《非发酵菌及检验》PPT课件

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1、非发酵革兰阴性杆菌p335程曦复习疑为伤寒沙门菌感染,应如何进行微生物学检验?Widaltest的定义和结果解释。根据生化反应和O抗原,可将志贺菌属怎样分群?请解释什么是“外斐试验”。内容概述假单胞菌属(铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食单胞菌)不动杆菌属(鲍曼不动杆菌)军团菌属要求1.掌握非发酵革兰阴性菌(非发酵菌)的概念、特点及非发酵菌的初步辨认和初步分群方法;掌握铜绿假单胞菌的生物学特性及细菌学检验方法。2.熟悉嗜麦芽窄食单胞菌和不动杆菌属的生物学特性及细菌学检验方法。3.了解常见非发酵菌在医院感染中的意义,了解军团菌属

2、的生物学特性及检验方法。定义:非发酵菌(nonfermenters)革兰阴性杆菌,指一大群不发酵葡萄糖或仅以氧化形式利用糖类的需氧或兼性厌氧、无芽胞的革兰阴性杆菌。主要特点:菌属菌种多,在分类学上分别属于不同的科、属和种;大多数不发酵糖类或仅以氧化形式利用糖类;大多数为专性需氧菌;主要存在于外界环境中,大多数为条件致病菌,是目前医院感染的主要病原菌。常见菌属假单胞菌属(Pseudomonas)不动杆菌属(Acinetobacter)窄食单胞菌属(Stenotrophmonas)伯克菌属(Burkholderia)产碱

3、杆菌属(Alcaligenes)无色杆菌属(Achromobacter)莫拉菌属(Moraxella)黄杆菌属(Flavobaterium)艾肯杆菌属(Eikenella)土壤杆菌属(Agrobacterium)黄单胞菌属(Xanthomonas)丛毛单胞菌属(Comamonas)金氏杆菌属(Kingella)食酸菌属(Acidovorax)鉴定系统非发酵菌生化鉴定系统假单胞菌属(Pseudomonas)一、分类P335假单胞菌属包括200多个菌种,尤以铜绿假单胞菌(P.aeruginosa)多见。恶臭假单胞菌生物变

4、种(P.puticabiovars)斯氏假单胞菌(P.stutizeri)曼多辛假单胞菌(P.mendocina)产碱假单胞菌(P.alcaligenes)假产碱假单胞菌(P.pseudoalcaligenes)二、概述部分(自学)生物学特性致病物质和所致疾病微生物学检验药物敏感试验三、铜绿假单胞菌(一)细菌特性1.形态染色革兰阴性杆菌,菌体细长,且长短不一,有时呈球杆状或丝状,单个、成对或短链状排列,无芽胞,有荚膜,菌体一端有单鞭毛。2.培养特性专性需氧,最适生长温度25~30℃,可在42℃生长,4℃不生长。营养要

5、求不高,普通培养基上均能生长。产生多种色素,常见有绿脓素和荧光素。在液体培养基中呈表面菌膜生长,菌液上层为蓝绿色。普通琼脂平板:菌落圆形、大小不一、边缘不整齐、扁平稍隆起、湿润光滑、常成融合状态。血琼脂平板:菌落大而扁平、有金属光泽、有生姜味,菌落周围有透明溶血环。麦康凯琼脂平板:菌落微小、无色透明,中心常呈绿色。3.生化反应氧化酶+O/F试验为氧化型(O)精氨酸双水解酶试验+硝酸盐还原试验+。4.抗原构造P338O抗原:2种,成分分别是外膜蛋白(属特异性)和脂多糖(型特异性)。H抗原黏液抗原(S抗原)菌毛抗原1.致

6、病因子(1)侵袭力:粘附素、荚膜多糖(2)毒素:外毒素、内毒素(3)绿脓素(4)侵袭性酶类:弹性蛋白酶、磷脂酶C(二)临床意义P3382.所致疾病医院感染的主要病原菌。烧伤创面感染、皮肤感染、肺部感染、泌尿道感染、中耳炎、脑膜炎、心内膜炎、败血症、急性角膜穿孔等。也可引起小儿类似沙门菌和霍乱样的严重腹泻。多重耐药,能天然抗多种药物耐药机制:酶、菌体成分、外排泵、外膜渗透性改变、生物膜等(三)微生物学检验脑脊液、脓汁、痰液、尿液直接涂片检查分离培养(BAP、MAC)血液、环境用品增菌培养粪便分离培养(SS、MAC)可疑

7、菌落初步鉴定形态染色特点菌落特征气味绿脓素氧化酶+O/F:O最后鉴定生化试验色素鉴定分型试验(血清学、噬菌体)三、其它假单胞菌不动杆菌属(Acinetobacter)P341归属奈瑟氏菌科。根据DNA-DNA杂交和营养特征分为32个基因种,但只有10个基因种16种不动杆菌有菌名,临床常见:基因种1:醋酸钙不动杆菌(A.calcoaceticus)基因种2:鲍曼不动杆菌(A.baumannii)基因种4:溶血不动杆菌(A.haemolyticus)基因种5:琼氏不动杆菌(A.junii)基因种7:约氏不动杆菌(A.jo

8、hnsonii)基因种8:洛菲不动杆菌(A.1woffi)一、分类1.形态染色革兰阴性杆菌,多为球杆状,单个存在或成双排列,无芽胞,无鞭毛,粘液型菌株有荚膜。二、细菌特性2.培养特性专性需氧,营养要求不高,最适生长温度为37℃,但有些菌株可在42℃生长。血琼脂平板:菌落圆形、光滑、边缘整齐、灰白色,多数菌株不溶血,有些β溶血。麦康凯琼脂平板:菌

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