论文答辩ppt皖西学院

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1、欢迎各位评委老师莅临指导！决明子多糖氯仿-正丁醇法脱蛋白答辩人：胡学文指导老师：乔德亮2013届学士学位论文答辩论文的主要内容第一部分第二部分第三部分前言实验方法实验结果第一部分前言一、决明子概况决明子（SemenCassiae）是豆科植物决明或小决明的成熟干燥种子。决明子具有较好的降血脂，降血压，抗氧化，抗衰老等疗效。决明子内含有多种成分，主要含蒽醌类、萘骈-吡咯酮类、脂肪酸类、氨基酸和无机元素。决明子中含有胱氨酸、γ-羟基精氨酸、组氨酸、半乳糖配甘露聚糖、葡萄糖、半乳糖、木糖、棉子糖以及胱氨酸、天门冬氨酸、γ-羟基精氨酸等。目前对决明子的成分研究主要集

2、中在蒽醌类，由于多糖是决明子中具有医疗保健作用的主要成分之一，所以目前对多糖的研究具有很高的价值。二、课题的研究目的及意义决明子中多糖成分具有很好的抗氧化作用，延缓衰老。所以对决明子中多糖的提取具有一定的意义。多糖的提取方法比较多，但是在多糖的提取过程中会伴随蛋白质的产生，所以除去蛋白质是多糖提取纯化的一个关键步骤，因此有必要对决明子的多糖脱蛋白方法进行研究。本论文研究的目的是找到最合适的脱蛋白方案。第二部分实验方法一、多糖、蛋白质含量的测定1、决明子多糖含量测定决明子多糖测定采用苯酚-硫酸法[8]，取多糖溶液0.1ml稀释至1.0ml,加6%苯酚溶液0.

3、5ml,浓硫酸2.5ml,混匀，冷却，测490nm波长吸光值。2、蛋白质含量测定取决明子多糖溶液，使用石英比色皿，用蒸馏水作为对照，在280nm波长处，测蛋白质的吸光度。二、脱蛋白效果的评价多糖损失率=（脱蛋白前多糖含量-脱蛋白后多糖含量）/脱蛋白前多糖含量×100%蛋白质去除率采用280nm吸光值比较法，将脱蛋白前的蛋白质吸光值和脱蛋白后的蛋白质吸光度进行比较，得出蛋白质去除率。三、单因素实验1、单因素实验一——正丁醇-氯仿比例对脱蛋白的影响正丁醇-氯仿混合液用量为30%，脱蛋白次数为6次，脱蛋白时间为40min，正丁醇-氯仿比例设置为15%、20%、2

4、5%、30%、35%五个梯度，实验重复两次，取平均值，得出该因素对脱蛋白的影响。2、单因素实验二——正丁醇-氯仿混合液用量对脱蛋白的影响正丁醇-氯仿比例为25%，脱蛋白次数为6次，脱蛋白时间为40min，正丁醇-氯仿混合液用量设置为15%、20%、25%、30%、35%五个梯度，实验重复两次，取平均值，得出该因素对脱蛋白的影响。3、单因素实验三——脱蛋白次数对脱蛋白的影响正丁醇-氯仿比例为25%，正丁醇-氯仿混合液用量为30%，脱蛋白时间为40min，脱蛋白次数设置为3、4、5、6、7、8六个梯度，实验重复两次，取平均值，得出该因素对脱蛋白的影响。4、单因

5、素实验四——脱蛋白时间对脱蛋白的影响正丁醇-氯仿比例为25%，正丁醇-氯仿混合液用量为30%，脱蛋白次数为6次，脱蛋白时间设置为10、20、30、40、50mim五个梯度，实验重复两次，取平均值，得出该因素对脱蛋白的影响。四、正交实验正交实验因素水平表水平因素A比例(v/v)B用量(v/v)C次数D时间(min)12320%25%30%20%25%30%567203040第三部分实验结果一、单因素实验1、单因素实验一——正丁醇-氯仿比例对脱蛋白的影响结论：15%比例梯度为最佳梯度，多糖损失率为27.3%,蛋白质去除率为40.9%2、单因素实验二——正丁醇-

6、氯仿混合液用量对脱蛋白的影响结论：正丁醇-氯仿混合液用量为15%时为最佳梯度，蛋白质去除率高达34.4%3、单因素实验三——脱蛋白次数对脱蛋白的影响结论：6次为最佳脱蛋白次数。4、单因素实验四——脱蛋白时间对脱蛋白的影响结论：50分钟为最佳脱蛋白时间。二、正交实验结论：由正交实验结果分析表可知，根据R值的大小，得出影响决明子多糖脱蛋白的因素的顺序是A>C>B>D，即影响大小为比例>次数>用量>时间，最佳脱蛋白条件为A3B1C2D2即正丁醇-氯仿的比例为30%，混合液用量为20%，脱蛋白次数6次，振摇时间30min。该条件下脱蛋白效果最好。实验号ABCD蛋白

7、质去除率（%）多糖保留率（%）111117.370.02122215.589.63133322.382.04212342.464.95223130.265.16231215.070.37313247.261.88321330.964.19332146.074.4K145.0996.9053.1983.49K287.6076.59103.89107.70K3124.1183.3199.6995.61k115.0332.3017.7327.83k229.2025.5334.6335.90k341.3727.7733.2331.87R26.336.7716.90

8、5.97主次顺序A>C>B>D优水平A3B1C2D2优组合A3B1