环境毒理学常用实验方法

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1、环境毒理学常用实验方法急性毒性实验蓄积性毒性实验亚慢性和慢性毒性实验致突变试验致畸试验致癌试验毒理学实验基础实验动物（laboratoryanimal）经人工培育，对其携带微生物实行控制，遗传背景明确，来源清楚，可用于科学研究的动物。温血动物(恒温动物)兔、豚鼠、大鼠、小鼠有时也用猴、狗、猫等实验动物的选择狗小鼠大鼠豚鼠仓鼠实验动物的选择种属的选择个体选择年龄体重性别生理状态健康状况实验动物的选择种属的选择机体反应上尽量近似于人体；易获得、易饲养、易管理；最敏感、最合适；选用几种不同种属的动物(对毒作用不清楚的化学物质)；借助已有毒理学研究资料选择

2、。实验动物的选择借助已有毒理学研究资料选择气体、蒸气对粘膜的刺激作用——猫毒物对皮肤的局部作用——豚鼠或兔(皮肤对刺激物的反应近似于人)过敏性反应——豚鼠(易于致敏)观察致呕吐作用的实验研究——狗、猫外界环境因素引起机体体温过高及体温过低的反应——兔或猫(大鼠、小鼠对于体温调节不稳定)高血压病理——狗、兔、大鼠(易出现血压变化)物质的致癌作用——小鼠和大鼠慢性中毒损害实质性脏器的毒物——小鼠(实质性脏器容易罹患病变)个体选择年龄除特殊要求外，动物年龄一般选用初成年者。性别根据目的，若对动物性别无特殊要求，宜选用雌雄各半。生理状态——怀孕、哺乳通常实验

3、均不宜采用处于特殊生理状态的动物进行，为了某种特定的实验目的除外。健康状况所用动物进入实验室后，于实验开始前应观察一周以上，以删除不健康的动物，并使实验动物适应环境。实验动物的选择常用染毒途径和方式(1）经口灌胃、喂饲、吞咽胶囊（2）经呼吸道动物自行吸收（静式吸入染毒、动式吸入染毒）人工动物气管注入（3）经皮肤（4）其它途径注射途径常用染毒途径和方式(1)经口染毒①灌胃用灌胃器将所应投给动物的药灌到动物胃内；直接灌入胃内，不与口腔及食道接触；给予的化学物剂量准确。②喂饲将化学物溶于无害的溶液中拌入饲料或饮用水中，使动物自行摄入含化学物的饲料或水，然后

4、依每日食入的饲料与水再推算动物实际摄入化学物的剂量。常用染毒途径和方式(1)经口染毒优点：接触化学物的方式符合人类接触污染食物与水的方式，方法简便、易操作。缺点进食时浪费、损失饲料多，摄入的量不准确；如果化学物有异味，动物可能拒食；如果化学物在室温下可以挥发，或在饲料中和水中可以水解，则剂量也不准确；有经呼吸道与皮肤交叉吸收的可能；更适宜进行多日染毒，急性毒性试验一般不用之。(1)经口染毒③吞咽胶囊将所需剂量的受试化学物装入药用胶囊内，强制放到动物的舌后咽部迫使其咽下。此法剂量准确，尤其适用于易挥发、易水解和有异臭的化学物。兔、猫及狗等较大动物可用此

5、法。常用染毒途径和方式（2）经呼吸道染毒凡是气态或易挥发的液态化学物均有经呼吸道吸入的可能，在生产过程中形成气溶胶的化学物也可经呼吸道吸入。类型:动物自行吸收静式吸入染毒动式吸入染毒人工动物气管注入人工动物气管注入——将液态或固态外源化学物注入肺内。这是一个手术过程，仅适用于制造化学物对肺脏损伤模型的制备，而不用于一般毒性研究。常用染毒途径和方式静式吸入染毒在一定容积的染毒柜内加入一定量受试物，造成含一定浓度受试物的空气环境，使受试动物在规定时间内,经吸入而达到染毒，适用于短时间染毒的试验。动式吸入染毒采用机械通风为动力，连续不断地将含有已知浓度受试

6、物的新鲜空气送入染毒柜内，并排出等量的污染气体，使染毒浓度保持相对稳定，这样可使染毒时间不受染毒柜(室)容积的限制，也可避免动物缺氧、CO2积聚、温度增加等对试验结果的可能影响，适用于较长时间以及反复染毒的试验使用。常用染毒途径和方式（3）经皮肤染毒液态、气态和粉尘状外源化学物均有接触皮肤的机会。能经皮肤吸收的化学物主要以扩散方式经过皮肤角质层屏障，在表皮角质细胞的间质中充满非极性的脂类物质。脂溶性化学物主要通过这种途径渗透入皮肤，角质层薄的皮肤部位更易吸收。常用染毒途径和方式实验前详细检查去毛部位皮肤有无擦伤、红肿、皮疹等异常现象，剔除不合格动物。

7、染毒时按单位体重确定给予所需毒剂的容量。接触时间应与人实际接触该物质的时间相仿。常用染毒途径和方式成年动物——年老动物表皮厚度、细胞成分改变为保证不因皮肤部位不同而形成的化学物渗透率差异，一般大鼠、豚鼠、兔均使用背部皮肤。面积则依据选用动物及受试物的剂量和剂型而定。（如家兔可取5cm×6cm、豚鼠取3cm×4cm、大鼠取1.5cm～2.0cm直径的面积，小鼠取1.0cm～1.5cm直径的面积。）（3）经皮肤染毒（4）其它途径染毒有时需对外源化学物进行绝对毒性或比较毒性研究，或进行一些必要的特殊研究(如静脉注射毒物动力学、代谢研究、急救药物筛选等)，往

8、往用注射途径染毒。静脉注射:大鼠、小鼠尾静脉，兔耳缘静脉注射途径肌肉注射皮下注射腹腔注射:小动物常用染毒途径