骨髓间充质干细胞移植修复溃疡性结肠炎的实验研究

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1、重庆医科大学硕士研究生学位论文符号说明英文缩写英文全称中文全称MSCsmesenchymalstemcells间充质干细胞BMSCsbonemarrowmesenchymalstemcells骨髓间充质干细胞UCulcerativecolitis溃疡性结肠炎TNBS2．4．6-tfinitrobenzenesulfonicacid2,4，昏三硝基苯磺酸HCTHoechst33342烟酸己可碱33342FBSfetalbovineserum胎牛血清FITCfluoresceinisothiocyanate异硫氰酸荧光素PEPhycoerythrin藻红蛋白ED

2、TAEthlenediaminetetra-aceticacid乙二胺四乙酸MTr竺耋曼：竺lmyl粤警。1z)r1)2，5-diphenyltel【n12D11啪bromide二甲基噻唑二苯基四氮唑溴盐’FCMFlowcytometer流式细胞仪EGFEpidermalgrowthfactor表皮生长因子SPStreptavidin-peroxidase过氧化物酶标记链霉卵白素DMSODimethylesulfoxide二甲基亚砜HEHematoxylinandEosin苏木素．伊红PBSPhosphatebufferedsaline磷酸盐缓冲液PFAPa

3、raformaldehyde多聚甲醛DMEM．FlDulbecco’smodifiedEagle’SDulbecco’S改良培养基2medium／F12．Ham’sDAB3,3一diaminobenzidine3,3一二氨基联苯胺重庆医科大学硕士研究生学位论文TNF．aIL．10TumornecrosisfactorQInterleukin10min／h／d／wminute／hour／day／week肿瘤坏死因子a白介素lO分钟／d,时／天／周ng／pg／mgnanogram／microgram／milligram纳克／微克／毫克印mlal／mlIODAIO

4、Droundsperminutemicroliter／milliliterintegratedopticaldensity每分钟转速微升／毫升积分光密度areaintegratedopticaldensity面积积分光密度2重庆医科大学研究生学位论文独创性声明本人申明所呈交的论文是我本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得重庆医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料，与我同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢

5、意．申请学位论文与资料若有不实之处，本人承担一切相关责任．学位论文作者签名：塑丝日期：丝墨乏笸学位论文版权使用授权书本人完全了解重庆医科大学有关保护知识产权的规定，即：研究生在攻读学位期间论文工作的知识产权单位属重庆医科大学．本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位为重庆医科大学．学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。学校可以公布学位论文的全部或部分内容(保密内容除外)，可以采用影印、缩印或其他手段保存论文．论文作者签名：指导教师签名：日期：重庆医科大学硕士研究生学位论文骨髓间充质干细胞移植修复溃疡性

6、结肠炎的实验研究摘要目的骨髓间充质干细胞(Bonemarrowmesenchymalstemcells，BMSCs)具有高度增殖、自我更新能力，可向三个胚层的细胞分化【¨，在机体组织损伤修复过程及细胞移植治疗等多个领域有广阔的应用前景。目前已有干细胞移植成功治疗炎症性肠病的报道[21，但其在消化道分布定位情况及治疗机制仍不明确。本实验拟①制作、比较大鼠溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis，UC)模型；②分离、培养、扩增、荧光标记大鼠BMSCs，观察其生物学特性：⑧观察标记的同种异体BMSCs经静脉移植后不同时间在UC及正常大鼠主要器官、消化道各段

7、的分布情况：结肠内BMSCs是否明显多于消化道其余各段?溃疡病灶处BMSCs是否明显多于非溃疡部位?移植BMSCs后是否结肠病变修复优于非移植组?EGF能否促进BMSCs向溃疡部位迁移?为BMSCs在消化管组织工程以及肠黏膜损伤性疾病治疗研究中的应用，提供基础理论和实验依据。第一部分溃疡性结肠炎大鼠模型的建立与比较1材料与方法SD大鼠64只，随机分为：I组(免疫+TNBS／乙醇)和II组(TNBS／乙醇)各24只，ⅡI组(乙醇)12只，Ⅳ组(生理盐水)4只。参照文献制作模型，于造模后第l、21天，第8周、12周处死大鼠，剖取全重庆医科大学硕士研究生学位论文部

8、结肠及回肠末段观察：①大体形态及结肠黏膜损伤情况；②