细胞生物学-细胞周期pa

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1、细胞增殖及其调控王铁东细胞周期概述◆细胞周期的概念（conceptofcellcycle）：指从一次细胞分裂结束开始，到下一次细胞分裂结束所经历的整个过程。分为：间期（物质积累期或静止期）和细胞分裂期。◆细胞周期时相组成：G1SG2M细胞周期时相及类型间期(interphase)◆G1期,即从M期结束到S期开始前的一段间歇期;◆S期,即DNA合成期;◆G2期,即S期到有丝分裂前的一个间歇期;M期,即有丝分裂期。标准的细胞周期Atypicalmammaliancellhasacellcycletimeof24hours,with

2、12hrG1,6-8hrS,3-4hrG2,and1hrMSomeeukaryoticcellcycletimes同种细胞之间，细胞周期时间长短相似或相同；不同细胞种类之间，细胞周期时间长短常差别很大。TCTG1TSTG2TMTC-TG1小鼠食道上皮87757.24.10.712小鼠腹壁上皮1511396.25.30.512人大肠粘膜241011.520.514人宫颈癌2086.84.51.512人羊膜19.49.86.82.20.69.6大鼠肝47.528161.81.715.5人肺成纤维细胞16.86640.810.8不同

3、细胞的周期时相差别很大：细胞时相(小时)就高等生物体的细胞而言，细胞周期时间长短主要差别在G1期，而S期、G2期和M期的总时间相对恒定。尤其是M期持续的时间更为恒定，常常仅持续半小时左右。①周期中细胞（cyclingcell）：是指在细胞周期中连续运转的细胞，又称为连续分裂细胞或可育细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。②终末分化细胞：指不可逆地脱离细胞周期，丧失分裂能力，保持生理机能活动的细胞，又称终端细胞，大量的横纹肌细胞，血液多型核白细胞，某些生物的有核红细胞等。在多细胞机体中,细胞的分裂行为有所差异。根据细胞的分裂行为

4、,可将真核生物细胞分为三类:指的是暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，去执行一定的生物学功能，但在适当的刺激下可重新进入细胞周期的细胞，又称为G0期细胞或休眠细胞，如淋巴细胞、肝等。③静止期细胞（quiescentcell）周期中细胞转化为G0期细胞多发生在G1期。G1期：与DNA合成启动相关，开始合成细胞生长所需要的多种蛋白质、RNA但不合成DNA。同时染色质去凝集。S期:DNA,HistonesG2期：DNA复制完成，在G2期合成一定数量的蛋白质和RNA分子细胞周期中各个不同时期及其主要事件细胞周期的检验点(checkpoin

5、t)细胞要分裂，必须正确复制DNA和达到一定的体积，在获得足够物质支持分裂以前，细胞不可能进行分裂。细胞周期的运行，是在一系列称为检验点的严格检控下进行的，这些检验点严格地监视着细胞周期事件的发生、发展过程是否严格按程序进行。Three“checkpoints”inthecycleG0细胞周期同步化概念：细胞同步化是指在自然过程中发生的，或经人为处理造成的细胞周期的同步化。类型：自然同步化人工同步化：选择同步化：有丝分裂选择法细胞沉降分离法诱导同步化：DNA合成阻断法中期阻断法某些水生动物的受精卵：如海胆卵可以同时授精，最初的

6、3次细胞分裂是同步的。增殖抑制解除后的同步分裂：如真菌的休眠孢子移入适宜环境后，它们一起发芽，同步分裂。1、自然同步化概念：自然界存在的细胞周期同步过程，称为自然同步化。EarlyembryoinmostinvertebratesandafewvertebratesFruitflyembryo人工选择同步化有些种类的细胞，如裂殖酵母，不同时期的细胞在体积和重量上差别显著，可以采用密度梯度离心方法分离出处于不同时期的细胞。优点:方法简单省时，效率高，成本低。缺点:对大多数种类的细胞并不适用。是指人为地将处于不同时期的细胞分离开来

7、，从而获得不同时期的细胞群体。密度梯度离心法：有丝分裂选择法：M期细胞与培养皿的附着性低，振荡脱离器壁收集。优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%）,成本高。细胞同步化可以通过人工诱导而获得，即通过药物诱导，使细胞同步化在细胞周期中某个特定时期。人工诱导细胞同步化DNA合成阻断法采用低毒或无毒的DNA合成抑制剂特异地抑制DNA合成，而不影响处于其它时期的细胞进行细胞周期运转，从而将被抑制的细胞抑制在DNA合成期的实验方法。常用胸腺嘧啶脱氧核苷掺入(TdR)双阻断法：高浓

8、度的胸腺嘧啶能够阻断DNA合成所需的核苷酸的合成,在细胞处于对数生长期的培养基中加入过量TdR。S期细胞被抑制，停在G1/S交界处。移去TdR，释放时间大于TS时，再次加入过量TdR。此方法的优点是同步化效率高，几乎适合于所有体外培养的细胞体系。分裂中期阻断法：秋水仙素可抑制