核仁素表达下调对阿霉素所致乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制和凋亡的影响

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1、中南大学硕士学位论文核仁素表达下调对阿霉素所致乳腺癌MCF-7细胞增殖抑制和凋亡的影响姓名：田晓彩申请学位级别：硕士专业：肿瘤学指导教师：胡春宏;刘先领20080501硕士学位论文中文摘要摘要目的：为探讨核仁素(nucleolin，NU)表达变化对化疗药物阿霉素所致的人乳腺癌细胞MCF一7增殖抑制与凋亡的影响。探讨核仁素在肿瘤细胞增殖以及凋亡过程中的作用及相关机制。以及联合化疗时对细胞的作用改变，为肿瘤治疗提供新的思路。方法：首先用WesternBlotting检测正常培养的MCF-7细胞中核仁素的表达，对比脂质体转染核仁素寡核苷酸后核仁素的表达。用WesternBlotting比较加

2、化疗药物(阿霉素，ADR)干预前后核仁素的表达变化。设定不同的对照组，采用反义寡核苷酸技术抑制MCF-7细胞中核仁素的表达、选择合适的化疗药物浓度和作用时间处理细胞后，用MTT法检测细胞的增殖状况，用流式细胞术检测细胞凋亡。结果：1．将设计的核仁素反义寡核苷酸导入MCF-7细胞，24小时后收集细胞总蛋白，采用免疫印记分析发现，反义寡核苷酸能显著抑制核仁素的表达，而正义寡核苷酸则对核仁素的表达无明显影响。2．取接近IC50的阿霉素作用于MCF-7细胞24小时，收集细胞总蛋白，采用免疫印记分析发现，此浓度的化疗药使细胞内核仁素的表达显著下降。3．核仁素反义寡核苷酸增强了阿霉素对MCF-7细

3、胞增殖抑制和硕士学位论文中文摘要促凋亡作用。与核仁素正义寡核苷酸组、单纯阿霉素处理组、以及核仁素正义寡核苷酸联合阿霉素同时处理组对照，均有统计学意义。结论：1．核仁素反义寡核苷酸、接近IC50的阿霉素使MCF-7细胞核仁素的表达下调。2．核仁素表达下调能显著促进阿霉素所致的MCF-7细胞增殖抑制和凋亡。关键词核仁素，反义寡核苷酸，凋亡，MCF-7细胞，阿霉素Ⅱ硕十学位论文英文摘要Objective：ABSTRACTToclaritytheeffectofnucleolinonchemotherapeuticdrug(ADR)inducedinhibitionofproliferatio

4、nandapoptosisinMCF一7cell．Methods：ExpressionofnucleolininMCF一7cellsweredeterminedbyWesternblotting，CellularproliferationwasdeterminedbyMTr，whiletheapoptosisofMCF一7cellwasdetectedbyflowcytometryassays．Resuits：1．TheexpressionofnucleolinofMCF一7cellwasrepressedsignificantlyaftertransfectedwithantisen

5、seoligonucleotidebutnosignificantdifferencewasfoundafterthesenseoligonucleotidetransfected．2．ADRmarkedlyinhibitsnucleolinexpressioninMCF-7cells．3．Thedown-regulaionofnucleolingallenhancetheinhibitionofcellproliferationandpromotecellapoptosisbyADRinMCF-7cells．Therewasstatisticsignificanceamongthes

6、enseoligonucleotide，theonlyADRgroupandsenseoligonucleotideplusADRgroup．Conclusion：1．TheexpressionofnucleolinofMCF-7cellWasrepressedsignificantlyaftertransfectedbyantisenseoligonucleotideortreatedby111硕士学位论文英文摘要ADRwithnearIC50．2．Thedown-regulaionofnucleolincanhelptheADRinhibitthecellularprolifera

7、tionandinitatetheapoptosisinMCF一7cell．KEYWORDSnucleolin，antisenseoligonucleotide，apoptosis，MCF-7cell，Adriamycint硕士学位论文、-．__-。-．____．．．．_-．．．．____-____。．__．_____一缩略词ADRASFCMIC50MCF-7M旺．I．NUSense缩略词简表英文全称中文全称AdriamycinAntisens