荧光示踪法研究逆行岛状皮瓣静脉回流

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1、中国修复重建外科杂志2008年8月第22卷第8期·959·荧光示踪法研究逆行岛状皮瓣静脉回流荆志振俞光荣王栋游木荣张世民【摘 要】目的探讨采用荧光示踪法研究逆行岛状皮瓣静脉回流的可行性，并初步观察静脉回流规律。 方法 20只新西兰大白兔，每只取耳静脉血0.1mL，分离RBC并用FITC标记。流式细胞仪检测已标记的RBC阳性率及荧光强度，倒置荧光显微镜观察其形态。取20只新西兰大白兔，在动物双侧后肢内侧分别建立4cm×3cm隐动、静脉逆行岛状皮瓣模型（n=10）和顺行岛状皮瓣模型（n=10），血管蒂长3cm。将

2、一侧后肢随机设定为实验组，皮瓣制备后注射已标记的RBC悬液5 μL；对侧为对照组，不注射示踪剂。实验组按顺行和逆行皮瓣分成两组，即顺行皮瓣组和逆行皮瓣组，每组10个；再根据注入示踪剂途径不同，分为动脉和静脉2个亚组，每亚组5个皮瓣。注射示踪剂5s后取下皮瓣立即冷冻，取连续的3张冰冻切片（5～7μm），其中2张行HE染色和GENMED染色，另1张不染色直接压片，荧光显微镜观察荧光分布。 结果流式细胞仪分析FITC标记的RBC阳性率在99%以上，荧光强度均≥103；倒置荧光显微镜下标记的RBC呈均匀分布的绿色荧光

3、，荧光强度均匀、稳定。冰冻切片显示实验组皮瓣蒂部均出现荧光，对照组未见荧光。顺行岛状皮瓣组荧光主要分布在静脉腔、静脉壁、动脉内膜和外膜；逆行岛状皮瓣组荧光分布在动脉内膜、外膜和静脉壁。 结论荧光示踪剂可用于静脉回流研究，顺行岛状皮瓣静脉主要通过静脉腔、静脉壁、动脉内膜和外膜回流；逆行岛状皮瓣静脉主要通过动脉内膜、外膜和静脉壁的“迷宫式途径”回流。【关键词】逆行岛状皮瓣静脉回流荧光示踪  兔中图分类号：R616.2 R331.3  文献标志码：ASTUDYOFVENOUSDRAINAGEINRETROGRADE

4、ISLANDFLAPSBYFLUORESCENCETRACINGTECHNIQUEINARABBITMODEL/JINGZhizhen,YUGuangrong,WANGDong,YOUMurong,ZHANGShimin.DepartmentofOrthopaedics,TongjiHospital,TongjiUniversity,Shanghai,200065,P.R.China.Correspondingauthor:YUGuangrong,E-mail:yuguangrong2002@yahoo.co

5、m.cn【Abstract】ObjectiveToinvestigatethevenousdrainageinretrogradeislandflapsbyfluorescencetracingtechniqueandtoobservethepathwayofvenousdrainage.MethodsThe0.1mLvenousbloodwascollectedfromthemarginalearveinofeveryrabbit(n=20),respectively,anderythrocyteswere

6、separatedbycentrifugationandthenwerelabeledwithFITC.PositiverateandfluorescenceintensityofFITC-labeledRBCweredetectedbyflowcytometry.RBCmorphouswasobservedundertheinvertedfluorescencemicroscope.Saphenousretrogradeislandfasciocutaneousflapandantegradeislandf

7、asciocutaneousflap(4.0cm×3.0cminsizewithvascularpediclelengthof3.0cm)weresuccessfullyestablishedinhindlimbsof20NewZealandwhiterabbits．Onehindlimbofeachrabbitwasrandomlyassignedastheexperimentalgroupandthecontralateralsidewasassignedasthecontrol.Thesameflapw

8、asestablishedinthecontrolgroupwithoutanyfluorescencetracer.Accordingtoretrogradeorantegradeflaps,theexperimentalgroupwasdividedinto2groupswith10rabbitsineachgroup.Andthen,accordingtodifferentpathwaysof