《质粒和噬菌体》PPT课件

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1、第二章质粒和噬菌体内容：质粒质粒的基本特征质粒的分类噬菌体噬菌体的基本特征λ噬菌体M13噬菌体图1.抗生素作为质粒的选择性标记基因1.质粒1.1概念：存在于细菌细胞中能独立于染色体DNA而自主复制的共价、闭合、环状的双链DNA分子。并不是细菌生长所必需的，但可以赋予细菌某些抵御外界环境因素不利影响的能力。1.质粒1.2质粒的基本特征自主复制性可扩增性严紧型(Stringent)松弛型(Relaxed)可转移性(穿梭载体Shuttlevector）不相容性Conjugation:接合Compatibility：相容性Incompatibility:不相容性纤毛1.质粒1.3质粒的大小表2-1代

2、表性质粒的大小质粒大小/kb(千碱基对)来源pUC82.1E.ColiColE16.4E.ColiRP454PseudomonasF95E.ColiTOL117PseudomonasputidapTiAch5213Agrobacteriumtumefaciens1.4质粒Fertility/F质粒：含有tra基因，促进接合转移。Resistance/R质粒：含有氯霉素、青霉素或水银抗性基因。如RP4，发现于假单胞杆菌。Col质粒：如存在于E.coli中的CoE1。降解质粒（Degradativeplasmids）致瘤质粒（Virulenceplasmids）农杆菌Ti质粒1.质粒1.5细菌之

3、外的质粒酵母中发现了2μm的环状质粒。其他真核生物中尚未发现质粒存在。2.噬菌体2.噬菌体2.1噬菌体的特点StructureInfectionprocess2.噬菌体λ噬菌体的侵染循环Thelysogenicinfectioncycleofbacteriophageλ2.噬菌体2.2λ双链噬菌体DNA载体λDNA分子的基因组织λDNA全长49kb。λ遗传图谱的特点:相同功能基因在基因组中聚集在一起。这使他们一起启动或关闭，而不是单独起作用。2.噬菌体λDNA分子的基因组织Theλgeneticmapshowingthepositionsoftheimportantgenesandthefu

4、nctionsofthegeneclusters.ControlintegrationControlgeneexpressionControlcoatprotein2.噬菌体λDNA的线状和环状形式在噬菌体头部，λ以双链线状存在，但在分子的两端各含12个核苷酸的突起GGGCGGCGACCT,CCCGCCGCTGGA，这两端的单链片段是互补的，可以通过碱基互补配对形成环状分子，完整的双链分子。λ的粘端称为cos(Cohensiveendsite)位点。cos位点的两个作用：使进入细菌的DNA分子成为环状，这是插入细菌基因组的先决条件。作为识别位点，由内切酶将原噬菌体从细菌基因组切下来。2噬菌体

5、2.3M13单链噬菌体DNA载体M13的结构M13是一个线状噬菌体，其分子仅有6407kb，分子是单链环状的。M13含有的基因数目也少，M13的头部装配仅需要3种不同的蛋白，15个蛋白分子。M13的侵染周期很短，不需要插入寄主的基因组。M13通过细菌的纤毛插入大肠杆菌，单链分子作为模板合成互补链，形成双链DNA分子。2.3M13单链噬菌体DNA载体细菌细胞每分裂一次，大约可以释放1000个新的病毒颗粒。2.3M13单链噬菌体DNA载体2.3M13单链噬菌体DNA载体M13作为克隆载体的理由：基因组小于10kb复制的双链形式类似于质粒载体利用M13作载体可以获得单链的DNA。3病毒作为其它生物

6、的载体大部分生物都能被病毒侵染。动物细胞中病毒广泛作为基因克隆的载体：猿猴病毒simianvirus40(SV40)adenoviruses(腺病毒)昆虫病毒baculovirus(杆状病毒)植物中可利用的载体较少。Theend!Thanks!