消化不良（Functionaldyspepsia，FD）发病机制仍不清楚，目前认为一些机制，包括胃排空延迟、胃扩张感受的高敏性、胃电活动异常、社会精神因素及中枢神经功能异常等参与FD发病。近年来，5-HT系统在功能性胃肠疾病中的作用受到广泛重视。本实验观察应激反应大鼠实验前后进食量的改变与抑郁反应积分及脑内5-HT的含量的关系。试图进一

4、步解释5-HT在FD发病中的作用。1材料和方法　　1.1实验动物S-D大鼠20只，（泸洲医学院动物科提供4月龄川医动字:2410115），体重300g～350g，雌雄各半，随机分为两组。　　1.2实验仪器、试剂Rm6240B多媒体生理实验系统（成都仪器厂），大鼠抑郁反应穿梭箱，自制［1］。恒压灌注器:自制，图像分析仪。抗-5-HT抗体、SABC试剂盒（深圳晶美生物工程公司）。81.3实验方法1.3.1定时进食及饮水，早晚各一次记录每次每只大鼠进食量，共三天，计算平均量。1.3.2.2d后，将实验组大鼠放入穿梭箱中，关闭中间挡板，给予电

5、刺激（30V，每次15s，1次/min，电流控制在0.4mv～0.8mv。共持续60min）对照组给予放入穿梭箱中，不与刺激，时间为60min。1.3.3于实验后当天记录进食量，同第1步，3d（早晚各1次取均数）。1.3.4.电刺激3d后将大鼠放入穿梭箱中，打开挡板，让大鼠熟悉环境5min后，给予电压为30V，电流0.4mv～0.8mv电刺激，至大鼠逃避成功或15s结束，3s内逃避至穿梭箱另一侧为逃避成功，记1分，重复共30次。1.3.5恒压灌注下胃内容量测定:逃避反应结束后，乌拉坦1g/kg腹腔注射麻醉空腹大鼠，颈部手术暴露气管，常

6、规气管插管。借助导丝将导管从口腔插入胃内，导管连接恒压灌注系统，再分别调4cmH2O、6cmH2O、8cmH28O从导管内注入混合营养液体。灌注时间为5min，然后夹闭恒压器，用注射器缓慢抽出胃内液体，将液体量读出记录。1.3.6灌注固定:于大鼠左、右心室迅速插管，用洗涤液冲洗至流出液清亮，再用4%多聚甲醛PBS液灌注20min。1.3.7完整取出大鼠脑组织进行脱水，石蜡包埋，切片。1.3.8免疫组化染色:按NEOMARKERS公司操作步骤进行。1.3.9图象分析仪分析免疫组织化学结果，选择10个高倍视野下阳性区域，计算其阳性密度及阳

7、性面积。计算出阳性指数（阳性指数=阳性密度×阳性面积）所得结果均用均数±方差表示。　　1.4统计方法脑内5-HT阳性指数、抑郁反应积分近似正态分布，用t检验。所得胃内容量（mL）/体重（kg）标化用均数±标准差表示，进行F、t检验。取P<0.05。抑郁反应指数及脑组织5-HT含量之间相关性用直线回归分析。2结果82.1大鼠进食量测定结果显示实验前，实验后第1d、第3d均未见明显差异，仅第2d表现出有明显差异。并且在进食过程中，所有大鼠均表现为投食后立即进食，无厌食现象。（见表1）表1实验前后大鼠进食量对比2.2所有实验组开始刺激

8、时大鼠均产生惊叫，跳跃，排便等应激反应，60min后，出现哀叫并对刺激表现为不再逃避。刺激3d以后逃避成功次数明显低于对照组（见表2）。表2大鼠抑郁反应积分2.3恒压灌注下胃内容量（见表3）　　2.4.5-羟色胺在大鼠脑