转录中介体复合物Mediator亚基Med23在干细胞分化与神经早期发育中的功能研究

《转录中介体复合物Mediator亚基Med23在干细胞分化与神经早期发育中的功能研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、密级：中国科学院大学UniversityofChineseAcademyofSciences博士学位论文作者姓名：筮夏渠指导教师：王绳巫宜员学位类别：理堂监±学科专业：生塑化堂生盆王生物堂2013年02月TheRolesofMediatorMED23inSternnessandNeuralDifferentiationofEmbryonicStemCellsBy【WanquZhu】ADissertationSubmittedtoUniversityofChineseAcademyofSciencesInpartialfulfillme

2、ntoftherequirementDoctorofNatureScienceInstituteofBiochemistryandCellBiologyShanghaiInstitutesforBiologicalSciencesChineseAcademyofSciencesFeb，2013中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所博士学位论文摘要研究参与调控胚胎干细胞早期分化的分子机制对神经发育和基于细胞的治疗有重要意义。先前的研究表明，胚胎干细胞神经分化的命运决定是一种“default”模式，当不存在外源信号影响时，胚胎干细

3、胞直接向神经分化并转变成神经前体细胞。然而，目前对调控“default"神经途径的细胞内在机制的了解还很不够。我们研究发现，转录中介体复合物亚基Med23作为连接信号通路和PolI

4、的桥梁，参与调控胚胎干细胞神经分化。本研究就Med23在干细胞自我更新及分化中的功能进行了深入探索。通过大量研究发现，Med23缺失的胚胎干细胞仍具有自我更新和全能性特征；自发分化实验发现Med23缺失导致胚胎干细胞向神经外胚层分化能力增强；两种神经定向分化实验(N2827单层培养和无血清悬浮培养(SFEB))证实，Med23缺失促进胚胎干细胞向神经分化。

5、此外，在R1小鼠胚胎干细胞中RNA干扰Med23的表达也增强其向神经分化，而干扰Medl、Medl5并不影响神经分化。机制上，在胚胎干细胞向神经分化过程中，Med23缺失导致Bmp4表达下调并降低BMP／Smad通路活性。在模式生物斑马鱼中，研究也表明，Med23缺失导致早期神经发育增强，且可被Bmp4明显逆转。本研究为理解干细胞早期神经分化的分子机理提供了新的见解，为神经系统疾病的细胞治疗提供了新的策略。关键诃：转录中介体，Med23，BMP／Smad，神经分化中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所博士学位论文II英文摘要A

6、bstractUnderstandingthemechanismsunderlyingearlydifferentiationstageofESCsiscriticaltoneuraldevelopmentandcell-basedtherapies．Previousstudieshavedemonstratedthatneuralfateacquisitioniscontrolledby“default⋯mechanism．However,whetherthereisacell—intrinsicmechanismtoregulat

7、ethe11defaultHneuralpathwayispoorlyunderstood．MediatorMed23，asubunitoftheMediatorcomplexthatconnectsvarioussignalingpathwaystothePollImachinery,participatesinthisprocess．HereweinvestigatedthefunctionalrolesofMediatorMed23inpluripotencyandlineagecommitmentofembryonicstem

8、cells(ESCs)．Geneprofile，markeranalysis，aswellasembryoidbodyandteratomaformationassays，revealedthatthepluripotencyofESCsislargelyunchangedbyMed23一depletion．However,inspontaneousdifferentiationculture，Med23’／1ESCsdisplayedenhancedneuroectodermspecification．Moreover，Twodis

9、tinctmethodsofneuraldifferentiation，adherentmonolayerandserum—freesuspensionculture，unequivocallydemonstrateth