培养基的配方

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1、营养琼脂(普通琼脂)成份:牛肉浸液(或其它浸液,消化液或肉膏汤)100毫升琼脂(视天气,琼脂质量而定)制法:将上物加热溶解,补足水,调ph至7.6,过滤分装121℃,高压灭菌15分钟。用途:作普通琼脂平皿。血琼脂平板(BA)制法:取营养琼脂(PH7.6),加热使其溶解待冷至45-50℃,以灭菌操作于每100毫升营养琼脂加灭菌脱纤维羊血或兔血5-10毫升,轻轻摇匀,立即倾注于平板或分装试管,制成斜面备用。用途:1.一般棉拭子均接种此培养基。2.尿液,脓液3.分离细菌标本用。基础培养基(肉膏汤BB)成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克水1000毫升制法:将以上各物称好,加水煮沸溶解,用1NN

2、OH校正PH至7.6,过滤分瓶,121℃高压灭菌,20分钟备用。用途:1作耐药试验,增菌用分装小管。2作普通琼脂斜面。血液培养基(大管肉汤培养基)成份:1新鲜牛肉浸液1000毫升2PABA(对氨基苯甲酸〔相当于10mg/毫升〕)1g%1毫升3MgSO4[相当于0.493/100毫升]49.3%1毫升4枸椽酸钠0.3g制法:1将1号,4号混合液,2号,3号液分装高压灭菌。2取灭菌1,4号混合液用无菌法加入PABA,MgSO4,再分管,行无菌试验三天方可使用。用途:作血,骨髓培养用。肠道杆菌培养基(伊红美兰琼脂)成份:蛋白胨10克乳糖10克氯化钠5克琼脂25(22)克水1000毫升2%伊红溶液

3、20毫升0.5%美兰溶液20毫升制法:将蛋白胨,氯化钠琼脂称好,加水1000毫升使溶解,校正PH7.4过滤,补足失水,加入2%伊红溶液20毫升,0.5%美兰溶液20毫升,(115℃高压20分钟),冷却至50℃左右倾注平板,凝固后存冰箱备用。(高压以后方可再加乳糖)用途:用作分离沙门氏,志贺氏菌属,也作菌群调查。1罗文斯坦培养基成份:磷酸二氢钾2.4克硫酸镁0.24克枸椽酸钠0.6克天门冬素3.6克纯甘油(丙三醇)12毫升水600毫升马铃薯粉30克鸡蛋1000毫升(约3公斤)2%孔雀绿水溶液20毫升制法:1除鸡蛋外(还有孔雀绿)。可将其它物品称好,放入大三角瓶包扎好,高压灭菌。2鸡蛋用75%

4、酒精泡30分钟,灭菌法打蛋,倒入盛有玻璃珠的灭菌三角烧瓶内充分将鸡蛋摇散。3将各成份按比例配好,分装每管约5毫升。4间歇灭菌第一次90℃1小时,第二次80℃半小时,第三次80℃半小时(或放85℃烤箱内连续二次)。质控标准:1灭菌试验合格。2接种结核杆菌要求两星期生长良好。用途:作结核分枝杆菌培养用。结核半固体培养基成份:磷酸氢二钠19克硫酸镁0.6克磷酸二氢钾2.5克天门冬素5克1%孔雀绿1.5克甘油20毫升吐温80(10%)5毫升水1000毫升枸椽酸钠2.5克动物血清100毫升琼脂1.5克(80小时用甲醇去脂)1%孔雀绿0.78毫升吐温80(10%)5毫升加动物血清100毫升制法:1除血

5、清外将上述药品均称好,放入煮沸溶解,调PH7。22分管(每管约10毫升)包扎好,高压,121℃半小时灭菌。3待冷后无菌法加无菌血清(绵羊血或兔血)每管约1毫升备用。4去除琼脂方法:取琼脂若干或于三角烧瓶中加甲醇于琼脂1毫升用塞密封,放37℃温浴80小时,每天摇动一次,冷却后到时取出用滤纸过滤,待琼脂自然冷却后备用。质控标准:1无菌实验合格。2琼脂硬度合适而清亮。3接种标准结核杆菌用,强度合适即可用。用途:培养结核杆菌用。亚碲酸钾血琼脂平板成份:琼脂基础100毫升10%葡萄糖2毫升1%亚碲酸钾4.5毫升绵羊血10毫升制法:1将琼脂基础溶解好,加入羊血。2马上加热使成咖啡色后,稍冷再加入10%

6、葡萄糖2毫升与1%亚碲酸4.5毫升混合后倒入无菌平板,2凝固后存冰箱备用。质控标准:接种白喉杆菌生长良好,其它革兰氏阴性菌均抑制生长。用途:供培养及鉴别白喉杆菌用。米培养基成份:白米20克水1000毫升琼脂20克吐温8010毫升制法:1将20克米加水200毫升煮沸45分钟,煮时将容器盖好。2用纱布过滤,只要米汤,不要饭,加水至1000毫升。3加琼脂20克,吐温-8010毫升煮溶,分装中型管(每管约3毫升),包扎好,高压,121℃半小时,消毒备用。质控标准:1灭菌。2要求清亮。3接种白色念珠菌17-24小时生长良好,并产生厚膜孢子。用途:培养白色念珠菌用。蛋白胨水培养基成份:蛋白胨1克氯化钠

7、0.5克水加至100毫升PH调至7.8制法:把以上各物称好溶于水,调节PH7.6分装消毒备用。质控标准:1放置37℃无菌生长。2接种大肠杆菌24小时生长良好。3可作中国兰平板基础液。可作靛基质基础液(作此试验需要色氨酸蛋白胨)。血培养基成份:蛋白胨10克牛肉膏5克氯化钠5克葡萄糖3克枸椽酸钠3克MgSO4。7H2O20毫升0.5%PABA10毫升酵母浸液10毫升0.2克(2%过滤)*酚红0.4%6毫升水1000毫升琼脂0

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