山医临床病原学检查

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1、临床病原学实验诊断山东大学齐鲁医院检验科孙恩华感染性疾病:指各种病原体(病原微生物、寄生虫)感染机体后所引起的传染性和非传染性疾病临床病原学检查的目的是确定感染的发生和性质，及早明确诊断，尽早选择适当的治疗方案，采取有效的预防措施，防止感染可能广泛传播所造成的危害．细菌、病毒、螺旋体、支原体、衣原体、立克次体、放线菌、真菌、寄生虫导致感染性疾病的病原体现代感染性疾病的流行病学特点新传染病陆续被发现，如O157大肠杆菌出血性肠炎、疯牛病、埃博拉出血热、新型肝炎病毒、SARS病毒、甲型H1N1流感病毒等一些业已绝迹的老传染病又重新出现，如梅毒、霍乱、结核等细菌出

2、现多重耐药性，导致抗感染治疗困难。医院感染和条件致病菌感染增加，免疫功能低下人群增多临床病原体检查的基本程序医生、护士、病人、检验师：正确采集运送标本。检验科：直接镜检、免疫学和分子生物学检测、病原体分离培养鉴定、药敏实验——报告结果。医生：明确诊断、合理用药。第一节标本采集、运送和检测方法标本采集的基本原则发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%。尽量在抗菌药物使用前采集标本。采集标本前应至少停药3天。如病人不能停药，应在下次抗生素使用前采集标本。标本采集时，应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其它杂菌的

3、污染。标本采集后应立即送至微生物实验室，放置时间过长会影响检验结果。如不能立即送检，一般应放在冷藏条件下保存送检。但某些菌株（如淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、嗜血杆菌、肺炎链球菌等）不仅要及时送检，而且在送检过程中要注意保温。盛标本的容器必须经灭菌处理，但不得使用消毒剂和酸类处理（到细菌室领取），以免残留液体影响细菌的生长。送检时，标本切勿污染容器的瓶口和外壁，防止污染和传播。送检标本应注明标本来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。血液标本的采集1.采血时机及次数:采血时机是明确诊断的第一重要因素。无论何时，采集血培养应该在使用抗生素之

4、前进行。怀疑原发性菌血症、真菌菌血症、脑膜炎、骨髓炎、关节炎或肺炎的患者：在寒战或发烧初期立即采集2或3份血培养。不明病因的发热，如隐性脓肿，伤寒热和波浪热：发热开始采集2或3份血培养。24h至36h后，估计温度升高之前（通常在下午）立即采集2份以上血培养。感染性心内膜炎，对急性心内膜炎患者1h（2h内）采集3份血培养，如果所有结果24h后阴性，再采集2份血培养。入院前两周内接受抗生素治疗的患者，连续三天采集血培养，每天2份。*一份血培养定义：同一穿刺所获得的血液接种到2瓶血培养瓶中（需氧瓶和厌氧瓶）2.采血部位多次采血时,应在不同部位进行。不要从血管插管内

5、采血。3.采血量成年人采血量为10~20ml,新生儿与婴幼儿为1~5ml。脑脊液标本的采集由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置于无菌容器中立即送检，不能暂时保存于冰箱中。（因引起脑膜炎的病原体脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等抵抗力弱，不耐冷，易死亡）胸腹水等穿刺液标本无菌注射器穿刺抽取，置于抗凝与不抗凝无菌容器中立即送检（或直接注入血培养瓶）。脓性标本应考虑同时做厌氧培养.尿液标本的采集应在用药前或停药3天后留取标本,并使尿液在膀胱内停留6~8h以上,起床后第一次尿样阳性率较高.无菌采集中段尿如考虑厌氧菌感染，采取膀胱穿刺法采集标本。排尿困难者

6、考虑导尿采集标本。呼吸道标本采集类型：鼻咽拭、痰和经气管采集的标本。上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结果分析时应予考虑。痰标本的采集采集时间：晨痰，且在取痰前用清水反复漱口。方法：（1）自然咳痰法：（2）气管镜下采集（3）气管穿刺法。创伤及脓肿标本的采集无菌生理盐水擦洗表面后，无菌棉拭子采集病灶深部的脓液和分泌物，置运送培养基送检。瘘管可用无菌手术取组织块或碎片放入无菌管内立即送检。脓肿标本用碘酒、酒精消毒皮肤后，无菌注射器抽取脓液，也可切开排脓后用无菌棉拭子沾取，或将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌容器内送检。封闭性脓肿怀疑厌氧菌感染，应隔绝空气采集。采样前

7、病灶局部应避免使用抗菌药物或消毒剂。粪便标本的采集自然排便，挑取脓、血或粘液部分于清洁容器中送检。排便困难者，采用直肠拭子采集。怀疑霍乱弧菌感染引起的腹泻，立即接种或将标本置于碱性蛋白胨水或卡-布运送培养液送检。传染性腹泻应连续送检3次。生殖道标本男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。女性：用无菌棉拭子采集阴道或宫颈分泌物。怀疑厌氧菌感染，应采用阴道后穹隆穿刺法，并立即接种于厌氧平板。疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送检。厌氧菌培养厌氧菌是人体许多部位（如皮肤、口咽部、肠道和泌尿生殖道）正常菌群中的一部分，因此下列标本不

8、能做厌氧培养：（1）咽、鼻、尿道或直肠拭子。（2）