《常用仪器分析汇报》PPT课件

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1、仪器分析汇报孙雁斌红外光谱分析流式细胞仪激光扫描共聚焦显微镜动态光散射仪核磁共振波谱分析红外光谱分析（IR）红外光谱(InfraredSpectroscopy,IR)又称分子振动-转动光谱，属分子吸收光谱。样品受到频率连续变化的红外光照射时，分子吸收其中一些频率的辐射，分子振动或转动引起偶极矩的净变化，使振-转能级从基态跃迁到激发态，相应于这些区域的透射光强减弱，记录百分透过率T%对波数或波长的曲线，即红外光谱。近红外(倍、泛频)中红外远红外波长/m0.75-2.52.5-2525-1000波数/cm-113333-40004000-40

2、0400-10跃迁类型分子振动分子振动转动分子转动近红外光谱区：低能电子能级跃迁含氢原子团：-OH、-NH、-CH伸缩振动的倍频吸收峰稀土及过渡金属离子配位化学的研究对象适用于水、醇、高分子化合物、含氢原子团化合物的定量分析中红外光谱区：分子的振动、转动基频吸收光谱区应用最为广泛的红外光谱区远红外光谱区：气体分子的转动能级跃迁液体与固体中重原子的伸缩振动晶体的晶格振动某些变角振动、骨架振动-异构体的研究金属有机化合物、氢键、吸附现象研究该光区能量弱,较少用于分析红外光谱的应用及特点：应用：推断分子的结构及立体构型；测定分子的键长、键角推断化

3、学键的强弱及极性；计算相关热力学参数等特点：能够更为精细的表征分子结构的差别；测定快速、灵敏度高、试样用量少；能分析各种状态的试样，应用范围广；与色谱等仪器联用具有强大的定性功能色散型红外光谱仪光源单色器吸收池样品检测器数据处理和仪器控制参比切光器（斩波器）硅碳棒检测器光源单色器吸收池数据处理仪器控制产生红外吸收的条件辐射光子的能量应与振动跃迁所需能量相等。辐射与物质间有偶合作用，产生偶极矩变化。峰数目——分子的振动自由度振动自由度=3N-（平动自由度+转动自由度）线性分子：振动自由度=3N-5非线性分子：振动自由度=3N-6例：水分子吸收

4、峰数目少于振动自由度的原因：存在没有偶极矩变化的振动模式存在能量简并态的振动模式，即振动频率相同的峰重叠振动吸收的强度小，仪器的分辨率分辨不出，从而检测不到某些振动模式所吸收的能量不在中红外光谱区。吸收峰的位置及影响因素虎克定律：k：化学键的力常数，与键能和键长有关μ：双原子的折合原子量任意两个相邻的能级间的能量差为：化学键键强越强，键的力常数k越大,原子折合质量μ越小，化学键的振动频率越大，吸收峰将出现在高波数区。电子效应：诱导效应、吸电效应；使吸收峰向高波数方向移动（蓝移）共轭效应：n-共轭效应（中介效应），-共轭效应（C效应）；

5、使吸收峰向低波数方向移动（红移）氢键效应：分子内氢键、分子间氢键；使吸收峰向低波数方向移动（红移）振动耦合：当两个振动频率相同或相近的基团相邻并由同一原子相连时，两个振动相互作用产生共振，吸收谱带裂分，形成双峰（高频和低频）。费米共振：当一振动的倍频与另一振动的基频接近（2νA=νB）时，二个振动相互作用而产生强吸收峰或者发生谱带裂分的现象。空间效应:由于空间阻隔，分子平面与双键不在同一平面，此时共轭效应下降，吸收峰蓝移。张力效应:环张力：四元环>五元环>六元环;环外双键随环张力增加，吸收峰蓝移。环内双键随环张力增加，吸收峰红移物质状态：由

6、固态向气态转变时，其红外吸收峰将蓝移。溶剂效应：极性基团的伸缩振动峰随溶剂极性增加而红移。特征区与指纹区特征峰：与官能团相联系的、在一定频率范围内出现的化学键的振动吸收峰。特点：吸收峰稀疏、较强，易辨认指纹区：1300~900cm-1：C-X(X：O、N、F、P、S)、P-O、Si-O伸缩振动区900~400cm-1：-CH2平面摇摆、苯环取代、C-H面外变形振动区特点：吸收峰密集、难辨认流式细胞仪（FCM）流式细胞仪（flowcytometer，FCM）是以激光为光源、检测生物学颗粒理化性质的仪器。流式细胞术（flowcytometry，

7、FCM）是应用流式细胞仪对悬浮液中的细胞或细胞器进行快速测量和多参数检测的细胞分析技术。同时依赖测量到的参数还可以用物理的方法将一个群体中的细胞亚群分选出来，即流式细胞分选术。FCM与其他细胞分析技术相比，有如下特点：高速度：每秒可检测1000~5000个细胞。高灵敏度：每个细胞只要带有1000~3000个荧光分子就能检出，两个细胞之间有5%的差别就可区分出来，光散射的灵敏度为0.3um。高精度：在细胞悬液中测量细胞，比其他分析技术的变异系数更小，分辨率高。高纯度：分选细胞的纯度可大于99%以上。多参数：可同时定量检测单个细胞的DNA等多个

8、参数。在适当的条件，可对活细胞进行无害性分析和分选。流式细胞仪基本结构流式细胞仪基本结构包括五部分：以上整个系统由电子电路和计算机控制，用以收集、显示、分析、储存被测定的各种信号