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1、果树学报!""#，!$（!）%$&’($#")*+,-./*01,+234526-56柑橘组织!"#提取方法研究徐昌杰陈昆松张波王钱洁叶薇佳7浙江大学华家池校区园艺系8农业部园艺植物生长发育与生物技术重点开放实验室，浙江杭州&$""!9:摘要：从操作耗时、所得;<=产量和质量等方面比较了>种;<=提取方法提取甜橙叶片、幼果、成熟果实果皮和汁囊组织;<=的效果。结果表明，改良?+@*A法能从上述#种组织中获得较高产量和质量的;<=。用该方法提取的温州蜜柑成熟果实果皮;<=经;BCDE;扩增成功得到了蔗糖磷酸合成酶5F<=片段。该方法
2、还可适用于猕猴桃、梨、甜瓜、龙眼、苹果和桃果肉;<=的提取。关键词：柑橘果实；;<=；提取；电泳；;BCDE;中图分类号：4’’’文献标识码：=文章编号：$""9C99G"7!""#:"!C$&’C">#$%&’()*+,%-)’./)0!"#12%034%5)*60)785%0&.95..&,.H+EI.-@J26，EI6-K+-A*-@，LI.-@?*，M.-@N2.-J26，.-OP6M62J2.!"#$%&’(#)’*+,*&’-./0’/&#，,/%1-%.2-3%($/4，52#1-%)67)-8#&4-’9:;2#<
3、’%’#=6&-./0’/&%0>-)-4’&9?4@%A*&%’*&9*+,*&’-./0’/&%0B0%)’C&*D’2，"#8#0*$(#)’EF-*’#.2)*0*69，,%)6G2*/，52#1-%)6HIJJKL32-)%M#:.%034%：>Q63I*OA0*,;<=6R3,.532*-0,*Q#O2006,6-3S2-OA*03-’&/44-)#)4-432AA+6A，2-5/+O2-@0,+23/63，/6.0，T66/.-OJ+256A.5A*0,2T60,+23，U6,66V./+.36O+T*-32Q65*
4、-A+QT32*-，W26/O.-OX+./23W*0;<=2A*/.36OY=Q*O2026O?+@*AQ63I*OU.A0*+-O3*Z63I6Z6A3*-6.Q*-@3I6>Q63I*OA6V./+.36OY[-/WU23I3I6Q*O2026O?+@*AQ63I*O，I2@I6,.Q*+-3.-OX+./23W*0;<=5*+/OZ6A+556AA0+//W6R3,.536O0,*Q.//#S2-OA*032AA+6A36A36OYBI6;<=*Z3.2-6O0,*QT66/*0,2T63-’&/4/)42-/0,+23U
5、23I3I6Q*O2026O?+@*AQ63I*OU.AA+556AA0+//W+A6O3*.QT/20W.5F<=0,.@Q6-3*0A+5,*A6TI*ATI.36AW-3I.A6ZW;BCDE;YBI6Q63I*OU.A0*+-O3*Z6./A*A+23.Z/60*,6R3,.532-@;<=0,*QT+/T*0,2T6S2U20,+23，T6.,，Q6/*-，/*-@.-，.TT/6.-OT6.5IY;,(<)0’.：E23,+A0,+23；;<=；R3,.532*-；/653,*TI*,6A2A；;BCDE;提取高质
6、量的;<=是进行<*,3I6,-分析、;BC成熟果实组织一直是提取;<=较为困难的材DE;料之一，为此，_*T6‘Ca*Q6‘等]!^建立了适合芒果果以及5F<=文库构建等许多分子生物学研究的必要前提，因而备受研究者们重视。提取;<=的实组织;<=提取的方法，我们在此基础上加以改进最常用的方法有盐酸胍法、硫氰酸胍法、蛋白酶K并建立了适合提取猕猴桃果实组织;<=的方法]&^。法及酸性苯酚法等]$^，最常用的成套试剂7盒:有_206但近来我们在研究中发现改良后的方法可成功提取B65I-*/*@26A的B,2‘*/和D,*Q6@.公司的
7、;<=@6-3A柑橘幼果和叶片中的;<=，但提取成熟柑橘果实的等。各种方法在时间和试剂方面的消耗以及对仪器果皮;<=时产量明显偏低7比猕猴桃果肉低#(>设备的要求各有不同，所得;<=的质量也有差异。倍:，提取果肉样品时经常得不到;<=。植物组织的组分复杂，不同的植物材料，组成组分为了解决这个问题，我们对现有的几种;<=提各异，特别是多年生植物材料富含多酚类和多糖类取方法作了不同程度的改良，并在此基础上综合比物质，一些模式植物的;<=提取方法用于提取多较了不同方法对柑橘不同组织中;<=提取的效果年生植物材料时，难于去除多酚类和多糖类
8、杂质，7;<=的产量和质量:，以期为针对不同植物材料选这些方法对;<.A6抑制的能力、去除杂蛋白的能力择;<=提取方法提供指导。以及对细胞或组织的破碎能力等都影响了所得$材料和方法;<=的产量和质量，常出现获得的;<=产量低，质量差，易降解等问题，
