蚕蛾粘液腺及其分泌物的研究

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1、摘要本试验测定并比较了家蚕散卵限性品种(H一9)，家蚕酱通品种(青松x皓月)，柞蚕品种(克青)及柳蚕卵表面胶着物质的含量。对家蚕散卵限性品种(H一9)、家蚕普通品种(青松x皓月)、柞蚕、柳蚕等不同品种蚕雌蛾粘液腺的形状与大小进行了对比，试图阐明彼此问产生差异的原因。为了进一步了解粘液腺中胶着物质的理化性质，采用SDS-PAGE方法分析鉴定了柞蚕和柳蚕粘液腺胶着物质中的蛋白质组分。并对柞蚕雌蛾粘液腺枝状部横截面进行了切片显微镜观察，以期阐明粘液腺分泌胶着物质的机理并为研究其它生物物种的分泌组织的分泌机理提供参考。此外，为了确定柞蚕雌蛾粘波腺内容物中

2、分子量为56kD蛋白的一级结构，对其进行了纯化以及蛋白质的电泳印迹并尝试测定其蛋白质N一末端氨基酸残基。结果表明：普通家蚕品种卵表面胶着物质的含量约0．037岵／粒，家蚕散卵限性品种的卵表面胶着物质的含量约为0．022mg／卵，少于普通家蚕品种。此外还发现家蚕散卵限性品种与普通家蚕品种相比粘液腺有所退化，粘液腺的重量较轻且形状也有所不同，分泌的胶着物质量较少，这可能是二者产生差异的主要原因。而柞蚕和柳蚕卵表面的胶着物质含量约为1．01rag／粒和1．1-g／粒，约是普通家蚕品种卵的30倍。就卵的大小和表面积而言，柳蚕比家蚕大的多，与柞蚕相当。柞蚕

3、和柳蚕的黏液腺枝狡部呈缩长管状结构，而家蚕的枝状部分枝较多，且柞蚕和柳蚕的干状部比家蚕的于状部发达的多。柞蚕的粘液腺干状部长度平均约1．8cm，柳蚕的约2c．m，而家蚕的粘液腺千状部长度平均约0．9cm。通过对柞蚕和柳蚕雌蛾粘液腺内容物的sDS—PAGE分析，结果表明：柞蚕雌蛾粘液腺分泌的胶着物质经电泳分析后，凝胶中出现了7种主要的蛋白质谱带，其分子量分别为76kD，72kD，56I【D，30kD，26kD，24kD，14kD。柳蚕的也为7条谱带，分子蹙分别为114kD，92kD，78kD，53kD，50kD，23kD，12kD。相对而言，家蚕雌

4、蛾粘液腺分泌的胶着物质中含有的蛋白质种类(76kD，68kD，52kD，48kD，39kD，26．5kD，20．2kD，18kD，9．9kD)较多且分子重偏小一些。柞蚕雌蛾粘液腺枝状部横截面显微观察结果显示：粘液腺枝状部横截面呈圆形或近圆形，腺细胞呈圆锥形，放射排列，中部为腺腔，在细胞内可以隐约看到分泌颗粒。而整体的横截面结构比家蚕的大得多。本实验通过SDS-PAGE方法纯化了56kD蛋白质，并采用电泳印迹将其转移至PVDF膜上，由北京奥科生物技术有限公司在国外代理测序。关键词：散卵限性品种粘液腺胶着物质蛋白质印迹ⅡAbstractThispap

5、ermainlydetemmlesthecont舳tofadhesiveproteinsadheredtotheeggsofBombyxmoriandtimlooseeggssex-limitedraee(H-9)andcomparisonsofshapeandsizeofcone矧8lgI柚dsbe啊蝴differentspecies(Qingsong“Haoyue，H-9，5B)a糟carricdon．Atthes珊etime,theproteinof56kD吣separated，purifiedandthesequenceoftheN-te

6、rminalaminoweTecarriedout，TheresultsshowthattheconmntsofadhesiveproteinsadheredtotheeggsofBombyxmori(H·∞isabout0．022mg／egg,whichislessthanthenormalspeeies(Qingsong。Haoyue)．AnthereapernyiandActiasseleneHubnerwhicharerespecfly0．037mg／e991．01rag／eggand1．1mg／egg．Inaddition，wefind

7、thecolleterialglandsinthelooseeggssex-limitediaog0-1-9，5B)aresmallerandlighterthanthenormalandthecontentofitssecretionislittle．Sothereexiststhetrendofdegradationin．thecolleterialgI舳dsofdeferemspeciesinBombyxmori．JudgingfromthecomlⅪLrisonbetweenBombyxmori,AnthereapernyiandActi

8、asseleneHubner,theglandofAnthempernyiisbiggerthantheothers．Thelength