复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶的制备、表征及其生物效能

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1、暨南大学硕士学位论文题名（中英对照）：复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶的制备、表征及其生物效能Preparation,characterizationandbiologicalefficacyofthecompoundMusselProteinMefp-5Hydrogel作者姓名：邓德钧指导教师姓名：李志忠及学位、职称：博士、教授、主任医师学科、专业名称：骨外科研究方向：骨缺损及骨修复论文提交日期：2018年4月论文答辩日期：2018年6月答辩委员会主席：论文评阅人：学位授予单位和日期：I暨南大学硕士学位论文II暨南大学硕士学位论文中文摘要目的：制备浓度配比最

2、优的复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶，并研究其生物相容性；探讨复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶促骨修复的作用效果及机制。方法：采用基因工程方法制备出贻贝蛋白Mefp-5，以Mefp-5为载负药物，以透明质酸钠水凝胶为载体，采用物理交联的方法制备复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶。扫描电镜观察复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶结构、测定体外降解率等方法，研究不同浓度配比复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶表征情况，制备出最优的复合水凝胶。体外细胞培养观察细胞形貌，检测OD值和碱性磷酸酶（ALP）活性，研究各材料生物相容性。制作96例小鼠股骨下端骨缺损模型，随机将96只实验小鼠分

3、组为16组，每组6只小鼠，分别在特定时间将小鼠猝死，采集标本，对各组标本行MricoCT检查、HE染色、Masson染色，经数据分析、组织学评估各材料对骨缺损的治疗效果。结果：不同浓度配比的复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶内部存在直径不一孔隙，表面凹凸不平，且随浓度增加，表面凹凸不平越严重。不同浓度配比的复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶体外降解率，差异具有统计学意义(P<0.05)，而10mg/ml复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶更符合小鼠骨修复周期，被选为研究对象。体外细胞培养，显示细胞形态正常、未出现大面积死亡，且Mefp-5组、Mefp-5-HA组OD值、碱

4、性磷酸酶（ALP）活性明显增高，差异具有统计学意义(P<0.05)。动物实验的MricoCT数据分析显示：Mefp-5组、Mefp-5-HA组BMD增加明显，差异具有统计学意义(P<0.01)。Mefp-5组、Mefp-5-HA组骨修复时间缩短，差异具有统计学意义(P<0.001)。HE染色、Masson染色显示：Mefp-5组、Mefp-5-HA组成骨细胞聚集、骨基质分泌较多，可见多量的胶原纤维形成。结论：（1）10mg/ml复合贻贝蛋白Mefp-5水凝胶的浓度配比最优。（2）实验组材料具有良好的细胞相容性、能促进MC3T3-E1细胞增殖、分化。(3)小鼠

5、股骨干骺端骨缺损模型制作方法简单、创伤小、重复性好，是理想的、简便的小鼠股骨缺损模型制备方法。(4)Mefp-5、Mefp-5-HA能促进骨修复。关键词：骨缺损、骨修复、贻贝蛋白、水凝胶、生物相容性III暨南大学硕士学位论文AbstractObjective:TopreparethecompoundMusselProteinMefp-5HydrogelwithOptimalconcentrationratioandtostudytheirbiocompatibility.Toinvestigatetheeffectandmechanismofthecompo

6、undMusselProteinMefp-5Hydrogelonbonerepair.Methods:ThemusselproteinMefp-5waspreparedbygeneticengineering.thecompoundMusselProteinMefp-5HydrogelwaspreparedbyphysicalcrosslinkingusingMefp-5asanegativedrugandsodiumhyaluronatehydrogelascarrier.Scanningelectronmicroscopy(SEM)wasusedtoob

7、servethestructureofthecompoundMusselProteinMefp-5Hydrogelanddeterminationofdegradationrateinvitro.ThecharacterizationofthecompoundMusselProteinMefp-5Hydrogelwithdifferentconcentrationratioswasstudied,andthebestthecompoundMusselProteinMefp-5Hydrogelwereprepared.Thebiocompatibilityof

8、thematerialswasstudiedbyin