醋化醋杆菌产乙醇脱氢酶发酵培养基的优化

《醋化醋杆菌产乙醇脱氢酶发酵培养基的优化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、生物工程粮油食品科技第22卷2014年第1期醋化醋杆菌产乙醇脱氢酶发酵培养基的优化王陶，李文，陈亚庆(徐州工程学院江苏省食品资源开发与质量安全重点建设实验室，江苏徐州221008)摘要:采用单因素及正交试验对醋化醋杆菌产乙醇脱氢酶的发酵培养基进行优化，以期提高菌株产乙醇脱氢酶的水平。结果表明，培养基最优配方为:葡萄糖1%，酵母浸膏2%，乙醇3%，MgSO40．05%，KH2PO40．45%。在此优化条件下，菌株培养3d产酶达到最大，为0．423U/mL。关键词:正交;优化;醋化醋杆菌;乙醇脱氢酶;培

2、养基中图分类号:Q93－335文献标识码:A文章编号:1007－7561(2014)01－0104－05OptimizationoffermentationmediumforalcoholdehydrogenasefromacetobacteracetiWANGTao，LIWen，CHENYa－qing(KeyLaboratoryofFoodＲesourcedevelopmentandQualitySafetyofJiangsuProvince，XuzhouInstituteofTechnology

3、，XuzhouJiangsu221008)Abstract:Thefermentationmediumofalcoholdehydrogenaseproducedfromacetobacteracetiwasopti-mizedbysinglefactorexperimentsandorthogonalexperimentstoincreasethestrains’activityofprodu-cingalcoholdehydrogenase．Theresultsshowedthattheopti

4、malformulawasglucose1%，yeastextract2%，ethanol3%，MgSO40．05%，KH2PO40．45%．Undertheabovecondition，theenzymeactivitywas0．423U/mLafterfermentationfor3days．Keywords:orthogonal;optimization;acetobacteraceti;alcoholdehydrogenase;culturemedium［10－14］乙醇脱氢酶(Alcoho

5、ldehydrogenase，ADH)是一具有广阔的市场前景。醋化醋杆菌的细胞膜类分布广泛的含锌金属酶，属氧化还原酶第一亚类，中存在乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶，在醋酸发酵中，菌++作用于－CHOH基团，能以NAD、NADP或PQQ体即通过能够将乙醇氧化为乙醛的乙醇脱氢酶和将［15］为辅酶，催化伯醇和醛之间的可逆反应，为胞内乙醛再氧化成醋酸的乙醛脱氢酶实现食醋酿造。［1－3］酶。在哺乳动物体内ADH和ALDH(乙醛脱氢通过优化醋化醋杆菌发酵培养基可有效提高ADH酶)构成了乙醇代谢的主要氧化通道，是体内乙醇

6、产量，目前尚未见利用正交试验优化醋化醋杆菌产代谢的主要限速因素。前者使乙醇转化为乙醛，后酶培养基的相关报道。本研究以徐州恒顺万通食品者使乙醛进一步转化为乙酸［4－8］。由此可见，ADH酿造有限公司醋醅中分离筛选得到的醋化醋杆菌为是乙醇在人体内代谢的必需酶，在解酒及防止乙醇对象，采用单因素实验和正交试验优化其产酶培养引起的肝损伤方面具有重要意义［9］。基，使其产酶量提高，为拓宽ADH的来源、降低ADH的生产成本提供新的途径。ADH已广泛应用于化工、医药、食品等工业领域，目前商品ADH多来源于动物肝脏，

7、提取纯化工艺比较成熟，但其资源有限且价格昂贵，远远不能满1材料与方法足市场的需要，而微生物发酵的生产周期较短，培养1．1菌种基价格低廉，酶制剂可以实现大规模、低成本工业化高产醋化醋杆菌(Acetobacteraceti)，分离自徐生产，因此从微生物细胞中提取ADH并制成酶制剂州恒顺万通食品酿造有限公司的醋醅。1．2培养基收稿日期:2013－07－09基金项目:国家自然科学基金(81273004);江苏省高校自然科学研究1．2．1斜面保藏培养基面上项目(10KJD180006);徐州工程学院科研基金培

8、育课题(XKY2010112);徐州工程学院科研基金青年课题葡萄糖1%，酵母膏1%，pH4．5，琼脂2%，(XKY2012313)作者简介:王陶，1976年出生，男，副教授．CaCO31%，121℃灭菌20min，待其冷却后加入104粮油食品科技第22卷2014年第1期生物工程3%(v/v)无水乙醇。胨、硝酸铵、硫酸铵对发酵产ADH酶活以及生物量1．2．2种子液培养基的影响，确定最适氮源。葡萄糖1%，酵母膏1%，无水乙醇3%，pH4．5。1．6．4氮源浓度的优化1．2