革兰氏阳性细菌抗生素耐药检测

《革兰氏阳性细菌抗生素耐药检测》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、抗生素耐药的检测和报告（MRSA，VISA，VRSA，VRE，肺炎链球菌）JanetHindler,MCLSMT(ASCP)UCLAMedicalCenterLosAngeles,Californiajhindler@ucla.edu一.MRSA-甲氧西林耐药金葡菌-用苯唑西林或头孢西丁检测mecA介导的苯唑西林耐药金葡菌金葡菌中mecA介导的苯唑西林耐药检测表型试验纸片扩散法或MIC法头孢西丁为替代物报告为苯唑西林的结果,不是头孢西丁苯唑西林苯唑西林-盐平板筛选金葡菌基因或基因产物的检测基因=mecA基因产物=青霉素结合蛋白(PBP)2a金葡菌和路登葡萄球菌的解释标准菌纸片含量抑菌圈(

2、mm)MIC(µg/ml)SIRSIR金葡菌苯唑西林(1µg)≥1311-12≤10≤2-≥4路登葡萄球菌苯唑西林(1µg)---≤2-≥4金葡菌&路登葡萄球菌头孢西丁(30µg)≥22*-≤21**≤4*-≥8***报告为苯唑西林敏感**报告为苯唑西林耐药CLSIM100-S19.Table2C.头孢西丁用于检测金葡菌中mecA介导的苯唑西林耐药在检测mecA介导的耐药上有很高的敏感性和特异性；对于“难检测的MRSA”优于苯唑西林无法测出苯唑西林耐药但mecA阴性的菌株（如边界菌株）什么是“边界MRSA”mecA阴性但苯唑西林的MIC轻微高于“耐药”边界机制：1)-內酰胺酶-苯唑西林

3、MIC升高2)变异的金葡菌-PBP1，2，4改变很少见到在文献中关于这类菌的临床治疗信息有限：可能能用-內酰胺药物治疗一些报告认为患者确实对-內酰胺药物治疗有反应。Chambers.1997.ClinMicrobiolRev.10:781.为什么检测头孢西丁？头孢西丁检测mecA介导的苯唑西林耐药优于苯唑西林并且头孢西丁纸片扩散法更容易判读。头孢西丁需报告吗？不，头孢西丁只是苯唑西林的替代物，仅报告苯唑西林常规检测金葡菌时需要同时测定头孢西丁和苯唑西林吗？由于非mecA介导的苯唑西林耐药在金葡菌中很少见，因此常规只需检测头孢西丁。问题&回答金葡菌和头孢西丁二.青霉素敏感的葡萄球菌-诱

4、导的-内酰胺酶试验葡萄球菌-青霉素当青霉素的敏感性为以下情况时，报告葡萄球菌青霉素敏感之前需进行诱导性-內酰胺酶检测MIC≤0.12µg/ml抑菌圈≥29mmCLSIM100-S19.Table2C.SRSR诱导性-內酰胺酶试验苯唑西林（诱导剂）将菌株传种于琼脂上（如BAP,MHA）Dropß-lactamdisk(e.g.,oxacillin,cefoxitin)将-內酰胺药物纸片贴于菌膜上（如苯唑西林，头孢西丁）孵育过夜检测抑菌圈周边的菌苔假如-內酰胺酶阳性（诱导或不诱导），均报告青霉素耐药Pos阳性Neg阴性金葡菌青霉素酶的表型试验青霉素MIC(µg/ml)*数量blaZ+

5、0.031700.068150.129923总数19728Kaaseetal.2008.ClinMicrobiolInfect.14:614.197株青霉素MIC为“敏感”的金葡菌*Vitek2blaZ＝金葡菌种编码青霉素酶的基因金葡菌青霉素酶的表型实验(2)(≤28mmzone)纸片扩散法(≤28mm抑菌圈）纸片扩散法(锐利的抑菌圈边缘）诱导性头孢肖噻吩(60min)16/28(57.1)20/28(71.4)11/28(39.3)Kaaseetal.2008.ClinMicrobiolInfect.14:614.*Oxoidnitrocefinstick结论：表型方法不能检测出携带bl

6、aZ的葡萄球菌，这些菌株可能对青霉素治疗无反应。28株blaZ阳性的金葡菌3种表型方法阳性的数量（%）MSSA心内膜炎病人的可能结果（用-内酰胺药物治疗）…Day天青霉素MIC(µg/ml)诱导性头孢肖噻吩β-內酰胺酶试验1blaZPCR10.12SNegPos20.12SNegPos3>2PosPos4>2PosPos1用头孢西丁或苯唑西林诱导后再进行试验重要：在分离出青霉素敏感葡萄球菌后需检测后续菌株以检测在治疗中菌株有否变耐药葡萄球菌-青霉素UCLA方案假如“R”则报告假如“S”则隐藏青霉素结果，添加注释“假如需要青霉素结果请联系实验室”假如需要青霉素结果，则进行：诱导性β-內酰胺

7、酶试验肉汤稀释法MIC（青霉素范围0.015-4µg/ml）检测病人后续菌株与临床医生沟通标本：骨诊断：骨髓炎金葡菌克林霉素≤0.5S红霉素≤0.5S苯唑西林≤0.25S万古霉素≤0.5SMIC(g/ml)“假如需要青霉素结果请联系实验室”FinalReportCase#2三.VISA耐药是由于：增厚的细胞壁美国报告的数量：少于100检测困难；表型不稳定菌落形态不典型金葡菌万古霉素敏感万古霉素中介细胞壁CLSI重测规