生物化学第一章

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1、第一章 蛋白质化学胡疆13987478608第一节蛋白质(protein)及其生物学功能生物化学的基本内容包括:发现和阐明构成生命物体的分子基础-生物分子的化学组成、结构和性质;生物分子的功能与生命现象的关系;生物分子在生物机体中的相互作用及其变化规律。生物信息大分子具有如下特征:生物分子中最重要的是糖、酯、核酸和蛋白质四类物质分子量一般都很大由结构小分子结构单元组成.顺序排列。结构复杂:线性信息,三维信息2、蛋白质的重要生物学功能3、氧化供能其他生物学功能:营养蛋白,结构,毒蛋白第二节蛋白质的分子组成一、元素组成1、主要元素:碳、氢、氧、氮和硫,有些蛋白质还含有少量磷和金属元素。2、特

2、点:各种蛋白质的含氮量很接近,平均含氮量为16%。3、定氮法测定蛋白质含量:蛋白质含量=6.25×样品含氮量二、结构单位——氨基酸(aminoacid)1、蛋白质的结构单位D-氨基酸:抗生素,生物碱Tyr存在和用途Gly甜味,胶原中含25%,可治疗胃酸过多与肌力衰竭Ala丝纤维蛋白中含25%Val卵和乳蛋白含10%Leu谷物,玉米蛋白中含22-24%Ile蜂蜜、肉蛋白中含5-6.5%Phe一般蛋白含4-5%Tyr奶酪中含量最多,明胶中最少Try各种蛋白中均含少量Ser丝蛋白中含量丰富,精蛋白中占7.8%Thr酪蛋白较多,肉、乳、卵蛋白占5%,有抗贫血作用存在和用途Cys毛,发,角,蹄等角

3、蛋白中含量多,解毒,促进细胞再生Met肉、卵蛋白中含3-4%,抗脂肪肝,治疗肝炎,肝硬化Asp多种蛋白中均有,植物蛋白中尤多Glu谷物蛋白中含20-45%,用于降血氨,治肝昏迷,味精Asn多种蛋白中均有Gln多种蛋白中均有Arg鱼精蛋白的主要成分Lys肉、卵蛋白中含7-9%,血红蛋白中含量也高His血红蛋白中含量最高,可作消化性溃疡的辅助治疗剂Pro结缔组织与谷蛋白中最多,明胶中含20%非蛋白质氨基酸存在和用途β-丙氨酸泛酸及辅酶A的组成成分γ-氨基丁酸与脑组织营养及神经传递有关高半胱氨酸甲硫氨酸生物合成的中间产物高丝氨酸Thr,Asp,Met代谢的中间产物鸟氨酸尿素生成的中间产物瓜氨酸

4、尿素生成的中间产物苯甘氨酸抗菌素甲基天冬氨酸天冬霉素蛋白质基本结构单位:L--氨基酸-氨基酸:脯氨酸(亚氨基酸)除外L-氨基酸:甘氨酸(无不对称C)除外氨基酸结构通式:RCH(NH2)COOH常见氨基酸种类:20种。小结2、氨基酸分类:按其侧链R的结构和理化性质分类①非极性、疏水氨基酸(非极性R基氨基酸):Val,Leu,Ile(支链);Gly(无旋光异构);Met(含硫);Phe(芳香族);Pro(亚氨基)②极性、中性氨基酸(不带电荷的极性R基氨基酸):Ser,Thr(含羟基);Tyr,Trp(芳香族);Cys(含硫);Gln,Asn(含酰氨)③酸性氨基酸(含有两个羧基):Glu(

5、含γ羧基)、Asp(含β羧基)④碱性氨基酸(含有两个以上氨基):Arg(胍基)、His(咪唑基)、Lys(ε氨基)含硫氨基酸:Met、Cys芳香族氨基酸:Phe、Tyr、Trp三、氨基酸的理化性质1、物理性质2、两性解离等电点(isoelectricpoint,pI):在某一pH环境中,氨基酸解离成阳性离子及阴性离子的趋势相等,所带净电荷为零,在电场中不泳动。此时,氨基酸所处环境的pH值称为该种氨基酸的等电点(pI)。甘氨酸的酸碱滴定曲线(zwitterion)等电点计算①侧链为非极性基团或虽为极性基团但不解离的氨基酸:pI=½(pK1+pK2)②酸性氨基酸(Glu、Asp)及Cys:p

6、I=½(pK1+pKR)③碱性氨基酸(赖、精、组):pI=½(pK2+pKR)带电状态判定pI-pH<0…………….带负电pI-pH>0…………….带正电pI-pH=0…………….不带电等电点的计算3、紫外吸收:Trp、Tyr和Phe在280nm波长附近具有最大吸收峰,其中Trp的最大吸收最接近280nm氨基酸的化学反应由α-氨基参与的反应1.与亚硝酸的反应:VanSlyke定氮法,生产上常用于测定蛋白质的水解程度。氨基酸的化学反应由α-氨基参与的反应2.与甲醛反应:甲醛滴定法应用:氨基酸定量分析-甲醛滴定法(间接滴定)A.直接滴定,终点pH过高(12),没有适当指示剂。B.与甲醛反应,

7、滴定终点在9左右,可用酚酞作指示剂。C.避免氨基的干扰D.简单快速,一般用于测定蛋白质的水解速度。3.与醛类反应氨基酸的化学反应由α-氨基参与的反应4.氨基酰化:氨基保护氨基酸的化学反应由α-氨基参与的反应5.二硝基氟苯:黄色,肽链末端分析应用:鉴定多肽或蛋白质的N-末端氨基酸A.虽然多肽侧链上的ε-NH2、酚羟基也能与DNFB反应,但其生成物,容易与α-DNP氨基酸区分和分离★首先由Sanger应用,确定了胰岛素的一级结构A.肽分

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