蛹虫草中虫草素分离纯化工艺研究进展

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1、维普资讯http://www.cqvip.com二O0六年六月重庆中草药研究第1期(总第53期)51蛹虫草中虫草素分离纯化工艺研究进展李刚。朱华李毛先兵王贵学(1.重庆市中药研究院2.重庆大学生物工程学院)摘要:本文介绍了蛹虫草和虫草素的性状功效以及检测和提取工艺,主要综述了虫草素的分离纯化工艺的研究进展。离子交换树脂法是目前分离纯化虫草素的常用方法,超临界c0:萃取在分离蛹虫草中核苷类成分方面也取得了进展,并提出大孔吸附树脂技术可能会成为虫草素分离纯化新的手段。关键词:蛹虫草虫草素分离纯化离子交换树脂超临

2、界c0:萃取1简介Ortiz等n通过组合化学筛选方法证实虫草素有蛹虫草【Cordycepsm21ilahs(L.exFr)Link】,抗疱疹病毒作用;李廷宝等报道虫草素可抑制又称蛹草、北虫草、北冬虫夏草,与冬虫夏草同一种脑炎病毒;此外它对人体免疫缺陷型病毒属异种,属于子囊菌类的麦角菌目麦角菌科虫一I型的侵染及其反转录酶的活性亦有抑草属真菌【】】。分布世界各地,在我国的吉林、河制作用。北、四川、湖南、湖北、山西等省均有生长。民间2.2抗肿瘤作用用于肺炎、肾虚、腰痛等疾病的治疗。1951年,虫草素对小鼠艾氏腹水

3、癌和人鼻咽癌KBCunin锄等观察到被蛹虫草寄生的昆虫组细胞、人表皮样疣、人宫颈癌Hela细胞和肺癌织不易腐烂,随后从中分离到一种腺苷类活性Lewis细胞均有明显的抑制作用⋯。Koc等⋯研物质,命名为虫草素(cordycepin),又称虫草菌究表明虫草素对TdT—positive白血病细胞有特素,确定其结构式为3’一脱氧腺苷。虫草素是异的细胞毒作用。据McCafrey研究小组报道第一个从真菌中分离出来的核苷类抗菌素,其。虫草素用于治疗白血病已进入Ⅱ期临床实分子式为C。。3N3,分子量为251D,熔点验。Ya

4、mkaguchi等⋯曾用虫草素同时处理癌细230—231℃,溶于水、热乙醇和甲醇,不溶于苯、胞和正常细胞,结果发现癌细胞分裂抑制率达乙醚和氯仿,紫外光的最大吸收波长为259nm到55%,而正常细胞分裂抑制率为1.5%,表明131虫草素虽对人体有一定的副作用,但这种副作。2虫草素的生物活性用可能比较小。2.1抗茵抗病毒作用2.3免疫调节作用Zhou等n报道虫草素通过诱导产生白介Cuningham等“首先报道虫草素对45株枯素一10,同时抑制白介素一2的生成,表明其具草杆菌有抑制作用。郑藻杰等B还观察到,虫有较

5、强的免疫调节功能。虫草素还可抑制细胞草素能抑制链球菌、鼻疽杆菌、炭疽杆菌、猪分裂,促进细胞的分化,改变细胞膜上物质结构出血性败血症杆菌及葡萄球菌等病原菌的生分布,对T淋巴细胞转化有促进作用;此外虫草长。Sugar等在感染侵入型念珠菌病菌(Invasivecandidiasis)的鼠模型中,虫草素具素还能提高机体单核巨噬细胞系统的吞噬功能,激活巨噬细胞产生细胞毒素直接杀伤癌细有非常强的抗真菌活性。此外,虫草素对石膏胞n引。样小芽孢癣菌、羊毛状小芽孢癣菌及须疮癣菌等皮肤致病性真菌亦有抑制作用。DeJulian—

6、2.4其他作用维普资讯http://www.cqvip.com52第1期(总第53期)重庆中草药研究二O0六年六月据丁奉平等n报道虫草素能刺激糖酵解0.01M磷酸二氢钾=15:85。检测波长导致ATP合成增加,增强肝脏功能和肌肉中254nm。标准虫草素作内标或对照标准曲线。CPK的活性,对由激素失调引起的性功能损伤测定结果表明,虫草头孢霉、棒束孢菌丝体和有修复作用,能明显增加犬冠脉血流量,降低冠冬虫夏草的虫草素含量分别为0.0064%、脉、脑及外围血管阻力;此外,Kim等n报道虫0.025%和0.0067%

7、。草素具有显著的杀虫活性,可能成为防治3.3一l{口PI£联用法:Plutellaxylostella的有效手段。国内已有人综合HPLC与ⅡcS的优点,3虫草素的检测方法将两者结合起来,对蛹虫草与冬虫夏草的虫草3.1薄层色谱扫描法(,II』=S):素含量进行定性定量测定。贡成良等n。】用石油薄层色谱扫描法(TLCS)具有展开时间短,醚将蚕蛹虫草和冬虫夏草的子实体脱脂后,乙显色方便且价格较便宜的特点,已成为定性定醇提取72h,GF254板层析,展开剂为氯仿:量分析的有效手段。刘静明等n将蛹虫草菌丝甲醇=2o:

8、5,254nm定位,薄层扫描分析。和冬虫夏草样品各2.0g(4O目)置50mL圆底烧再将样品的乙醇提取液进行I-IPLC定量分析,瓶中,加20%乙醇溶液4OraL回流提取5h,趁层析柱为ODS反相柱,流动相为水一甲醇一热抽滤,20%乙醇洗3次,合并滤液,浓缩至四氢呋喃,检测波长254nm。测得蚕蛹虫草和2mL,拌以硅胶H1.5g,室温干燥,干法装柱,冬虫夏草子实体中虫草素含量分别为0.3089%90%乙醇洗至80

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