独活对柑桔贮藏病害的抑制作用研究

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1、西南大学硕士学位论文独活对柑桔贮藏病害的抑制作用研究姓名：贺磊申请学位级别：硕士专业：果树学指导教师：雷慧德;胡军华20100601摘要独活对柑桔贮藏病害的抑制作用研究果树学硕士研究生指导教师雷慧德胡军华摘要贺磊副研究员柑桔是世界上第一大水果，其贮藏运输过程中因侵染性病害极易造成果实腐烂，目前化学合成的保鲜剂虽然能够达到防腐保鲜的目的，但是对人体健康有不利影响，甚至出现致癌、致畸、致突变等情况。因此从植物中寻找抑菌活性物质以开发新型的杀菌剂成为目前杀菌剂研究领域的一个热点。本文针对独活等51种植物，对其提取物的抑菌活性，活性物质的提取分离、结构鉴定，及

2、其抑菌机理等进行了一系列研究，对植物源杀菌剂的开发具有一定的参考价值。论文具体研究结果如下：1．以乙醇作为溶剂，采用超声波提取法，对植物进行提取，通过菌丝生长速率法，测定了51种植物对4种柑桔贮藏病害病原菌的抑制活性，筛选出抑菌活性较高的独活、五加皮、藁本、川芎等7种植物。其中独活乙醇提取物对柑桔青霉、绿霉、炭疽、酸腐病菌的抑制活性均较好，在质量浓度为5mg／mL时，抑制率分别为84．97％、82．5％、98．92％、94．38％。在柑桔贮藏病害药效试验中，独活乙醇提取物对柑桔青、绿霉病的防治效果在35％以上，对柑桔炭疽病防治效果达到了80％，总防效达

3、到了70％。2．通过不同溶剂萃取，从独活乙醇提取物中分离得到A、B、C、D、E5个组分，其中B组分对柑桔炭疽菌的抑制率最好，抑制率为95．38％(1mg／mL)。通过柱层析法从B组分中又分离出6个组分，在浓度为0．5mg／mL时，B2组分对柑桔炭疽菌的抑制效果为83．15％，EC50为0．1452mg／mL。GC—MS分析，发现了异佛手柑内酯(Isobergapteo)、茴芹内酯(Pimpinellin)、牛防风素(Sphondm)、异茴芹内酯(Isopimpinellin)4种呋喃香豆素类物质，推测独活乙醇提取物的高效活性物质就是这几种呋喃香豆素类物

4、质。3．显微观察，发现独活乙醇提取物可造成病原菌菌丝粗细不均，细胞壁表面粗糙，分隔间距拉长或缩短，液泡变大、减少或变小、增多，菌丝分支增多，分支处出现扭曲，畸变等现象。4．独活乙醇提取物对柑桔绿霉和炭疽菌的4种酶活性的影响试验结果表明，发现独活乙醇提取物对柑桔炭疽菌的漆酶、愈创木酚氧化酶、邻苯二酚氧化酶的活性有较大影响，对纤两南大学硕十学伊论文维素酶的活性影响不大，推测独活乙醇提取物阻断了炭疽菌的木质素代谢途径，而对纤维素酶代谢途径无作用。独活乙醇提取物对柑桔绿霉菌的邻苯二酚氧化酶和纤维素酶的活性有较大影响，对漆酶、愈创木酚氧化酶的活性影响不大，说明独

5、活乙醇提取物对柑桔绿霉菌的纤维素代谢起作用，对木质素代谢过程需要进一步研究。独活乙醇提取物对这2种病原菌的抑制机理是有差异的。5．SDS．PAGE分析发现，独活乙醇提取物影响了绿霉蛋白质代谢。在独活的作用下，出现了几条不同的蛋白质条带，消失了R3和R11条带。推测独活的乙醇提取物可造成部分蛋白质的分解，而这些蛋白的降解与纤维素的活性有关。关键词：独活，柑桔贮藏病害，柑桔炭疽，柑桔绿霉，抑菌活性，抑菌机理IlAbstractResearchonBiserataeagainstCitrusStoragePathogensMaior：Pomol093'Can

6、didate：HeLeiAdivisors：AssociateProf．LeiHui．DeAssociateProf．HUJun．HuaAbstractCitrus，asoneofthemostimportantfruitsintheworld，iseasytofallintodecayduringstorageandtransportationforthereasonofdiseaseinfections，whichcausedconsiderableeconomiclosses．Toresolvethesetroubles，manychemosyn

7、theticantistalingagentswereused．However,theseagentswereusuallyharmfultopeople’Shealth．Therefore，findingantibacterialsubstancesfromtheplantsisbecomingahotpoint．Inthispaper,aserialresearchesincludingextracts’antibacterialactivity，extractingandstructureidentificationofactivemateria

8、landthetheoryonantibacterialwerecarriedoutonBis